NP-HPLC法测定二氯二茂钛原料药的含量及有关物质

目的:建立正相高效液相色谱法测定有机金属抗癌原料药二氯二茂钛的含量及有关物质。方法:采用 Shimadzu LC-10A 液相色谱系统,色谱条件:以氰基 Lichrosorb—CN(4 mm×250 mm,5 μm)为色谱柱,以正己烷-二氯甲烷(50:50)为流动相,流速:1.0 mL·min^(-1),紫外检测波长:254 nm,柱温:25℃。以ω-溴代苯乙酮为内标测定二氯二茂钛原料药的含量;以自身对照法测定有关物质。结果:样品中待测组分与内标物分离良好,线性范围为2.5～50μg·mL^(-1),回归方程为 Y=0.0710X+0.0562,r=0.9999(n=7);日内和日间精密度 RSD 均小于1.0%,最低检测限为2 ng;方法的平均回收率(n=9)为99.9%。结论:方法简便、快速,结果准确,专属性强,灵敏度高,可同时测定有机金属类抗癌原料药二氯二茂钛的含量及有关物质。

超声提取正相高效液相色谱法测定大豆及大豆油中的磷酸甘油酯

建立了超声提取-固相萃取纯化/正相高效液相色谱测定大豆及大豆油中磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)的方法。考察了提取溶剂、超声功率、超声时间、提取温度及净化方式的影响,并研究了不同色谱固定相对磷酸甘油酯分离效果的影响。优化的实验条件为:以氯仿-甲醇(2∶1,体积比)为提取溶剂,1 500 W功率超声提取30 min;氨基固相萃取柱为纯化小柱;正己烷-异丙醇-1%HAc(8∶8∶1,体积比)为流动相。在该条件下,PC、PE、PI的线性范围分别为0.08～8.00、0.15～15.00、0.30～20.00 g.L-1,定量下限分别为0.021、0.050、0.060 g.L-1,检出限在8～23 mg.L-1之间,其在大豆和大豆油中的回收率为85%～108%。日内与日间精密度分别不大于4.7%和8.6%。

电子烟烟液中烟碱旋光异构体的手性液相色谱分离及测定

建立了手性色谱柱-液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法测定电子烟烟液中烟碱旋光异构体,即左旋烟碱(S-(-)-烟碱)和右旋烟碱(R-(+)-烟碱),对分析方法进行了优化和表征。结果表明:(1)最优的色谱条件为:采用大赛璐手性柱CHIRALPAK-IC,流动相为正己烷/异丙醇(体积比为95:5,含0. 1%二乙胺),流速1. 0 m L·min-1,等度洗脱。在优选条件下,电子烟烟液中左旋烟碱和右旋烟碱能实现基线分离,分析时间仅需18 min;(2)左旋烟碱和右旋烟碱分别在15～700μg·m L-1、0. 75～30μg·m L-1浓度范围内线性关系良好,二者检出限均为0. 02 mg·g-1。本方法左旋烟碱的日内、日间精密度分别为0. 73%、1. 67%,右旋烟碱的日内、日间精密度分别为4. 50%、8. 60%;二者回收率的结果在95. 50%～104. 5%之间;(3)选取不同口味、不同焦油量的电子烟烟液样品67个,对烟碱旋光异构体分别进行测定,结果表明电子烟烟液中主要为左旋烟碱,右旋烟碱检出率仅为12%,其含量占总烟碱的比例为0. 41%～4. 55%;(4)选取电子烟烟液样品20个,采用所建立的方法测定电子烟烟液和对应的电子烟气溶胶中左旋烟碱和右旋烟碱的含量,结果表明含有右旋烟碱的电子烟烟液所对应的电子烟气溶胶中未检出右旋烟碱。

牙周炎患者唾液中多胺水平的改变

目的 探讨牙周炎患者唾液多胺水平的变化,建立正相高效液相色谱的测定方法。方法 牙周炎患者唾液经纯化、丹磺酰氯衍生化后,用苯提取,以Hypersil BDS CN为正相色谱柱,丙酮-氯仿(2:98,V/V)为流动相,检测波长为425 nm,流速1 ml/min。 结果 多胺中腐胺和精胺在50～1 000 nmol/ml范围内线性关系均良好(r=0.999 1;r=0.999 2),本法回收率分别为94.65％和90.48％,RSD为1.6％和2.1％;牙周炎患者唾液中多胺水平明显增高。结论 本法灵敏、稳定,重现性好,检测病人唾液中多胺含量具有临床实用意义。

正相高效液相色谱法测定腌腊肉制品中磷脂酰胆碱氢过氧化物的含量

采用正相高效液相色谱法对腌腊肉制品中的磷脂酰胆碱氢过氧化物(PC-OOH)进行检测。腌腊肉制品中的PC-OOH用氯仿-甲醇(2∶1,V/V)提取,以合成的C16∶0/18∶2 PC-OOH为标样,采用正相高效液相色谱-紫外法进行检测。色谱柱:Lichrosorb Si60(250 mm×4.0 mm,5μm);流动相:A为水,B为正己烷-异丙醇(3∶2,V/V),采用梯度洗脱;流速:1 m L/min;柱温:30℃;检测波长:234 nm。结果表明:C16∶0/18∶2 PC-OOH在20~600 nmol/m L范围内呈现良好的线性关系(R2=0.999 9),检出限为5.8 nmol/m L,定量限为19.4 nmol/m L,不同水平的平均回收率为79.4%~91.9%。实际样品分析显示,农家腊肠A、B和火腿中方样品中PC-OOH的含量比较高,为92.4、106.4 nmol/g和102.5 nmol/g,烟熏肉中未检出PC-OOH。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于腌腊肉制品中PC-OOH的定量分析。

正相手性高效液相色谱法拆分卤代苯丙氨酸衍生物

目的:建立手性固定相正相高效液相色谱法拆分首次报道合成的 D、L-苯丙氨酸衍生物的光学异构体。方法:采用 O,L′-二(3,5-二甲基苯甲酰)-N,N′-二烯丙基-L-酒石酸肼(KR100-CHI-I DMB)手性色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为正己烷-无水乙醇-三氟醋酸(100:10:0.4),流速:0.5 mL·min^(-1),检测波长:220 nm。结果:除2,5-二氯-苯丙氨酸外的3对 D、L-卤代苯丙氨酸光学异构体得到了分离,并用建立的分离方法对酶拆分得到的卤代苯丙氨酸进行了纯度检查。结论:方法简单、灵敏,可用于检查卤代苯丙氨酸的纯度。

盐酸倍他洛尔的手性液相色谱法拆分及其左旋体的稳定性分析

目的：建立高效液相色谱法拆分盐酸倍他洛尔消旋体的方法，并对其左旋体进行光学纯度稳定性考察。方法：采用正相高效液相色谱法，使用DaicelOJ—H柱和OD—H柱（250mm×4．6mm，5μm）对其异构体进行拆分，流动相分别为正己烷：异丙醇：二乙胺（96：4：0．5，体积比）和正己烷：异丙醇：二乙胺（70：30：0．5。体积比）；柱温20—40℃，流速0．5～1．5mL／min，紫外检测波长190—400nm。并采用OD—H柱对盐酸左旋倍他洛尔光学纯度稳定性进行研究。结果：建立了手性色谱柱快速拆分盐酸倍他洛尔消旋体的方法，0J—H柱手性拆分最优化条件为紫外检测波长274nm。流速0．8mL／min，柱温25℃，正己烷、异丙醇和二乙胺的体积比为96：4：0．5；稳定性试验结果显示盐酸左旋倍他洛尔在高温、高湿和强光照因素下，在10d内光学纯度接近100％，且该方法具有较好的专属性。结论；该方法可以快速、高效地拆分盐酸倍他洛尔消旋体，为其原料药及成品的质量控制提供依据。左旋倍他洛尔的光学纯度具有很好的稳定性，不易发生消旋化。

仲丁威三种测定方法的比较

本文采用反相高效液相色谱法和改进的气相色谱法对仲丁威含量进行了测定，并与ＣＩＰＡＣ采用的正相高效液相色谱法测定结果进行了比较。结果表明：反相液相色谱法与正相液相色谱法等效；气相色谱法经改进后降低了仲丁威的热分解。三种方法对仲丁威原药及乳油含量的测定结果的相对误差在允许的范围之内。

奶粉中β-胡萝卜素的高效液相色谱法测定

使用Inertsil SIL-100硅胶柱,以正己烷等为流动相的正相液相色谱方法分析乳粉中的β-胡萝卜素收到了较好的效果.该方法的检出限、重现性、回收率和线性范围分别为:0.220μg/mL,1. 88%,90.2%～95.1%和2.280～456.000μg/mL.关于采用正相液相色谱法分析β-胡萝卜素的方法未见报到.该方法具有快速,灵敏度高的特点,保留时间仅为3 min左右,并大大地缩短了分析时间,提高了效率.

辛硫磷－灭多威乳油液相色谱分析

本文介绍以硅胶正相柱，石油醚和异丙醇为流动相的色谱系统，分离辛硫磷－灭多成乳油，经紫外检测器检测进行定量的方法。并对方法的线性关系，精密度，准确度进行了评估。

内标校准液相色谱荧光法测定食用油中苯并(a)芘

采用内标苯并(b)屈校正,建立了正相固相净化-反相液相色谱-荧光分光光度法测定食用油中苯并(a)芘的方法。正相Plus Silica固相萃取柱作为净化柱,反相C18柱作为分离柱。以苯并(b)屈作为内标,测定了苯并(a)芘的校正因子。使用本方法,苯并(a)芘在液态食用油和固态食用油中的检出限分别为0.01和0.03μg/kg。苯并(a)芘在不同食用油回收率在83%～108%之间,方法的日内精密度和日间精密度分别小于7.7%和13.2%。

高效液相色谱法测定40%硫磺·三唑酮·福美双可湿性粉剂

采用正相高效液相色谱法同时测定硫磺、三唑酮、福美双。该方法具有样品准备简单 ,共存组分互不干扰测定 ,分析速度快等优点 。

非达霉素原料药中有关物质的检查方法研究

目的:建立非达霉素原料药中有关物质的检查方法。方法:分别考察正相-紫外检测器色谱系统、反相-蒸发光散射检测器色谱系统、反相-紫外检测器色谱系统对非达霉素原料药中有关物质的检出能力,优选出最佳色谱系统。建立有关物质检查的高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18,流动相A为0.2%三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(55∶45,V/V)、流动相B为0.2%三乙胺缓冲液(pH 3.8)-乙腈(20∶80,V/V)(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,柱温为35℃,进样量为10μL;以不加校正因子的主成分自身对照法计算有关物质含量。结果:非达霉素在正相-紫外检测器色谱系统下不能有效分离杂质C、F,在反相-蒸发光散射检测器色谱系统下仅能检出杂质C、D、E、F 4个杂质;在反相-紫外检测器色谱系统下可检出11个杂质,故以此系统进行有关物质检查。在方法学考察中,非达霉素检测质量浓度线性范围为0.5~20.0μg/mL(R2=0.999 9);检测限为0.05 ng,定量限为0.15 ng;重复性、中间精密度试验的RSD均小于2.0%(n=6);平均回收率为98.4%(RSD为3.6%,n=9)。3批非达霉素原料药中杂质含量分别为0.53%、0.51%、0.51%。结论:非达霉素在反相-紫外检测器色谱系统下进行杂质检查效果最好;建立的有关物质检查方法专属性强、灵敏度高,可用于非达霉素原料药中有关物质的检查。

希普林有关物质的检测方法研究

目的:建立希普林的有关物质高效液相色谱检查法。方法:反相高效液相色谱法,用 Diamonsil C_(18)柱(4.6 mm×250mm,5μm),以醋酸-醋酸铵缓冲液(pH 6.0)-甲醇(3:7)为流动相,检测波长为300 nm;正相高效液相色谱法,用 Intersil SIL100A-5柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以正己烷-无水乙醇-冰醋酸(80:20:0.01)为流动相,检测波长为300 nm 和263 nm。结果:希普林在反相高效液相色谱分析中发生分解,而在正相高效液相色谱法中性质稳定,满足测定要求。结论:正相高效液相色谱法较反相高效液相色谱法适合检测希普林中的有关物质,方法简便、准确。

2-乙基蒽酮同分异构体的分离方法研究

建立了能分离出2-乙基-9-蒽酮单体的柱层析法和能完全分开2-乙基蒽酮同分异构体的正相液相色谱法。实验研究表明,在展开剂V(正己烷)∶V(二氯甲烷)∶V(乙酸乙酯)=80∶15∶0.2时,通过柱层析法可以分离得到2-乙基-9-蒽酮单体。利用重结晶法可结晶得到2-乙基-10-蒽酮单体,其纯度达98.96%。采用Agilent ZORBAX SIL(5μm,4.6 mm×250 mm)硅胶色谱柱,柱温为30℃,体积比为80∶19.5∶0.5的正己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯为流动相,流速为1 mL/min,紫外检测波长为230 nm的色谱条件时,能完全分开2-乙基蒽酮的两种同分异构体。以实验分离得到的2-乙基-10-蒽酮单体做标样,能准确定量双氧水工作液中2-乙基蒽酮的含量。

环氧啉10%可湿性粉剂的液相色谱分析方法

采用硅胶色谱柱和二极管阵列检测器,以正己烷/乙腈/二氯甲烷/异丙醇(70/10/10/10,v/v/v/v)为流动相,流速1.5 mL/min、检测波长265 nm,建立了环氧啉10％可湿性粉剂的高效液相色谱方法.环氧啉在1～50 mg/L范围内线性回归方程为y=144 814x-15 756,相关系数为0.999 9,平均回收率为99.1％,方法的标准偏差为0.04,变异系数为0.38％.方法快速、灵敏度高、重现性好,可用于环氧啉10％可湿性粉剂产品质量的控制与分析.

纤维素键合手性固定相分离托吡卡胺等4种抗胆碱能药物对映体

目的在正相色谱条件下建立了托吡卡胺、氢溴酸后马托品、硫酸阿托品和山莨菪碱共4种阿托品类药物的对映体分离方法。方法使用Chiralpak IC[纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)共价键合硅胶]手性色谱柱,考察了不同流动相体系、烷醇体积比、酸碱添加剂、柱温以及流速对对映体分离的影响。结果 4种药物均可达到良好的分离度,通过不断优化色谱分离条件最终确定分离4种药物的最佳流动相条件:柱温为25℃,流速为1.0 m L·min-1,分离托吡卡胺对映体的流动相为正己烷-乙醇-二乙胺(体积比70∶30∶0.05),分离氢溴酸后马托品和硫酸阿托品对映体的流动相为正己烷-乙醇-二乙胺(体积比80∶20∶0.05),在最佳条件下3种药物对映体之间的分离度分别为7.73、2.36和2.67。分离山莨菪碱4个对映体的最佳流动相为正己烷-异丙醇-乙酸-二乙胺(体积比70∶30∶0.05∶0.025)。结论纤维素键合手性固定相对除山莨菪碱以外的3种抗胆碱能药物均能达到完全分离。

乳粉中4种生育酚的正相高效液相色谱荧光法含量测定

建立了反相色谱法样品前处理与正相酰胺柱色谱分离相结合的正相高效液相色谱荧光(HPLC-FLU)法同时测定乳粉中α-、β-、γ-和δ-生育酚的含量,用于乳粉中维生素E含量的准确测定。考察了不同色谱柱类型、不同流动相比例和不同进样量对4种生育酚的色谱分离情况。2.5 g乳粉样品经氢氧化钾碱性溶液皂化后,用石油醚-乙醚混合液提取浓缩至近干,用甲醇定容至10 mL,经过滤膜后进样。以V(正己烷)∶V(叔丁基甲基醚)∶V(四氢呋喃)∶V(甲醇)=810.0∶85.3∶104.3∶0.4的混合溶液为流动相等度洗脱,α-、β-、γ-、δ-生育酚在酰胺柱上18.5 min内达到基线分离。激发波长λ_(x)=294 nm,发射波长λ_(m)=328 nm,进样体积为2μL。4种生育酚在2~80 mg/L范围内,相关系数R^(2)≥0.9991;4种生育酚的定量限均为0.6 mg/kg,3水平加标平均回收率范围为88.2%~103.0%,相对标准偏差范围为1.3%~4.7%。方法色谱分离效果好、重复性好、准确度高、定量限也满足标准限量要求,具有较好的实用性,并已用于实际样品的检测,可为乳粉维生素E含量的准确测定提供技术参考。

植物甾醇高效液相色谱法正相和反相检测方法对比

分别使用正相柱和反相柱,采用高效液相色谱-紫外检测器(high performance liquid chromatography-ultraviolet detector,HPLC-UV)法测定植物甾醇,比较2种色谱柱法对植物甾醇检测的优缺点.正相色谱条件为:以Hypersil SiO2(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,流动相为V(正己烷)∶V(异丙醇)=99∶1,柱温35℃,流速1.0mL/min,检测波长205nm;反相色谱条件为:以默克RP-18(4.6mm×250mm,5μm)为色谱柱,流动相为纯甲醇,柱温35℃,流速1.0mL/min,检测波长205nm.结果表明:混合甾醇在反相柱分离下出现3个峰,各种甾醇的分离度好;正相柱的甾醇只有1个峰,但样品在正相体系中的溶解性高于反相体系,而且正相体系甾醇出峰时间比反相体系快,可节约实验时间.说明在不要求各种甾醇分离效果的前提下,正相柱更适合用于植物甾醇检测.

正相高效液相色谱法测定L-甲砜霉素

目的建立甲砜霉素原料及制剂中对映异构体L-甲砜霉素含量的测定方法。方法采用正相高效液相色谱法对甲砜霉素原料及制剂中对映异构体L-甲砜霉素含量进行测定。结果该方法专属性良好,片剂和胶囊剂中辅料无干扰,甲砜霉素与L-甲砜霉素的分离良好,L-甲砜霉素的检测限为0.1μg·mL-1,定量限为0.5μg·mL-1,在0.54~54.42μg·mL-1(r2=1.0000)范围内与峰面积呈良好的线性关系。结论本方法经方法学验证,操作简便、专属性好、准确度高,可有效控制L-甲砜霉素的含量。