目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在肝细胞癌中表达的临床意义及其对炎症相关因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的调控作用。方法用...目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在肝细胞癌中表达的临床意义及其对炎症相关因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的调控作用。方法用免疫组化检测76例肝癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表达情况。将HuH-7细胞分为实验组和对照组,实验组细胞转染NFAT5-siRNA质粒,对照组细胞转染NC-siRNA质粒,荧光定量PCR检测各组细胞NFAT5 mRNA含量,蛋白质印迹法检测各组细胞的NFAT5、IL-6、TNF-α表达情况,CCK8检测各组细胞的增殖能力。结果肝癌患者组织NFAT5阳性率为81.58%(62/76),癌旁组织中表达率为6.58%(5/76),NFAT5在肝癌组织中的表达率显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.001)。转染siRNA后,实验组和对照组HuH-7细胞中NFAT5 mRNA表达量分别为1.03±0.19和0.33±0.11,NFAT5蛋白表达量分别为0.94±0.14和0.26±0.07,IL-6表达量分别为1.09±0.16和0.49±0.10,TNF-α表达量分别为1.21±0.13和0.28±0.08,IL-6、TNF-α的表达显著下降(均P<0.05)。实验组和对照组HuH-7细胞CCK8实验120 h的吸光度分别为2.21±0.12和1.12±0.11,实验组细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。结论NFAT5在肝细胞肝癌中表达明显升高,可能与肝癌的恶性程度相关;且NFAT5通过调控IL-6、TNF-α的表达影响肝细胞肝癌细胞的增殖能力。展开更多
目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在食管癌组织中表达的临床意义及敲低其在食管癌细胞的表达对其迁移能力的影响。方法用免疫组化法检测所收集的26例食管癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表...目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在食管癌组织中表达的临床意义及敲低其在食管癌细胞的表达对其迁移能力的影响。方法用免疫组化法检测所收集的26例食管癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表达情况。将食管癌细胞ECA109分为实验组和对照组,实验组ECA109细胞转染NFAT5-siRNA质粒,对照组ECA109细胞转染MOCK-siRNA质粒,RT-PCR检测各组细胞NFAT5 mRNA的含量,蛋白免疫印迹法检测各组细胞的NFAT5、TLR4、MyD88表达情况,Transwell实验、细胞划痕实验检测实验组和对照组细胞的迁移(转移)能力。结果免疫组化实验结果显示食管癌患者组织NFAT5阳性率为80.77%(21/26),相应癌旁组织中表达率为15.38%(4/26),食管癌组织中NFAT5的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.001)。实验组和对照组ECA109细胞转染相应siRNA后NFAT5 mRNA含量下降;实验组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.28±0.08、0.31±0.13、0.41±0.14;对照组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.95±0.15、0.84±0.22、1.04±0.26;实验组ECA109细胞TLR4、MyD88的表达明显下降(均P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞划痕愈合率为(52.67±5.21)%,对照组细胞为(82.91±7.26)%;Transwell实验结果表明,实验组成功迁移细胞数为(35±5)个,对照组成功迁移细胞数为(92±13)个,结果表明ECA109细胞低表达NFAT5后,细胞迁移能力显著下降(P<0.01)。结论NFAT5在食管癌中表达明显升高,可能与食管癌的恶性程度相关;且NFAT5通过调控TLR4/MyD88信号通路影响食管癌细胞的迁移能力。展开更多
活化T细胞核因子(nuclear factor of activated Tcell,NFAT)作为细胞信号转导中的一类重要因子,不仅在免疫系统中发挥功能,在肿瘤发生、发展中也起着关键性作用。NFAT的活化主要通过钙离子信号启动,进而发生核转位并与DNA结合,通过与其...活化T细胞核因子(nuclear factor of activated Tcell,NFAT)作为细胞信号转导中的一类重要因子,不仅在免疫系统中发挥功能,在肿瘤发生、发展中也起着关键性作用。NFAT的活化主要通过钙离子信号启动,进而发生核转位并与DNA结合,通过与其他共转录因子的相互协同,调节目的基因的表达。不同亚型的NFAT在肿瘤细胞转化和生长中发挥不同的调控作用,并促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞的浸润或迁移。进一步了解NFAT在肿瘤中的表达和作用机制,探究其在肿瘤发生、发展中的作用,可为肿瘤临床治疗中有效靶点的寻找带来更多新的突破。展开更多
活化的T细胞核内因子(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)作为细胞信号转导通路中的一类重要的转录因子参与细胞功能的调节.NFAT的活化主要是通过细胞内钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/calcineurin)的刺激启动,它脱磷酸后发生核转位并...活化的T细胞核内因子(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)作为细胞信号转导通路中的一类重要的转录因子参与细胞功能的调节.NFAT的活化主要是通过细胞内钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/calcineurin)的刺激启动,它脱磷酸后发生核转位并与DNA的特定序列结合,同时通过与其它转录因子的协同作用,调节目的基因的特定表达.NFAT在免疫系统中所调节的基因表达已经得到了充分的研究.近年实验研究发现,NFAT的转录因子家族在脊椎动物的神经系统中也发挥着非常重要的作用.本文综述了NFAT家族蛋白的分类、结构、磷酸酶与激酶对其出入核的调节及在神经系统中的研究进展,使得能够更加全面地认识calcineurin/NFAT信号通路的作用.此外,由于环孢菌素A(cyclosporin A)等药物在神经系统应用的局限性,对于NFAT调节深入研究,也将为筛选或者开发更为高效、低毒药物提供新的思路.展开更多
活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cell,NFAT)包括5个亚型(即NFATl-NFAT5),最初发现其在免疫系统中发挥着重要作用,后来发现其在非免疫系统中也同样扮演着重要的角色,参与调控细胞组织的发育和生理过程。近些年来,许多研...活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cell,NFAT)包括5个亚型(即NFATl-NFAT5),最初发现其在免疫系统中发挥着重要作用,后来发现其在非免疫系统中也同样扮演着重要的角色,参与调控细胞组织的发育和生理过程。近些年来,许多研究发现NFAT的表达和功能异常与儿童疾病关系紧密。因此,该文就NFAT信号通路的调控及其在儿童疾病中的作用进行综述。展开更多
目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用。方法:聚合酶链式反应检测Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞NFAT mRNA...目的:探讨Ca2+-活化T细胞核因子(nuclear factors of activated T cells,NFAT)信号通路在骨髓基质细胞介导的费城染色体阳性(Ph+)急性淋巴细胞白血病(ALL)耐药中的作用。方法:聚合酶链式反应检测Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞NFAT mRNA的转录水平;流式细胞术检测Sup-B15细胞P-糖蛋白表达;Western blot检测Sup-B15细胞NFAT蛋白的变化;Annexin V/7-AAD标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;Fluo 3-AM染料标记细胞,流式细胞术检测共培养后白血病细胞Ca2+浓度变化。结果:Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞中均可检测到NFAT表达;流式细胞术未检测到Sup-B15细胞表达P-糖蛋白;临床应用的治疗浓度(2.5和5μmol/L)的环孢素(CAS)可明显抑制NFAT蛋白表达,其中5μmol/L CAS抑制作用更明显;临床治疗浓度CAS(2.5和5μmol/L)对Sup-B15细胞的凋亡无明显影响,而较高浓度CAS(10μmol/L)可诱导Sup-B15细胞的凋亡。骨髓基质细胞OP9可使Sup-B15细胞及Ph+ALL原代细胞对伊马替尼的敏感性下降;与骨髓基质细胞OP9共培养后Sup-B15细胞Ca2+浓度升高,总NFAT蛋白水平及核蛋白水平均增加;在共培养体系中加入环孢素抑制Ca2+-NFAT信号通路,可降低OP9对Sup-B15细胞的保护作用。结论:Ca2+-NFAT信号通路有助于Ph+ALL细胞的存活,骨髓基质细胞+可通过活化Ca2+-NFAT信号通路介导Ph+ALL细胞对IM的耐药。展开更多
Adapter proteins can regulate the gene transcriptions in disparate signaling pathway by interacting with multiple signaling molecules, including T cell activation signaling. Nuclear receptor binding protein (NRBP), a ...Adapter proteins can regulate the gene transcriptions in disparate signaling pathway by interacting with multiple signaling molecules, including T cell activation signaling. Nuclear receptor binding protein (NRBP), a novel adapter protein, represents a small family of evolutionarily conserved proteins with homologs in Caenorhabditis elegans (C. elegans), Drosophila melanogaster (D. melanogaster), mouse and human. Here, we demonstrated that overexpression of NRBP in Jurkat TAg cells specifically impairs T cell receptor (TCR) or phorbol myristate acetate (PMA) /ionomycin-mediated signaling leading to nuclear factor of activated T cells (NFAT) promoter activation. Furthermore, the N-terminal of NRBP is necessary for its regulation of NFAT activation. Finally, we showed that NRBP has minimal effect on both TCR- and PMA-induced CD69 up-regulation in Jurkat TAg cells, which suggests that NRBP may function downstream of protein kinase C (PKC) /Ras pathway.展开更多
文摘目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在食管癌组织中表达的临床意义及敲低其在食管癌细胞的表达对其迁移能力的影响。方法用免疫组化法检测所收集的26例食管癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表达情况。将食管癌细胞ECA109分为实验组和对照组,实验组ECA109细胞转染NFAT5-siRNA质粒,对照组ECA109细胞转染MOCK-siRNA质粒,RT-PCR检测各组细胞NFAT5 mRNA的含量,蛋白免疫印迹法检测各组细胞的NFAT5、TLR4、MyD88表达情况,Transwell实验、细胞划痕实验检测实验组和对照组细胞的迁移(转移)能力。结果免疫组化实验结果显示食管癌患者组织NFAT5阳性率为80.77%(21/26),相应癌旁组织中表达率为15.38%(4/26),食管癌组织中NFAT5的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.001)。实验组和对照组ECA109细胞转染相应siRNA后NFAT5 mRNA含量下降;实验组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.28±0.08、0.31±0.13、0.41±0.14;对照组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.95±0.15、0.84±0.22、1.04±0.26;实验组ECA109细胞TLR4、MyD88的表达明显下降(均P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞划痕愈合率为(52.67±5.21)%,对照组细胞为(82.91±7.26)%;Transwell实验结果表明,实验组成功迁移细胞数为(35±5)个,对照组成功迁移细胞数为(92±13)个,结果表明ECA109细胞低表达NFAT5后,细胞迁移能力显著下降(P<0.01)。结论NFAT5在食管癌中表达明显升高,可能与食管癌的恶性程度相关;且NFAT5通过调控TLR4/MyD88信号通路影响食管癌细胞的迁移能力。
文摘活化T细胞核因子(nuclear factor of activated Tcell,NFAT)作为细胞信号转导中的一类重要因子,不仅在免疫系统中发挥功能,在肿瘤发生、发展中也起着关键性作用。NFAT的活化主要通过钙离子信号启动,进而发生核转位并与DNA结合,通过与其他共转录因子的相互协同,调节目的基因的表达。不同亚型的NFAT在肿瘤细胞转化和生长中发挥不同的调控作用,并促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞的浸润或迁移。进一步了解NFAT在肿瘤中的表达和作用机制,探究其在肿瘤发生、发展中的作用,可为肿瘤临床治疗中有效靶点的寻找带来更多新的突破。
文摘活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cell,NFAT)包括5个亚型(即NFATl-NFAT5),最初发现其在免疫系统中发挥着重要作用,后来发现其在非免疫系统中也同样扮演着重要的角色,参与调控细胞组织的发育和生理过程。近些年来,许多研究发现NFAT的表达和功能异常与儿童疾病关系紧密。因此,该文就NFAT信号通路的调控及其在儿童疾病中的作用进行综述。
基金Foundation item: the National Natural Science Foundation (No. 30430630)
文摘Adapter proteins can regulate the gene transcriptions in disparate signaling pathway by interacting with multiple signaling molecules, including T cell activation signaling. Nuclear receptor binding protein (NRBP), a novel adapter protein, represents a small family of evolutionarily conserved proteins with homologs in Caenorhabditis elegans (C. elegans), Drosophila melanogaster (D. melanogaster), mouse and human. Here, we demonstrated that overexpression of NRBP in Jurkat TAg cells specifically impairs T cell receptor (TCR) or phorbol myristate acetate (PMA) /ionomycin-mediated signaling leading to nuclear factor of activated T cells (NFAT) promoter activation. Furthermore, the N-terminal of NRBP is necessary for its regulation of NFAT activation. Finally, we showed that NRBP has minimal effect on both TCR- and PMA-induced CD69 up-regulation in Jurkat TAg cells, which suggests that NRBP may function downstream of protein kinase C (PKC) /Ras pathway.