东北黑蜂(Apis mellifera ssp.)亲缘关系的分析

【目的】从分子水平揭示东北黑蜂与欧洲黑蜂、意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂、安拉托利亚蜂、高加索蜂以及非洲类型的西方蜜蜂的亲缘关系,为东北黑蜂分类地位的正确认识及其合理保护提供参考。【方法】对来自东北黑蜂国家级自然保护区内9个乡镇的东北黑蜂与上述西方蜜蜂的线粒体DNA(mtDNA)tRNAleu～COⅡ序列进行PCR扩增;同时取部分PCR产物进行DraⅠ酶切分析;并根据酶切类型对相应的PCR产物经纯化、克隆和测序后进行序列分析,并构建Neighbor-Joining(NJ)聚类图。【结果】东北黑蜂mtDNAtRNAleu～COⅡ序列长度为526bp,P序列缺失,Q序列有5个位点出现碱基转换(4T?C、1A?G),1个碱基颠换(1A?T);只有一种DraⅠ酶切类型,其酶切片段长度分别为422、64、47和41bp,同DNAMAN软件分析的酶切位点一致;其序列特征和酶切类型同西方蜜蜂线粒体C、O分支相似,而与A分支的非洲蜜蜂、M分支的欧洲黑蜂存在较大差异;根据NJ聚类图,东北黑蜂属于线粒体O分支。MtDNAtRNAleu～COⅡ的序列特征和DraⅠ酶切分析表明,东北黑蜂属于线粒体O分支,与同一分支的高加索蜂、安拉托利亚蜂亲缘关系最近,与C分支的意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂亲缘关系次之,而与M分支的欧洲黑蜂和A分支的非洲蜜蜂亲缘关系较远。【结论】根据NJ聚类图,东北黑蜂处于安拉托利亚蜂和高加索蜂之间,东北黑蜂是否是这两个地理亚种的混合种群,或能否算一个新的地理亚种,还有待进一步的研究。

基于微卫星标记的东北黑蜂群体遗传多态性分析

【目的】探讨东北黑蜂(Apis mellifera ssp.)国家级自然保护区内的蜜蜂群体遗传多态性情况。【方法】采用16个微卫星位点对来自中国黑龙江省饶河县7个不同区域的东北黑蜂样本进行遗传多样性检测。【结果】245只东北黑蜂个体在16个微卫星座位上共发现725个等位基因;除A028、A024和A088外,其余的13个微卫星座位均表现出高度多态性;东北黑蜂7组样本的平均多态信息含量(PIC)为0.60±0.05,平均观察杂合度(Ho)为0.62±0.21,平均期望杂合度(He)为0.65±0.19;除第2组样本外,其它样本的近交系数(Fis)均为正值,表明这些样本内存在不同程度的近交现象;7组样本间的分化系数(Fst)为0.03―0.14,遗传距离(DA)为0.08―0.35;群体的总基因流(Nm)为1.59,总分化系数(Fst)为0.14。聚类分析结果表明东北黑蜂具有2个不同的进化分支。【结论】东北黑蜂群体朝着2个不同的方向进化;总体遗传多态性程度较高;由于群体间的基因交流程度比较频繁,因此目前仅产生了中等程度的遗传分化。本研究结果对东北黑蜂的选育和保护具有重要的指导意义。

论西方蜜蜂在中国野生的可能性

中国是野生东方蜜蜂、大蜜蜂、小蜜蜂等蜂种的故乡 ,但未发现过野生的西方蜜蜂。本文对野生是蜜蜂本来的生存形式、野生蜜蜂对气候蜜源条件的选择性、西方蜜蜂对野生环境的适应性等方面进行了论述 ,并通过考证研究发现的野生新疆黑蜂的现实和历史 ,进一步证实了西方蜜蜂在我国野生的可能性。

三个蜂种百花蜜的主要成分比较分析

【目的】比较分析新疆黑蜂、中华蜜蜂、喀尔巴阡蜂所酿造的百花蜜的主要成分及含量的差异。【方法】根据《中华人民共和国药典》中所记载的方法测定蜂蜜的糖度、酸度、淀粉和糊精、5-羟甲基糠醛含量、还原糖含量五项指标;采用硫酸苯酚法测定可溶性糖含量;采用Folin-Ciocucalteu比色法测定总酚酸含量;采用亚硝酸钠-硝酸铝法测定总黄酮含量;采用考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量;采用试管比色法测定淀粉酶活性。【结果】三种百花蜜的含糖量存在明显差异,新疆黑蜂蜂蜜的糖度、还原糖含量、可溶性糖含量、黄酮含量均高于其它两种蜂蜜。三种蜂蜜都有较高的酚酸含量。而蜂蜜中蛋白含量和淀粉酶活性则是喀尔巴阡蜂蜂蜜较高。【结论】不同蜂种酿制的蜂蜜主要成分存在一定差异。

东北黑蜂的抗寒机制研究

东北黑蜂作为我国优良的地方品种,其抗寒性能突出,但关于东北黑蜂抗寒性的系统研究鲜有报道,东北黑蜂抗寒能力的强弱以及抗寒机制等均不清楚。而蜜蜂体内的自由水含量和游离脂肪含量影响反映其抗寒性能,因此本研究对东北黑蜂和东北地区的意大利蜂的自由水和游离脂肪含量进行测定,同时对抗寒相关基因进行荧光定量PCR分析,以期为东北黑蜂的抗寒机制提供理论参考。结果表明,东北黑蜂的自由水含量与东北地区意大利蜂的自由水含量无显著性差异(P>0.05);东北黑蜂的游离脂肪含量与东北地区意大利蜂的游离脂肪含量也无显著性差异(P>0.05)。抗寒相关基因实时荧光定量PCR结果显示,东北黑蜂HSP60和Hsc70-4基因的表达量与东北地区的意大利蜂差异不显著。说明长期生存在东北地区的意大利蜂也形成了一定的抗寒能力,推测东北黑蜂的抗寒性是其对环境的一种适应性,蜜蜂的抗寒能力可能受环境影响。