地五养肝胶囊对MSG大鼠-肝再生模型再生修复的影响及机制研究

目的:探讨地五养肝胶囊(DWYG)对左旋谷氨酸单钠(MSG)大鼠-肝再生模型肝脏损伤后再生修复的影响及其相关机制。方法:MSG大鼠腹腔注射50%四氯化碳(CCl 4)/大豆油,建立MSG大鼠-肝再生模型。同步给予DWYG干预后,采用HE染色和Masson染色检测DWYG对MSG大鼠-肝再生模型肝脏损伤后再生修复反应的影响;采用ELISA试剂盒检测DWYG对MSG大鼠-肝再生模型血清瘦素浓度的影响;应用Western Blot检测DWYG对MSG大鼠-肝再生模型肝脏瘦素受体蛋白表达水平的影响;应用荧光实时定量PCR检测DWYG对MSG大鼠-肝再生模型肝脏Hedgehog信号相关分子mRNA表达水平的影响。结果:HE染色和Masson染色结果显示DWYG干预可以显著减轻MSG大鼠-肝再生模型肝脏组织损伤和纤维化程度;ELISA检测提示DWYG干预可明显降低MSG大鼠-肝再生模型血清瘦素浓度,而Western Blot检测显示DWYG可以显著降低纤维化肝组织中瘦素受体的蛋白表达水平。荧光实时定量PCR检测结果提示DWYG干预可以下调MSG大鼠-肝再生模型纤维化肝组织中Hh信号通路相关分子(Shh、Gli1、Smo和Ptc)的mRNA表达水平。结论:DWYG可以通过干预MSG大鼠-肝再生模型体内异常的瘦素信号从而减轻肝脏损伤后的纤维性再生修复。

地五养肝胶囊对肝肾精虚大鼠肝再生的影响

目的:研究地五养肝胶囊对肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠肝再生的影响。方法:复制肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠模型(简称"模型组")和正常大鼠肝大部分切除再生模型(简称"PHx组")。将实验大鼠分4组:模型组、PHx组、对照组和治疗组,每组32只。治疗组大鼠以地五养肝胶囊灌胃,除PHx组外另两组大鼠以等体积生理盐水灌胃。在术后1、3、7、10天时分别观察大鼠的肝再生度、肝再生指数(%)和肝细胞分裂指数MI。结果:模型组大鼠术后第1天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.34±0.10)、(1.88±0.14)、(1.05±0.12)均显著高于PHx组(0.22±0.08)、(1.46±0.13)、(0.86±0.16)和对照组(0.21±0.05)、(1.47±0.18)、(0.87±0.16),P均<0.05;模型组大鼠术后第3、7和10天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.42±0.08、0.57±0.12、0.70±0.08),(2.07±0.04、2.41±0.06、2.84±0.10)和(1.04±0.18、0.41±0.16、0.15±0.03),均显著低于PHx组(0.53±0.10、0.73±0.09、0.88±0.06),(2.31±0.29、3.02±0.30、3.49±0.05),(1.85±0.19、0.62±0.03、0.29±0.04)和对照组(0.54±0.09、0.71±0.11、0.90±0.10),(2.33±0.42、3.07±0.13、3.46±0.05),(1.81±0.04、0.67±0.18、0.28±0.05),P均<0.05。治疗组大鼠术后第1天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.13±0.07)、(1.52±0.11)、(0.77±0.14)均显著低于模型组大鼠(0.34±0.10)、(1.88±0.14)、(1.05±0.12),P均<0.05;治疗组大鼠术后3、7、10天肝再生度、肝再生指数、MI分别为(0.50±0.05、0.74±0.06、0.86±0.03),(2.19±0.11、2.84±0.12、3.27±0.06),(1.89±0.13、0.57±0.20、0.28±0.04)均显著高于模型组(0.42±0.08、0.57±0.12、0.70±0.08),(2.07±0.04、2.41±0.06、2.84±0.10),(1.04±0.18、0.41±0.16、0.15±0.03),P均<0.05。结论:地五养肝胶囊可一定程度地纠正肝肾精虚/MSG-肝再生-大鼠的肝再生紊乱,早期可抑制肝再生的异常亢进,中晚期可一定程度地改善被抑制的肝再生,使损伤的肝组织得以再生修复。通过下丘脑-垂体-肝轴影响肝再生过程可能是其作用机制之一。

论“肝主生发”

将"肝主生发"定义为:肝脏具有独特的再生修复能力,其再生修复能力在直接或间接受全身脏腑组织调控的同时,又直接或间接影响全身脏腑组织的再生修复。系统论述了"肝主生发"的理论渊源、解剖基础、科学内涵("髓生肝"的生理机制、"髓失生肝"的病理机制、"补肾生髓成肝"的治疗法则)以及进一步的研究方向。

论“补肾生髓成肝”治疗法则

系统地论述了"补肾生髓成肝"新的治疗法则的概念,继承"生机学说"、创新"肝主生发"的理论基础,"髓生肝"的生理机制、"髓失生肝"的病因病机及其治疗法则的理论体系和科学内涵。探讨了"补肾生髓成肝"早期干预、全程监控、动态个体化治疗的临床运用时机,以"形质毁坏"(组织损伤)、"形质衰败"(功能衰竭)、甚或整体"形体衰败"为基础的客观量化标准,"中间指标"结合"结局指标"的临床疗效考核标准。并简要介绍了"补肾生髓成肝"调控肝再生防治肝病的研究进展,推动中医药理论的突破与创新。

地五养肝胶囊对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog通路的调节作用

目的:探讨地五养肝胶囊(DWYG)对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog(Hh)信号通路的影响。方法:Wistar大鼠随机分为空白对照组、肝纤维化模型组和DWYG干预组,四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型。应用HE和Masson染色检测不同处理组大鼠肝组织损伤和纤维化程度;应用Western Blot和Real-time q RT-PCR分别检测不同处理组大鼠肝组织Hh信号通路的蛋白和基因表达水平。结果:与空白对照组相比,肝纤维化模型组大鼠出现明显肝组织损伤和纤维化改变,且纤维化肝组织中Shh、Gli1、Smo和Ptc的蛋白和基因表达水平显著上调(P<0.05);而与肝纤维化模型组相比,DWYG干预可显著减轻肝组织损伤和纤维化程度,同时显著下调纤维化肝组织中Shh、Gli1、Smo和Ptc的蛋白和基因表达水平(P<0.05)。结论:DWYG抗纤维化效应与其抑制纤维化大鼠肝组织中过度活化的Hh信号通路相关。