A549肺腺癌细胞株BALB/C-nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

目的探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性.方法选择健康6~8周龄Balb/c-nu/nu裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu裸鼠的成瘤情况.结果全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60%.造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间.结论通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究.

MG患者胸腺移植BALB／c nu／nu裸鼠模型的建立及其功能研究

目的:通过建立MG患者胸腺移植BALB/c裸鼠动物模型,探讨MG患者胸腺对脐血干细胞分化的影响。方法:将4mm3无菌切除的MG患者胸腺和非自身免疫病正常胸腺组织行BALB/c裸鼠左肾包膜下移植,2周后给BALB/c裸鼠静脉输入脐血单个核细胞。胸腺移植60天后通过免疫组化试验检测CD3分子的表达,利用流式细胞仪检测BALB/c裸鼠外周血中人源T细胞、B细胞、NK细胞、调节性T细胞数量。结果:胸腺移植60天,移植的胸腺组织在BALB/c裸鼠肾包膜下存活,组织结构清晰,免疫组化显示移植块中的胸腺细胞表达CD3分子;流式细胞分析显示CD3+、CD4+、CD19+、CD161+细胞以及CD3+CD56+、CD4+CD25+细胞百分率在MG胸腺、正常胸腺和脐血MNC联合移植组明显高于对照组,正常组CD3+、CD19+比例增加更明显,MG组CD4+细胞比例高于先心组。结论:胸腺组织块植入BALB/c裸鼠肾被膜下,能有效存活,并参与脐血细胞在体内的分化;移植的MG胸腺与正常胸腺在脐血细胞中的作用存在差异。MG患者胸腺、脐血干细胞联合移植建立的人胸腺-裸鼠动物模型可作为MG胸腺功能研究、免疫细胞分化成熟研究的工具。

弥漫性大B细胞淋巴瘤BALB/C-nu/nu裸鼠皮下移植瘤模型的建立

目的探索弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)BALB/C-nu/nu裸鼠皮下移植瘤模型建立的方法。方法将DLBCL细胞株SUDHL-10、OCI-Ly8、OCI-Ly10接种于BALB/C-nu/nu裸鼠腋部皮下,每2~3天观察皮下肿瘤体积变化,并绘制肿瘤生长曲线。在裸鼠濒临死亡或皮下肿瘤长径≥20mm时将裸鼠处死,分离肿瘤组织进行HE染色以及免疫组化染色。结果裸鼠皮下见有肿瘤长出的时间为接种后第10~12天;SUDHL-10、OCI-Ly8、OCI-Ly10细胞接种的成瘤率分别为66.7%(4/6)、100%(6/6)、83.3%(5/6);接种后第42天皮下肿瘤长径最大可达20mm,此时裸鼠逐渐出现濒死状态,SUDHL-10、OCI-Ly8、OCI-Ly10细胞接种的肿瘤体积分别为(2617.66±332.98)mm^3、(2679.66±367.02)mm^3、(2409.60±640.84)mm^3。移植瘤HE染色形态与人DLBCL相符合。免疫组化染色显示,SUDHL-10、OCI-Ly8细胞接种后的肿瘤细胞CD20弥漫阳性、CD10弥漫阳性、Bcl-6阳性;OCI-Ly10细胞接种后的肿瘤细胞CD20部分阳性、CD10弥漫阳性、Bcl-6阴性、多发性骨髓瘤癌基因1阴性。结论成功构建DLBCL细胞BALB/C-nu/nu裸鼠皮下移植瘤模型;其移植瘤细胞与人DLBCL细胞相似,是较理想的研究DLBCL的实验动物模型。

“努”与“怒”的字词关系分析

“怒”字形产生于战国时期,本义为“愤怒、发怒”,引申出“强、盛”和“使出力气”等义;“努”字形产生于唐初,晚唐五代时期大量使用,“努”是“怒”的分化字,“努”最初的意义来自于“怒”,进而引申出“凸显、竖起”等义。“怒”和“努”是通假或形近误写现象,而是本字与分化字的关系。

20世纪初金敦·沃德对滇藏交界怒族人群的考察述论

20世纪初,英国博物学家金敦·沃德数次前往滇藏交界的怒江一带进行旅行和考察,他在收集植物种子的同时,对该地区的民族文化予以较多的关注,尤其是对分布于该地区的怒族人群作了大量的记录和描述,为我们了解20世纪初滇藏交界一带怒族人的生活样貌提供了重要的资料参考。金敦·沃德根据自己的观察,把地处滇藏交界地区的怒族人群从文化特征上分为“黑”怒族和“白”怒族两个亚群体,这两个怒族的亚群体之间,虽然存在生态环境与文化特征上的巨大差异,但经济上仍保持着紧密联系与互相依赖的关系。从金敦·沃德的考察和记录中,我们能够看到地处滇藏交界地区的怒族在20世纪初的基本生活样貌及其与毗邻民族及内地民族间的交往与交融情况。

疣状瓶霉致nu／nuBALB／c小鼠皮下慢性感染模型的建立

目的 建立疣状瓶霉（Phialophora verrucosa，P. verrucosa）致无胸腺（nu/nu）BALB/c小鼠皮下慢性感染模型，探讨T淋巴细胞在抵御形成侵袭性感染中的作用。方法 经皮下接种100 μl P. verrucosa菌丝或孢子悬液（CFU = 5.0 × 108/ml）至足垫，每3天测量其肿胀程度。分析BALB/c和nu/nu BALB/c小鼠感染灶的病理特征。通过组织真菌培养分析P. verrucosa在上述两类小鼠感染灶内的存活状态。结果 BALB/c小鼠接种菌丝或孢子12 d内足垫呈一过性肿胀，50 d后基本恢复正常；nu/nu BALB/c小鼠接种菌丝或孢子后足垫肿胀明显、伴反复破溃和结痂，迁延不愈。病理提示，BALB/c小鼠菌丝或孢子接种灶均表现为局限性感染特征，灶内P. verrucosa亦维持接种时形态；nu/nu BALB/c小鼠菌丝或孢子接种灶中，P. verrucosa以单一菌丝或伴硬壳细胞混合形态形成侵袭性感染。真菌培养提示，P. verrucosa在BALB/c小鼠足垫21 d后接种灶中不能生长；在nu/nu BALB/c小鼠接种灶中则可持续存活。结论 以nu/nu BALB/c小鼠成功建立P. verrucosa致皮下暗色丝孢霉病实验室模型；与BALB/c小鼠相比，nu/nu BALB/c小鼠更易感染。

HBV preS2起始区反义核酸对人肝癌细胞在裸鼠体内生长的抑制作用

PCR合成互补于HBVpre S2起始区的反义寡核苷酸 (as preS2 ) ,以HBVDNA转染的HepG2 2 15细胞接种裸鼠制备人肝癌模型 ,通过连续用药、一次性用药、混合用药等三种途径研究其对人肝癌裸鼠模型的抑瘤生长及体内抗HBV作用。流式细胞术 (FCM)分析asON诱导瘤细胞凋亡作用 ,ELLSA法检测反义核酸作用裸鼠血清中HBV抗原含量的变化。结果显示 ,一次性与混合用药组裸鼠均表现为成瘤潜伏期延长 ,成瘤率明显低于瘤细胞对照未用药组 (P <0 0 5 ) ,瘤体生长缓慢。裸鼠瘤内连续用药 ,在 48hFCM测凋亡峰值为 39 5 7%,S期细胞降低显著 ,生理盐水与无关序列对照分别为 7 92 %、10 89%,提示as preS2可能诱导S期细胞凋亡。as preS2对荷瘤鼠HBeAg和HB sAg的抑制率分别为 45 %和 6 5 %。提示 ,as preS2可有效抑制体内HBV抗原表达 ,对人肝癌裸鼠在体内的生长有明显的抑制作用。

人脐血细胞在肝损伤裸鼠体内向肝细胞的分化

目的探讨在制备的肝损伤模型中人脐血单个核细胞向肝细胞的分化能力。方法采用腹腔注射CCl4和5-氟尿嘧啶的方法制备肝损伤模型,将分离的脐血单个核细胞以2×107/ml经尾静脉注射入裸鼠体内。4周后处死裸鼠取肝组织。以RT-PCR方法对ALB、AFP mRNA的表达进行检测;并用免疫组织化学SP染色检测人HSA、PCNA、ALB的表达情况。结果RT-PCR显示ALB、AFP mRNA在人肝组织移植组中表达呈阳性,而在损伤未移植组和正常对照组表达为阴性;免疫组织化学染色表明,在裸鼠肝实质区域出现人HSA、PCNA和ALB阳性表达细胞。结论人脐血单个核细胞在裸鼠体内确有向肝细胞分化的趋势。

裸鼠糖尿病模型的建立及皮下异种胰岛移植研究

目的探讨链脲左菌素(STZ)建立BALB/c nu/nu裸鼠Ⅰ型糖尿病模型的方法,及将大鼠胰岛分离纯化后移植至糖尿病裸鼠皮下,对移植后裸鼠进行疗效评价。方法选用Balb/c裸鼠分为三组:糖尿病且胰岛移植组、糖尿病胰岛未移植组和正常组;用STZ对裸鼠进行糖尿病建模,大鼠胰岛分离、纯化后移植至糖尿病裸鼠背部皮下,进行血糖、体重和HE染色考察,以糖尿病未移植组和正常组作对照。结果STZ浓度175 mg/kg时,腹腔注射裸鼠糖尿病造模成功率高,纯化的大鼠胰岛活性较好,但移植后疗效平均维持时间约5 d,移植第5 d的OGTT结果显示胰岛皮下移植组和糖尿病组血糖均较正常组高,移植3 d时HE染色显示胰岛在皮下存活,但胰岛中心部位细胞有坏死。结论本研究建立了一种免疫排斥缺陷宿主异种胰岛皮下移植治疗糖尿病的方法,为进一步探索改进胰岛移植研究提供参考。

中药“参阳”方对人舌鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用

目的:前瞻性研究表明,中药“参阳”方能够延长口腔癌患者的生存期并提高生存率,但其抗癌机制尚不十分明确。本研究的主要目的是观察中药“参阳”方对人舌鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将体外培养的人舌鳞癌细胞系Tca8113细胞接种于裸鼠皮下,建立人舌鳞癌移植瘤模型,共48只,随机分为4组:“参阳”方A组、B组、阳性对照组和阴性对照组。采用灌胃方法进行药物干预,共30d,观察各组的抑瘤效果及对裸鼠一般状况、生存时间和脾脏指数的影响。结果:每只鼠每天喂养“参阳”方72.8mg,能轻度抑制Tca8113细胞移植瘤的生长,抑瘤率为22.04%;裸鼠的脾脏指数明显提高(t检验,P<0.05);生命延长率为18.9%。主要脏器的组织学检查未见病理改变,表明所用剂量药物无明显的毒副反应。结论:“参阳”方对荷瘤鼠的直接抗癌作用较弱,其对口腔鳞癌的治疗作用可能是通过调节机体的免疫功能而实现。

重型颅脑损伤患者两种管饲途径的比较及护理策略

【目的】比较鼻胃管和行胃镜下胃造瘘术放置胃空肠管两种管饲途径的优缺点，并探讨适宜护理的重要性。【方法】通过分析84例重型颅脑损伤患者不同的营养支持途径，比较两组的每天实际肠内营养百分比值、并发症和家属接受指数。【结果】胃空肠管组的每天实际肠内营养百分比值优于鼻胃管组；胃空肠管组存在手术并发症，且腹泻发生率高于鼻胃管组，但胃排空障碍发生率低于鼻胃管组；鼻胃管组的患者家属接受指数优于胃空肠管组。【结论】行胃镜下胃造瘘术放置胃空肠管的营养效果优于鼻胃管，但两种方法均有优缺点；适宜护理对弥补两种方法的缺点有积极作用。

人鼻咽癌CNE－2Z细胞的不同转移潜能克隆株在严重联合免疫缺陷小鼠体内的检验和比较研究

将人类鼻咽癌不同克隆株的细胞悬液移植在严重联合免疫缺陷（ＳＣＩＤ）小鼠和ＢＡＬＢ／ｃ（ｕｎ／ｕｎ）裸小鼠的颈背侧皮下，５６ｄ后处死全部动物进行观察。结果发现，在ＳＣＩＤ小鼠体内移植后ＣＮＥ２Ｌ２为高转移克隆株，其淋巴结转移率为１００％，肺转移率为７１％；而ＣＮＥ２Ｌ４为低转移克隆株，其肺转移率为１３％，淋巴结未见癌转移。这是从１个细胞母系中新筛选出的１个高转移和１个低转移的癌细胞克隆株。实验结果还显示，同ＢＡＬＢ／ｃ（ｕｎ／ｕｎ）裸小鼠相比，ＳＣＩＤ小鼠的恶性表型的表达能力高。另外，皮下移植时肿瘤细胞的数量可能与转移表型的表达有相关性，移植的瘤细胞数越多，转移率越高，反之亦然。

TMPRSS4在裸鼠结肠癌肝转移模型的促癌机制研究

目的检测TMPRSS4在裸鼠结肠癌肝转移模型中的表达,并探究其促癌机制。方法采用转染基因重组质粒pcDNA3.1(-)/TMPRSS4和pcDNA3.1(-)/Scramble的HT29结肠癌细胞株建立20只裸鼠肝转移模型,并按随机数表法分成TMPRSS4组(研究组,10只)和Scramble组(对照组,10只)。制模6周后处死观察两组裸鼠肝脏的组织形态学和组织病理学改变情况,并将其标本采用RT-PCR和Western blot检测裸鼠结肠癌肝转移模型中的TMPRSS4表达情况。结果成功构建稳定型表达TMPRSS4和Scramble重组载体的HT29细胞株,并100%(20/20)成功完成两组裸鼠结肠癌肝转移模型;从组织标本的形态学和病理学角度分析,与对照组相比,研究组裸鼠结肠癌肝转移评分[(2.400±0.516)分vs(3.700±0.483)分]显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);从组织标本的分子生物学角度分析,与对照组相比,研究组裸鼠的mRNA[(1.060±0.207)vs(2.280±0.712)]和蛋白质[(0.740±0.114)vs(2.580±0.719)]表达显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TMPRSS4可有效促进裸鼠结肠癌肝转移的进程,至于具体的促转移机制则有待于进一步的研究揭示。

遗传性T淋巴细胞免疫缺陷在百草枯所致肺纤维化中的作用

目的研究T淋巴细胞免疫缺陷在百草枯所致肺纤维化中的作用。方法选择BALB/C(nu/nu)裸鼠与BALB/C(nu/+)小鼠作为实验动物模型,按照20 mg/kg的百草枯一次性灌胃,灌胃1 h后用GC-MS检测血浆中百草枯的药物浓度,在小鼠中毒第7天和第28天取肺组织做病理切片,H&E,MASSON染色。结果2个品系的小鼠在染毒1 h后血浆中的百草枯药物浓度,差异无统计学意义(P>0.05)。第28天的病理切片H&E、MASSON染色显示出2个品系的小鼠在肺纤维化程度方面,差异有统计学意义(P<0.05)。结论T淋巴细胞参与了百草枯所致的肺纤维化的过程,但是T淋巴细胞的缺失没有完全避免百草枯诱导的肺纤维化。T淋巴细胞免疫缺陷不是百草枯所致肺纤维化的决定性因素。

基于冷冻肿瘤组织切片的磷酸化HER2免疫组织化学染色方法探讨

目的探索针对磷酸化人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)免疫组织化学染色实验中冷冻组织切片的最佳固定与保存条件。方法在BALB/c-nu/nu小鼠中建立人源性乳腺癌细胞BT474的皮下移植瘤模型,对比不同的抗原固定条件和存储时间下,免疫组织化学染色观察肿瘤模型中磷酸化HER2的信号变化。结果冰冻切片用体积分数为10%的甲醛溶液固定5 min,可以维持良好的细胞形态。在-20℃的存储条件下,肿瘤组织中磷酸化HER2蛋白在12周内表达稳定。结论冰冻组织切片进行免疫组织化学染色用时短,可以作为常规石蜡切片染色方法的补充或者替代。

高句丽烽上王之死考辨

烽上王是高句丽史上一位死于宫廷政变的君主,虢其位而后继者并没有对他在位时的作为进行正面的载记,反多污蔑诋毁之曲笔。历史上,真正的烽上王虽好治宫室,但并不能否定其政治上知人善用,军事上两次成功击退慕容廆侵犯的功绩。究其本质来看,烽上王之所以被弑杀,是因为其没有妥善地处理好平衡消奴部与绝奴部之间的权力制衡,是其试图压制部权策略失败的结果。

LC-MS/MS法测定裸鼠肝脏中6'-羟基爵床定A的浓度

目的建立测定裸鼠肝组织中6'-羟基爵床定A浓度的LC-MS/MS法,并用于裸鼠的组织分布研究。方法色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱;流动相为水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速0.5 ml.min-1,柱温为室温。采用ESI源,以多反应监测方式分别监测离子对m/z 410.8→136.9(6'-羟基爵床定A)和m/z 386.1→122.0(内标丁螺环酮)。肝组织匀浆后采用蛋白沉淀法进行预处理。结果 6'-羟基爵床定A在裸鼠肝组织中的线性范围为1.0～2000ng.ml-1,日内精密度RSD小于8.61%;日间精密度RSD小于8.15%,回收率在89.3%～98.3%范围内。结论该方法简单、灵敏、准确,适用于裸鼠肝组织中6'-羟基爵床定A的浓度测定及其组织分布研究。

LPAK细胞对裸鼠人胃癌的抗瘤作用

LPAK细胞(Lymphokine and PHA Activated Killer cells,LPAK)在体外实验中对Raji细胞和SGC-7901胃癌细胞均有较强的杀伤活性. LPAK细胞对裸鼠SGC-7901胃癌亦有显著的抗瘤作用,抑瘤率达84.6±8.6%.

Autar量表干预护理模式在预防妇科手术患者下肢深静脉血栓形成中的应用

【目的】探讨Autar量表干预护理模式在预防妇科手术后下肢深静脉血栓形成（DVT ）中的应用效果。【方法】2010年6月至2014年5月来本院接受妇科手术治疗的患者160例，选取2010年6月至2012年5月的患者80例，为对照组，采用传统常规的护理模式；选取2012年6月至2014年5月的患者80例，作为观察组，采用Autar量表干预护理模式按量表评估后的不同风险级别采取相应的预防干预。比较两组患者术后下肢DVT 的发生情况以及观察组不同风险级别患者术后下肢DVT 的发生情况。【结果】观察组患者下肢DVT 发生率为5．0％（4／80），显著低于对照组的16．3％（13／80）（ P ＜0．05）。观察组 Autar不同分级患者中，高危患者下肢DVT的发生率为22．2％（2／9）；中危患者下肢DVT的发生率为7．7％（2／26）；低危患者下肢DVT的发生率为0（0／45），差异有统计学意义（ P ＜0．05）。【结论】手术前采用Autar量表对患者进行DVT风险评估，对患者采取预见性、针对性、个性化的护理措施，能有效降低患者下肢DV T的发生率。

破坏血管和肿瘤细胞毒性药物联合应用治疗胃癌的实验研究

本研究联合应用血管破坏药物，加强肿瘤细胞毒性药物抗肿瘤疗效。利用局部注射途径，采用乳剂型制剂，减少药物副作用，尽可能使药物长久地留置于癌肿周围，为临床治疗胃癌提供实验依据。结果表明：中药乳剂性质稳定，对免耳血管有明显的破坏作用，导致出血性改变，对CAM血管生长有明显的抑制效应，联合应用中药乳剂和丝裂霉素C能提高抗肿瘤疗效。