蜜蜂越冬期卵黄原蛋白和保幼激素的表达特性研究

为了探究蜜蜂越冬期体内卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)和保幼激素(Juvenile hormone,JH)的表达特性。本试验分别采集夏繁期(7月)和不同越冬时期(11月、12月、1月、2月)的珲春黑蜂工蜂,通过酶联免疫吸附试验方法检测Vg、JHⅢ及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的浓度变化,采用qRT-PCR方法检测Vg、JH代谢相关基因的表达量。结果表明:珲春黑蜂越冬期Vg浓度高于夏繁期,在不同越冬期Vg浓度总体呈现先上升后下降的趋势;Vg基因的变化趋势与Vg浓度相一致,而VgR基因表达量与SOD浓度变化趋势相一致,在越冬期水平高于夏繁期,且在整个越冬期呈现下降的趋势。珲春黑蜂越冬期JHⅢ浓度低于夏繁期,且随着越冬持续进行总体呈现持续上升的变化趋势;MFE基因的变化趋势与JHⅢ浓度相近;JHAMT基因表达量越冬期显著高于夏繁期,在整个越冬期呈现先上升后下降的趋势。本研究结果表明,蜜蜂越冬期体内存在Vg和JHⅢ间负相关的调节模型,其通过Vg、JHⅢ代谢相关基因的表达来提高越冬蜂抗氧化能力和抗寒性,为西方蜜蜂抗寒分子机制的深入研究提供了新的研究思路。

东北黑蜂(Apis mellifera ssp.)亲缘关系的分析

【目的】从分子水平揭示东北黑蜂与欧洲黑蜂、意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂、安拉托利亚蜂、高加索蜂以及非洲类型的西方蜜蜂的亲缘关系,为东北黑蜂分类地位的正确认识及其合理保护提供参考。【方法】对来自东北黑蜂国家级自然保护区内9个乡镇的东北黑蜂与上述西方蜜蜂的线粒体DNA(mtDNA)tRNAleu～COⅡ序列进行PCR扩增;同时取部分PCR产物进行DraⅠ酶切分析;并根据酶切类型对相应的PCR产物经纯化、克隆和测序后进行序列分析,并构建Neighbor-Joining(NJ)聚类图。【结果】东北黑蜂mtDNAtRNAleu～COⅡ序列长度为526bp,P序列缺失,Q序列有5个位点出现碱基转换(4T?C、1A?G),1个碱基颠换(1A?T);只有一种DraⅠ酶切类型,其酶切片段长度分别为422、64、47和41bp,同DNAMAN软件分析的酶切位点一致;其序列特征和酶切类型同西方蜜蜂线粒体C、O分支相似,而与A分支的非洲蜜蜂、M分支的欧洲黑蜂存在较大差异;根据NJ聚类图,东北黑蜂属于线粒体O分支。MtDNAtRNAleu～COⅡ的序列特征和DraⅠ酶切分析表明,东北黑蜂属于线粒体O分支,与同一分支的高加索蜂、安拉托利亚蜂亲缘关系最近,与C分支的意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂亲缘关系次之,而与M分支的欧洲黑蜂和A分支的非洲蜜蜂亲缘关系较远。【结论】根据NJ聚类图,东北黑蜂处于安拉托利亚蜂和高加索蜂之间,东北黑蜂是否是这两个地理亚种的混合种群,或能否算一个新的地理亚种,还有待进一步的研究。

欧洲黑蜂和新疆黑蜂越冬期抗氧化酶活性及相关基因表达分析

以欧洲黑蜂和新疆黑蜂为研究对象,比较和分析两个蜂种在越冬条件下抗氧化酶活性和抗氧化能力相关基因表达的变化规律,探究二者在越冬期的抗氧化酶功能及其基因表达特征。本试验测定了蜂群损失率和饲料消耗量等越冬性能指标以及总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)和过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶的酶活力值,并采用实时荧光定量PCR方法检测SOD、CAT、Grx 1、MsrA和Vg基因等抗氧化酶功能基因的表达情况。结果显示,欧洲黑蜂和新疆黑蜂的蜂群损失率和饲料消耗率分别为32.86%、32.91%和23.41%、23.91%。在抗氧化酶活性变化规律方面,两个蜂种的T-AOC酶活力呈逐步升高趋势;T-SOD酶活力呈先下降再升高的趋势,在越冬中期达到最低值;CAT酶活力呈先升高再降低又再升高的趋势;在抗氧化功能相关基因的mRNA表达方面,两个蜂种的SOD基因和CAT基因的表达在越冬中期达到最低值;Grx 1基因的表达在越冬后期急剧升高,达到峰值;MsrA基因的表达呈先降低后升高的趋势;Vg基因的表达在越冬的中前期呈逐渐升高趋势。结果表明,在低温逆境条件下,两个蜂种体内的抗氧化酶系统可能发挥了重要的防御作用,存在一定的耐寒适应机制,其中越冬中期可能是酶活性变化和基因表达的发生显著变化的特殊阶段。本试验的研究为揭示蜜蜂体内抵御低温应答机制研究提供新线索,也为深入研究蜜蜂耐寒分子机制和抗寒蜂种的选育提供基础数据。

基于微卫星标记的东北黑蜂群体遗传多态性分析

【目的】探讨东北黑蜂(Apis mellifera ssp.)国家级自然保护区内的蜜蜂群体遗传多态性情况。【方法】采用16个微卫星位点对来自中国黑龙江省饶河县7个不同区域的东北黑蜂样本进行遗传多样性检测。【结果】245只东北黑蜂个体在16个微卫星座位上共发现725个等位基因;除A028、A024和A088外,其余的13个微卫星座位均表现出高度多态性;东北黑蜂7组样本的平均多态信息含量(PIC)为0.60±0.05,平均观察杂合度(Ho)为0.62±0.21,平均期望杂合度(He)为0.65±0.19;除第2组样本外,其它样本的近交系数(Fis)均为正值,表明这些样本内存在不同程度的近交现象;7组样本间的分化系数(Fst)为0.03―0.14,遗传距离(DA)为0.08―0.35;群体的总基因流(Nm)为1.59,总分化系数(Fst)为0.14。聚类分析结果表明东北黑蜂具有2个不同的进化分支。【结论】东北黑蜂群体朝着2个不同的方向进化;总体遗传多态性程度较高;由于群体间的基因交流程度比较频繁,因此目前仅产生了中等程度的遗传分化。本研究结果对东北黑蜂的选育和保护具有重要的指导意义。

黑蜂蜂蜜治疗结痂创面的疗效观察

目的观察黑蜂蜂蜜治疗结痂创面的效果,并与新型敷料进行比较。方法按入选标准选择患者65例,随机分为观察组和对照组,观察组使用黑蜂蜂蜜处理创面,对照组用新型敷料处理创面。观察治疗过程中疼痛的差别,创面结痂脱落时间,新生上皮出现时间,创面愈合速度和愈合后情况。结果两组患者在疼痛体验上无差别,在创面结痂脱落时间,新生上皮出现时间,创面愈合后情况等方面观察组优于对照组(P<0.05)。治疗后第12、18、24天观察组创面面积小于对照组(P<0.05),同时,第12、18、24天的创面缩减率观察组明显高于对照组(P<0.05)。结论黑蜂蜂蜜在治疗结痂创面时,能迅速清除创面厚痂,促进创面愈合。

“迎春黑蜂”品牌忠诚驱动因素实证研究

基于多元回归方法,研究消费者对黑龙江省"迎春黑蜂"品牌忠诚的影响。结果显示:品牌信任、品牌认知、感知价值、感知质量是驱动消费者对"迎春黑蜂"品牌形成行为忠诚的主要因素,品牌认知、感知质量、消费者承诺是驱动消费者对该品牌形成心理忠诚的主要因素。因此,可通过实际行动带动消费者的品牌信任和品牌认知,提升自身服务质量以增加消费者的感知价值,建立消费者信息库以完成消费者后期回访等方式提升消费者对"迎春黑蜂"品牌的忠诚度。

中华蜜蜂为黑皮冬瓜授粉效果研究

通过对黑皮冬瓜进行蜜蜂授粉与人工授粉对比试验,结果表明:蜜蜂授粉可以代替人工授粉,蜜蜂授粉与人工授粉的坐瓜率均达到100%;蜜蜂授粉商品瓜率平均为86.00%,稍高于人工授粉商品瓜率(85.33%);蜜蜂授粉提高了黑皮冬瓜产量,单瓜重量提高8.95%;蜜蜂授粉提高了黑皮冬瓜商品性,果肉硬度提高13.85%,果肉厚度提高4.58%,且瓜形整齐、大小一致;蜜蜂授粉提高了黑皮冬瓜品质,果肉可滴定酸含量提高9.68%,果肉蛋白质含量提高7.58%,果肉维生素C含量提高5.02%;蜜蜂授粉还明显降低了黑皮冬瓜的授粉费用,蜜蜂授粉费用比人工授粉费用降低了64.28%。

东北黑蜂椴树蜜的解晶技术优化

以东北黑蜂椴树蜜为原料,分别采用机械解晶法、超声波水浴联合解晶法对蜂蜜的解结晶技术进行研究。探讨加热温度、加热时间、搅拌子转速、超声功率等因素对解晶率的影响。在单因素试验基础上,进行正交试验,确定两种解晶法最佳解晶条件,并对两种方法的效果进行比较。结果表明:机械解晶法最佳条件是加热温度80℃、搅拌子转速150 r/min、加热时间15 min,该条件下解晶率为97.98%;超声波水浴联合解晶法最佳条件是超声功率84 W、水浴温度80℃、加热时间30 min,该条件下解晶率为72.69%。通过比较得出机械解晶法优于超声波水浴联合解晶法。

论西方蜜蜂在中国野生的可能性

中国是野生东方蜜蜂、大蜜蜂、小蜜蜂等蜂种的故乡 ,但未发现过野生的西方蜜蜂。本文对野生是蜜蜂本来的生存形式、野生蜜蜂对气候蜜源条件的选择性、西方蜜蜂对野生环境的适应性等方面进行了论述 ,并通过考证研究发现的野生新疆黑蜂的现实和历史 ,进一步证实了西方蜜蜂在我国野生的可能性。

尼勒克县不同产区的新疆黑蜂蜂蜜理化性质与营养成分分析

为探明尼勒克县不同产区新疆黑蜂蜂蜜的理化性质及营养成分,本研究以尼勒克县7个不同产区的新疆黑蜂蜂蜜为研究对象,分析其理化性质以及14种维生素和10种矿物质的含量。结果表明:所有产区的蜂蜜样品中葡萄糖和果糖(≥1.14倍行业标准最低值)、淀粉酶活性(≥5.91倍行业标准最低值)、蔗糖(≤1.24%)和水分含量(≤18.5%)均优于中华全国供销合作总社行业推荐标准(GH/T 18796-2012)的相关规定。此外,脂溶性维生素中仅检出以δ-生育酚形式存在的维生素E(0.146~0.290 mg/100 g);水溶性维生素中检出维生素B_(2)(0.061~0.159 mg/100 g)、维生素B_(6)(0.023~0.064 mg/100 g)、烟酸(0.263~1.909 mg/100 g)、泛酸(0.142~0.293 mg/100 g)和叶酸(2.185~14.564μg/100 g);矿物质检测呈现高钾低钠(钾钠比均值21.37)、高钙(均值40.634 mg/kg)以及富硒(0.047~0.243 mg/kg)。主成分分析和聚类分析显示,通过检测到的维生素和矿物质可以将7个不同产区的蜂蜜分为4大类,各大类蜂蜜间特色鲜明。尼勒克新疆黑蜂蜂蜜含有丰富的维生素和矿物质,具有发展成为地方特色蜂蜜的巨大潜力。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜游离氨基酸的测定及分析

为探究尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜游离氨基酸含量组成特点,同时对蜂蜜产地进行区分分析。本研究采用行业标准方法测定尼勒克地区7个产区新疆黑蜂蜂蜜中游离氨基酸含量,对其必需氨基酸、药效氨基酸以及滋味氨基酸含量进行分析,并利用主成分分析和聚类分析探讨了尼勒克新疆黑蜂蜂蜜游离氨基酸特点。结果显示,7个产区新疆黑蜂蜂蜜总游离氨基酸含量在458.98~805.94 mg/kg之间,必需氨基酸占比为33.73%~51.84%,药效氨基酸占比为37.92%~57.94%,滋味氨基酸以芳香族氨基酸和甜味氨基酸为主。A3产区蜂蜜样品的游离氨基酸含量(805.94 mg/kg)远超其他6个产区(458.98~619.82 mg/kg),且其苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、组氨酸、甘氨酸、丙氨酸、酪氨酸、缬氨酸和异亮氨酸均为7个产区最高,聚类分析显示A3产区蜂蜜可与其他产区蜂蜜较好分离。综上所述,尼勒克新疆黑蜂蜂蜜中游离氨基酸种类丰富,苯丙氨酸含量占比较高,药效氨基酸、滋味氨基酸含量高,且各产区蜂蜜可由游离氨基酸含量进行区分,具有开发成为口感独特的药用蜂蜜的潜力。

新疆尼勒克县种蜂场小蜂螨给蜂农养蜂造成沉重打击

2013年,新疆尼勒克养蜂受到了小蜂螨的危害,加之采蜜季节阴雨天气过多,导致蜂农养蜂受到沉重打击,给新疆尼勒克养蜂生产造成了很大影响,同时也对新疆黑蜂的保种、育王等工作造成一定的困难。针对这样的病害,新疆伊犁州尼勒克县种蜂场蜂业有关人员联系蜂农,讨论并制定了一系列的措施来预防下一年螨害继续危害新疆伊犁州尼勒克县种蜂场蜂群。

三个蜂种百花蜜的主要成分比较分析

【目的】比较分析新疆黑蜂、中华蜜蜂、喀尔巴阡蜂所酿造的百花蜜的主要成分及含量的差异。【方法】根据《中华人民共和国药典》中所记载的方法测定蜂蜜的糖度、酸度、淀粉和糊精、5-羟甲基糠醛含量、还原糖含量五项指标;采用硫酸苯酚法测定可溶性糖含量;采用Folin-Ciocucalteu比色法测定总酚酸含量;采用亚硝酸钠-硝酸铝法测定总黄酮含量;采用考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量;采用试管比色法测定淀粉酶活性。【结果】三种百花蜜的含糖量存在明显差异,新疆黑蜂蜂蜜的糖度、还原糖含量、可溶性糖含量、黄酮含量均高于其它两种蜂蜜。三种蜂蜜都有较高的酚酸含量。而蜂蜜中蛋白含量和淀粉酶活性则是喀尔巴阡蜂蜂蜜较高。【结论】不同蜂种酿制的蜂蜜主要成分存在一定差异。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜矿物质含量数据集

尼勒克县地处伊犁河谷腹地,位于新疆黑蜂保护区内,当地地理环境独特、植物资源丰富,是酿造高品质蜂蜜的优势产区。蜂蜜中矿物质成分含量因来源植物类型不同、来源地域不同而差异较大。本研究收集尼勒克地区7个不同养殖基地的7份新疆黑蜂蜂蜜混合样品,每份样品分四瓶(每瓶500g)保存,按照相关国家标准方法测定矿物质元素(钙、钾、镁、锰、钠、铁、铜、锌、磷和硒)含量,获得新疆黑蜂蜂蜜中矿物质分布特点为高钾低钠(钾钠比均值21.372)、高钙(均值40.634 mg/kg)以及富硒(均值0.047–0.243 mg/kg)。建立本数据集,可为尼勒克新疆黑蜂蜂蜜质量评价提供数据支撑。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜游离氨基酸含量数据集

游离氨基酸是蜂蜜中的重要营养组成成分,影响蜂蜜的滋味和口感,是食品品质评价的重要指标。尼勒克县地处伊犁河谷腹地,位于新疆黑蜂保护区,是酿造高品质蜂蜜的优势产区。本研究收集7个来自尼勒克县不同养殖基地的新疆黑蜂蜂蜜样品,按照相关国家行业标准方法测定游离氨基酸(丝氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、组氨酸、苏氨酸、赖氨酸、甘氨酸、脯氨酸、精氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、亮氨酸、蛋氨酸)含量。尼勒克县7个养殖基地新疆黑蜂蜂蜜总游离氨基酸含量种类丰富,药效氨基酸占比较高,滋味氨基酸以芳香族氨基酸和甜味氨基酸为主。本数据集可为新疆黑蜂蜂蜜质量评价提供数据支撑,同时可为研究蜂蜜口感滋味提供思路。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜理化指标数据集

尼勒克县新疆黑蜂保护区内,植物资源丰富、地理环境优越、养蜂历史悠久,一直以来是酿造高品质蜂蜜的优势产区,但未有研究检测过该地区新疆黑蜂蜂蜜理化品质。收集尼勒克新疆黑蜂保护区7个养殖基地新疆黑蜂蜂蜜的样本,记录相关地理信息,并按照相关国家标准方法测定理化指标含量,包括所有养殖基地的蜂蜜样本中葡萄糖和果糖、蔗糖、淀粉酶活性和水分含量指标。建立本数据集,可为尼勒克新疆黑蜂蜂蜜品质评价提供数据支撑。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜维生素含量数据集

尼勒克县蜜源植物资源丰富,生态环境无污染,新疆黑蜂保护区内无其他蜂种影响,是酿造高品质新疆黑蜂蜂蜜的优势产区。蜂蜜中维生素成分含量也因来源植物类型不同、来源地域不同而差异较大。本研究收集尼勒克新疆黑蜂保护区内7个养殖基地新疆黑蜂蜂蜜样品,按照相关国家标准方法测定维生素(维生素D、α-生育酚、γ-生育酚、δ-生育酚、维生素A、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素K1、烟酸、泛酸、叶酸、生物素、L(+)-抗坏血酸总量、β-胡萝卜素)含量,脂溶性维生素中仅检出以δ-生育酚形式存在的维生素E;水溶性维生素中检出维生素B2、维生素B6、烟酸、泛酸和叶酸。建立本数据集将为评价尼勒克新疆黑蜂蜂蜜营养指标提供数据支持。

尼勒克县新疆黑蜂蜂蜜水解氨基酸含量数据集

越来越多的研究表明氨基酸及其部分代谢产物具有生物活性,能够调节机体生命活动。尼勒克县地处伊犁河谷腹地,位于新疆黑蜂保护区,是酿造高品质蜂蜜的优势产区。本研究收集尼勒克地区7个养殖基地新疆黑蜂蜂蜜样品,按照相关国家标准方法测定16种水解氨基酸(天冬氨酸、丝氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、脯氨酸、酪氨酸)含量。尼勒克县7个养殖基地新疆黑蜂蜂蜜水解氨基酸总含量种类丰富,且各基地均以脯氨酸含量最高,药效氨基酸占比较高。本数据集将为研究尼勒克新疆黑蜂蜂蜜氨基酸含量及组成提供数据支持。

新疆黑蜂基因组选择信号分析

【目的】分析新疆黑蜂(Xinjiang Black bee)与4个引进西方蜜蜂品种间的遗传进化关系,并通过检测基因组选择信号,发掘新疆黑蜂重要种质特性相关的候选基因。【方法】对新疆黑蜂、意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)、高加索蜂(Apis mellifera caucasica)、卡尼鄂拉蜂(Apis mellifera carnica)、欧洲黑蜂(Apis mellifera mellifera)共5个蜂种50个蜂王个体和1个长白山中华蜜蜂蜂王(Apis cerana cerana)样本进行全基因组重测序数据分析,鉴定新疆黑蜂的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)标记,以长白山中华蜜蜂为外群利用邻接法构建系统进化树以阐明新疆黑蜂的进化关系,利用SNP信息进行新疆黑蜂的主成分分析、群体遗传结构分析及连锁不平衡分析;采用群体遗传分化指数(Fst)和核苷酸多样性比值(θπ)方法检测新疆黑蜂与其他西方蜜蜂群体间的选择信号,并对提取到的受选择区域候选基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】在新疆黑蜂中共鉴定出1728216个SNPs,其中18526个非同义突变位点是后续研究新疆黑蜂遗传特性候选的SNPs位点;系统进化树和主成分分析结果表明,新疆黑蜂与其他蜂种间存在一定差异,其与卡尼鄂拉蜂、意大利蜂、欧洲黑蜂亲缘关系较近,与高加索蜂亲缘关系较远。群体遗传结构分析表明,在K>3时,新疆黑蜂来自一个与意大利蜂、高加索蜂、卡尼鄂拉蜂、欧洲黑蜂完全不同的独立祖先亚群。连锁不平衡分析表明,新疆黑蜂进化过程中受选择强度较大。GO功能富集分析结果表明,新疆黑蜂受选择基因主要富集于物质代谢、繁殖、信号转导等生物过程,细胞组分富集在细胞器、核小体、染色质和膜等,分子功能主要富集在有机环状化合物结合、离子结合等,并筛选到了Cyp314A1、Trichohyalin-like、CCDC112、Sorbitol dehydrogenase、SPI-3、Fer3HCH、TNS1、Pten、ADSL、Octβ2R、AFFG1、ARHGEF17共12个候选基因。KEGG通路富集分析结果表明,新疆黑蜂受选择基因主要富集于嘌呤代谢、胞吞作用、磷酸肌醇代谢等信号通路。【结论】利用基因组SNP标记揭示了新疆黑蜂的遗传结构和独立遗传背景,选择作用主要体现在新疆黑蜂品种形成过程中的抗寒、繁殖、生长发育、抗病等方面,研究结果可为中国新疆黑蜂的遗传进化、资源评价及地方蜂种资源的保护利用提供重要遗传信息。