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基于CRISPR/Cas9研究叶形相关基因NRL2对水稻抗旱性的影响 被引量:4
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作者 陈炜 邱牡丹 +1 位作者 李潜龙 王建龙 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期7298-7303,共6页
为了研究水稻叶形相关基因NRL2的功能,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以超级稻品种中嘉早17 (YK17)为背景,对调控水稻叶形相关基因NRL2进行定点编辑,并通过农杆菌介导的方法将其转化到籼稻品种中嘉早17中。通过对34个转基因T0代植... 为了研究水稻叶形相关基因NRL2的功能,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以超级稻品种中嘉早17 (YK17)为背景,对调控水稻叶形相关基因NRL2进行定点编辑,并通过农杆菌介导的方法将其转化到籼稻品种中嘉早17中。通过对34个转基因T0代植株进行测序,结果显示34个转基因植株中有7个纯合突变株系,6株无突变,其余均为杂合突变。其主要分为3种突变方式,分别为T,C,A单核苷酸插入。通过对基因突变后NRL2编码的蛋白序列进行分析发现这3种突变均导致氨基酸序列移码。在VK005-4-1突变体株系中,NRL2的RNA水平极显著下调。干旱处理结果显示,突变体耐旱能力弱于背景亲本中嘉早17,且与耐旱相关基因在突变体中表达量显著低于背景亲本。总之,本研究利用CRISPR/Cas9技术敲除水稻叶形相关基因NRL2,得到的基因敲除株系,其耐旱性显著低于背景亲本中嘉早17,为进一步研究NRL2影响植物耐旱性提供技术支撑。 展开更多
关键词 nrl2 耐旱性 CRISPR/Cas9 水稻
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2个水稻叶片卷曲变窄突变体的遗传分析和基因定位 被引量:1
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作者 陈海元 朱晓妹 +2 位作者 张所兵 张云辉 方先文 《江苏农业科学》 北大核心 2021年第2期37-43,共7页
通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变水稻品种南粳46,发现2个可以稳定遗传的叶片卷曲变窄的突变体rnl 1-1(rolling and narrow leaf1-1)和rnl1-2。与野生型相比,突变体从苗期开始表现出叶片卷曲变窄的表型,一直持续到成熟期。此外,突变体抽穗期延... 通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱变水稻品种南粳46,发现2个可以稳定遗传的叶片卷曲变窄的突变体rnl 1-1(rolling and narrow leaf1-1)和rnl1-2。与野生型相比,突变体从苗期开始表现出叶片卷曲变窄的表型,一直持续到成熟期。此外,突变体抽穗期延迟,株高、穗长、剑叶长、剑叶宽、一次枝梗数、二次枝梗数、粒厚、每穗粒数和粒宽均显著降低。遗传分析表明,突变体的突变表型受1对隐性基因控制。利用rnl 1-1与籼稻品种Dular杂交建立F_( 2)群体,将该基因定位在水稻第12染色体长臂上的InDel标记HF36和HF43之间约277 kb的区间内。该区间内NRL 2基因突变引起的表型与rnl突变体相似,测序发现rnl 1-1突变体中RNL2基因的第1708位核苷酸由C突变为T,使得编码的氨基酸由丝氨酸突变成脯氨酸;rnl 1-2突变体中RNL 2基因的第2011位核苷酸由G突变为A,使得编码的氨基酸由精氨酸突变成甘氨酸。 展开更多
关键词 水稻 叶片卷曲变窄 突变体 基因定位 NRL 2
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NARROW AND ROLLED LEAF 2 regulates leaf shape,male fertility, and seed size in rice 被引量:19
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作者 Shuangshuang Zhao Lei Zhao +4 位作者 Fengxia Liu Yongzhen Wu Zuofeng Zhu Chuanqing Sun Lubin Tan 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2016年第12期983-996,共14页
Grain yield in rice (Oryza sativa L.) is closely related to leaf and flower development. Coordinative regulation of leaf, pollen, and seed development in rice as a critical biological and agricultural question shoul... Grain yield in rice (Oryza sativa L.) is closely related to leaf and flower development. Coordinative regulation of leaf, pollen, and seed development in rice as a critical biological and agricultural question should be addressed. Here we identified two allelic rice mutants with narrow and semi- rolled leaves, named narrow and rolled leaf2-1 (nrl2-1) and nr12- 2. Map-based molecular cloning revealed that NRL2 encodes a novel protein with unknown biochemical function. The mutation of NRL2 caused pleiotropic effects, including a reduction in the number of longitudinal veins, defective abaxial sclerenchymatous cell differentiation, abnormal tape- tum degeneration and microspore development, and the formation of more slender seeds compared with the wild type (WT). The NRL2 protein interacted with Rolling-leaf (RL14), causing the leaves of the nrl2 mutants to have a higher cellulose content and lower Iignin content than the WT, which may have been related to sclerenchymatous cell differentia- tion and tapetum degeneration. Thus, this gene is an essential developmental regulator controlling fundamental cellular and developmental processes, serving as a potential breeding target for high-yielding rice cultivars. 展开更多
关键词 nrl2 narrow and rolled leaf sclerenchymatous cell malefertility seed size secondary cell wall
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无机砷对肝细胞转录因子Nrf2及其调控蛋白表达影响 被引量:5
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作者 刘丹 李冰 +4 位作者 董丹丹 邢晓越 王欣 李昕 孙贵范 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1188-1190,共3页
目的探讨不同时间和不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对Chang肝细胞株NF-E2相关因子2(Nrf2)、及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。方法25μmol/L NaAsO2作用Chang肝细胞2、4、6、1... 目的探讨不同时间和不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)暴露对Chang肝细胞株NF-E2相关因子2(Nrf2)、及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。方法25μmol/L NaAsO2作用Chang肝细胞2、4、6、12和24 h;或不同浓度的NaAsO2(10、25和50μmol/L)作用Chang肝细胞6 h,免疫印迹法(western blot)检测细胞内Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达情况。结果 25μmol/L的NaAsO2可以明显诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达(P<0.01);Nrf2蛋白2 h开始明显诱导,4 h表达水平最高,此后随暴露时间的延长虽然表达有所下降,但持续至24 h仍明显高于对照组;NQO1的蛋白表达水平也从4 h开始增加并持续至24 h;HO-1的蛋白表达则从6 h开始明显诱导,且随暴露时间的继续延长表达持续上升,具有明显的时间-效应关系;10、25和50μmol/L NaAsO2染毒6 h,Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达均随染毒剂量的增加而大量诱导,具有明显的剂量-效应关系(P<0.01)。结论 NaAsO2暴露能够诱导Chang肝细胞Nrf2、NQO1和HO-1蛋白表达增强,且具有一定的剂量-效应关系。 展开更多
关键词 Chang肝细胞株 亚砷酸钠(NaAsO2) 转录因子Nrf2 血红素单加氧酶-1(HO-1) NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)
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