去甲斑蝥素通过Nrf2通路保护新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的机制

目的探究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)预处理介导核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用。方法60只新生幼鼠分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组12只。用不同剂量NCTD预处理低、中、高剂量组幼鼠,假手术组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃。除假手术组外,其余各组均构建缺氧缺血性脑损伤模型,造模成功后,分别检测各组大鼠神经功能评分、脑积水量、神经细胞凋亡率、氧化应激指标[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-P_(x))]、炎症因子指标[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、Nrf2、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,各组缺氧缺血幼鼠神经功能评分均显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠神经功能评分显著改善(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率显著增加(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率随之降低(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠氧化应激指标MAD含量显著上升,SOD和GSH-P_(x)含量显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,MDA含量随之下降,SOD和GSH-P_(x)含量随之上升(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠炎症因子指标IL-6和TNF-α水平显著上升,IL-10水平显著降低(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,IL-6和TNF-α水平随之降低,IL-10水平随之升高(P<0.05),与假手术组相比,各组幼鼠脑组织内Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),而与模型组相比,NCTD预处理的低、中和高剂量组幼鼠脑组织内Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达显著上升,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论NCTD通过激活Nrf2信号通路,抑制炎症反应和氧化应激反应,对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤有较好的脑保护作用。