中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导及植株再生

以中国李Nubiana试管苗幼嫩叶片为外植体,探讨激素浓度配比、暗培养时间、琼脂浓度等对胚性愈伤组织诱导及TDZ浓度对胚性愈伤组织不定芽再生的影响,建立其愈伤组织诱导及不定芽再生体系。结果表明,外源激素对中国李Nubiana胚性愈伤组织诱导影响显著,TDZ不适合胚性愈伤组织的诱导;暗培养28 d,产生的愈伤组织质地较好,诱导愈伤组织的效果最佳。胚性愈伤组织在WPM+NAA 0.5 mg·L-1+6-BA 2.0 mg·L-1+TDZ 2.0 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0 g·L-1培养基上光培养可再生出不定芽,其再生率为6.7%。

中国李Nubiana离体叶片愈伤组织诱导的研究

以Nubiana叶片为试材,对其愈伤组织的诱导、继代培养及褐变调控进行了研究。结果表明：Nubiana叶片愈伤的诱导及继代培养以WPM附加BA 0.5 mg/L和2.4-D 2.0 mg/L的培养基上效果最好;0.1%的柠檬酸（CA）具有明显地促进愈伤组织生长、抑制褐变的作用,而聚乙烯吡咯烷酮（PVP）的效果最差;3%的葡萄糖（Glu）最适于愈伤组织的诱导及继代。综合以上研究结果,获得较好的愈伤组织的适宜培养条件是：WPM＋BA 0.5 mg/L＋2,4-D 2.0 mg/L＋Glu 3%＋CA 0.075%-0.1%,暗培养28-30 d。

中国李Nubiana叶柄离体培养再生植株

以中国李Nubiana试管苗幼嫩叶片上的叶柄为试材,研究了基本培养基、激素种类配比、暗培养时间、培养基中琼脂浓度等对叶柄再生的影响,建立了其叶柄再生体系。结果表明,中国李Nubiana叶柄再生不定芽最佳培养基为WPM+TDZ 0.5 mg.L-1+蔗糖30 g.L-1+琼脂6 g.L-1,不定芽再生率可达到35.0%;暗培养为叶柄不定芽再生的必要条件,暗培养14 d后转入光下培养,能促进叶柄产生不定芽。中国李Nubiana叶柄再生表现出明显的极性,不定芽一般出现在叶柄的近轴端。

努比亚山羊(Capra nubiana)PROX1基因克隆及功能研究

为了克隆努比亚山羊(Capra nubiana)同源异形盒转录因子1(prospero-related homeobox protein 1,PROX1)基因和检测过表达PROX1基因对努比亚山羊骨骼肌成肌细胞分化和肌纤维类型转化相关基因mRNA表达的影响,为研究PROX1基因在骨骼肌发育中的调控作用提供参考,本研究以努比亚山羊背最长肌组织cDNA为模板克隆PROX1基因,构建pEGFP-N1-PROX1真核表达载体,转染至努比亚山羊骨骼肌成肌细胞,24 h后更换分化培养基,收集分化6 d的细胞,通过RT-qPCR检测过表达PROX1基因后细胞分化标志基因、NOTCH信号通路相关基因以及骨骼肌肌纤维类型相关基因的表达情况。研究结果表明努比亚山羊PROX1基因编码区(coding sequence,CDS)序列长度为2214 bp,编码含737个氨基酸的多肽。RT-qPCR结果表明PROX1基因可以通过抑制NOTCH信号通路,上调细胞分化标志基因表达水平进而促进成肌细胞的分化(P<0.05),并介导CaN/NFAT信号通路,显著下调MYH2和MYH4基因的mRNA表达水平(P<0.05)。本研究初步确定努比亚山羊PROX1基因参与调控骨骼肌成肌细胞的分化和肌纤维类型的转化,研究结果为进一步丰富肌肉生长发育的分子机制提供理论数据。