荔枝核淀粉提取工艺研究

采用超声波浸提与酶处理的方法提取荔枝核淀粉,通过正交设计确定荔枝核淀粉提取的工艺参数,并对荔枝核淀粉成分及理化性质进行研究。结果表明:荔枝核淀粉提取最佳工艺为:酶用量1%,酶解时间4h,酶解前先超声波振提40min,浸泡时间为4h。采用该工艺提取荔枝核中的淀粉,粗淀粉提取率为52·90%,粗淀粉中淀粉质量含量为73·95%,直链淀粉11·11%,蛋白质含量7·38%,脂肪含量1·38%,灰分0·51%。

无核荔枝胚胎异常发育的研究

无核荔枝是荔枝中较为珍贵的品种，有丰富的假种皮，种子多退化，属焦核品系。在胚胎发育过程中，小孢子四分体形成后，虽然出现有些小孢子形状不规则，原生质少或无等现象，但也有发育正常的花粉粒。而大孢子在各个发育阶段均会出现各种败育现象，因此无法形成胚，这是产生焦核的主要原因。淀粉粒的积累和分布对胚囊和雄配子体的发育起着重要作用，其分布具有一个动态的变化途径，这与挂绿荔枝有相同之处。

荔枝核皂苷在乳腺癌术后内分泌治疗中的临床应用

目的研究荔枝核皂苷对乳腺癌内分泌治疗的增效减毒作用。方法采用临床前瞻性单盲随机对照研究方法,将合格受试患者采用随机方法分为两组:试验组(荔枝核皂苷+来曲唑)及对照组(安慰剂+来曲唑)。通过检测性激素水平、T细胞亚群及NK细胞水平,Karnofsky评分和多种不良反应的评估,观察荔枝核对乳腺癌内分泌治疗的增效减毒作用。结果荔枝核能降低雌激素、泌乳素等性激素水平,增强机体免疫功能,改善患者生活质量,减轻来曲唑的不良反应。结论在乳腺癌术后辅助内分泌治疗中,单用荔枝核协同来曲唑,一方面可发挥其抗肿瘤作用,另一方面可减轻西药的不良反应,充分发挥中医药增效减毒的优势。

荔枝核总黄酮抗肝纤维化作用的实验研究

目的观察荔枝核总黄酮(TFL)抗大鼠肝纤维化作用,并探讨其中的可能机制。方法以二甲基亚硝胺(DMN)腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型;造模同时TFL给药组以TFL灌胃给药,秋水仙碱为阳性对照组,苏木素-伊红(HE)染色、马松染色观察大鼠肝纤维化程度,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,检测肝组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组化检测肝组织核转录因子-κB(NF-κB)的表达。结果与模型组比较TFL给药组血清AST、ALT水平及肝组织MDA含量明显降低(P<0.05),SOD含量明显升高(P<0.05);TFL可明显抑制肝组织NF-κB的表达(P<0.05),改善大鼠肝纤维化程度(P<0.05)。结论 TFL具有显著的抗肝纤维化作用,减轻机体脂质过氧化反应及抑制NF-κB的表达可能参与了其抗肝纤维化作用的机制。

荔枝核总黄酮对大鼠结直肠癌前病变的影响

目的探讨荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠结直肠癌前病变的影响。方法将40只大鼠随机分为对照组、模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组。其他组大鼠给予皮下注射二甲肼20mg/kg,对照组大鼠只注射等剂量生理盐水。注射二甲肼次日起,对照组、模型组给予生理盐水灌胃,TFL小剂量组、TFL大剂量组分别按100mg/(kg·d)、200mg/(kg·d)给予TFL灌胃。造模第15周后,取大鼠全部结直肠在镜下观察异性隐窝灶(ACF)的数量,并检测ACF处黏膜程序性死亡受体1(PD-1)、核因子-кB(NF-кB)p65mRNA的表达水平,同时检测血清谷胱甘肽的含量。结果对照组未发现有ACF病变,模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组ACF的数量依次下降(均P<0.05)。模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组、对照组大鼠血清谷胱甘肽含量依次升高(均P<0.05)。模型组ACF中PD-1mRNA的表达水平高于对照组及TFL大剂量组(P<0.05),其余组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组比较,模型组NF-κBp65mRNA的表达水平升高,而TFL大剂量组的表达水平下降(均P<0.05);模型组、TFL小剂量组、TFL大剂量组NF-κBp65mRNA的表达水平依次降低(均P<0.05)。结论TFL对二甲肼诱导的大鼠结直肠癌前病变具有良好的抑制作用,大剂量TFL的作用更佳。NF-κBp65可能为TFL抑制ACF形成的关键因子。

荔枝核总黄酮抗大鼠肝纤维化的作用及其对核转录因子-κB p65表达的影响

目的观察核转录因子-κB(NF-κB)p65在实验性大鼠肝纤维化肝组织中的表达,探讨荔枝核总黄酮(TFL)抗肝纤维化的作用机制。方法以二甲基亚硝胺腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型;造模同时,模型组以生理盐水、TFL组以TFL[200 mg/(kg·d)]、秋水仙碱组以秋水仙碱灌胃给药;6周后处死大鼠,抽取下腔静脉血检测AST、ALT,取肝脏同一部位行HE染色观察大鼠肝纤维化程度,采用免疫组化检测各组肝组织NF-κB p65的表达。结果 TFL组和秋水仙碱组血清AST、ALT均明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,TFL组NF-κB p65的表达明显抑制,大鼠肝纤维化程度改善(P<0.05)。结论 TFL可减轻肝损伤及其纤维化程度,抑制NF-κB p65的表达,这可能是其抗肝纤维化作用的机制之一。

荔枝核总黄酮对肝纤维化大鼠核转录因子-κB及基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的:观察核转录因子-κB(Nuclear transcription factors-κB,NF-κB)及基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在实验性大鼠肝纤维化肝组织中的表达,探讨荔枝核总黄酮(Total flavone from Litchi chinensis Sonn.,TFL)抗肝纤维化的作用机制。方法:大鼠随机分为正常对照组、模型组、TFL高剂量组、TFL低剂量组及秋水仙碱(Colchicine,Col)组。模型组、TFL高剂量组、TFL低剂量组及Col组以二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)腹腔注射4周制作大鼠肝纤维化模型;造模同时TFL高、低剂量组分别以TFL[200、100 mg/(kg.d)],Col组以Col 0.1 mg/(kg.d)灌胃给药,正常对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,6周后处死大鼠,计算大鼠肝脾指数,检测血清天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)、MMP-2,取肝脏同一部位行HE、Masson染色观察大鼠肝纤维化程度,采用免疫组化检测各组肝组织NF-κB、MMP-2的表达。结果:TFL高、低剂量组血清AST、ALT、HA、LN、MMP-2水平及肝脾指数较模型组明显降低(P<0.01),肝组织NF-κB、MMP-2表达及纤维化程度评分亦较模型组明显减低(P<0.05)。结论:TFL具有显著的抗肝纤维化作用,其机制可能与其抑制NF-κB、MMP-2的高表达有关。

荔枝核皂苷对糖调节受损大鼠胰腺组织氧化应激的改善作用及其机制

目的:研究荔枝核皂苷(SL)对糖调节受损(IGR)大鼠氧化应激及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的作用,阐明其相关机制。方法:采用高脂饲料喂养制备IGR大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组(0.20 g·kg-1)、低剂量SL组(0.05 g·kg-1)、中剂量SL组(0.10g·kg-1)和高剂量SL组(0.20g·kg-1),同时设正常对照组,每组12只,连续给药6周。观察SL对实验大鼠糖脂代谢的影响,采用实时荧光定量(Real-time PCR)法检测大鼠胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和HO-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测大鼠胰腺组织胞核、胞质Nrf2和全细胞HO-1蛋白表达水平,采用SOD和MDA试剂盒检测大鼠胰腺组织中SOD活性和MDA水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖(FBG)和血脂水平明显升高(P<0.05或P<0.01),胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平降低(P<0.01),MDA水平和mRNA表达水平升高(P<0.01),胞核和胞质中Nrf2蛋白表达水平和核转位率升高(P<0.01),HO-1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,二甲双胍组和中、高剂量SL组大鼠FBG和血清甘油三酯(TG)水平明显降低(P<0.05或P<0.01),胰腺组织中SOD活性和mRNA表达水平升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平和mRNA表达水平降低(P<0.05或P<0.01),胞质中Nrf2表达水平降低(P<0.05或P<0.01),胞核中Nrf2表达水平和核转位率升高(P<0.05或P<0.01),HO-1mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:SL具有改善糖脂代谢和增强抗氧化应激作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路、促进Nrf2核转位及增强下游抗氧化基因HO-1表达有关。

荔枝核总黄酮对两种肝纤维化大鼠模型的作用比较

目的探讨荔枝核总黄酮(TFL)对四氯化碳(CCl 4)诱导肝纤维化大鼠和胆管结扎(BDL)肝纤维化大鼠的作用及其机制。方法大鼠40只,随机分正常对照组、CCl 4模型对照组、CCl 4+TFL组、BDL模型对照组、BDL+TFL组,每组8只。采用40%CCl 4诱导建立肝纤维化大鼠模型,双重胆管结扎法复制BDL模型。CCl 4+TFL组和BDL+TFL组灌胃给予TFL(300 mg·kg^-1·d^-1),正常对照组、CCl 4组和BDL组灌胃0.9%氯化钠溶液(300 mg·kg^-1·d^-1)。检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BiL)。Sirius red染色测算胶原面积;免疫组织化学法检测抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CollagenⅠ在肝脏组织中的表达;Western blotting法检测α-SMA、核因子-κB(NF-κB)p65、环氧化酶2(COX-2)蛋白的表达。结果TFL降低CCl 4模型AST的作用强于BDL模型(P<0.05),而降低T-BiL、脾指数、肝脏α-SMA蛋白表达等的作用弱于BDL模型(P<0.05),均可明显降低两种模型大鼠ALT、ALP、肝纤维化的胶原面积、NF-κBp65与COX-2蛋白在肝脏中的表达(均P<0.05)。结论TFL对CCl 4和BDL两种模型的肝纤维化大鼠均有较好的改善肝纤维化作用,机制可能与调节炎症因子NF-κBp65、COX-2等的表达有关。

荔枝核总黄酮干预大鼠肝星状细胞核因子κB核转位及相关蛋白表达的研究

目的研究荔枝核总黄酮（TFL）对体外由转化生长因子p1（TGFD1）诱导活化的大鼠肝星状细胞T6细胞株（HSC-T6）中核因子KB（NF-κB）核转位及相关蛋白表达的影响，探究该药抗肝纤维化的作用机制。方法体外培养HSC-T6，通过TGFD1诱导24h后以125、250、500μg／ml的TFL干预48h，采用激光共聚焦显微镜观察TFL对HSC-T6内NF-κB核转位的影响，并以Westernblot法检测TFL对细胞中TLR4、P-IκBCt、P-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI蛋白表达水平的影响，免疫荧光法检测TLR4、P-NF-κBp65的表达。数据采用均数±标准差表示，先进行方差齐性检验，再行单因素方差分析（ANOVA），组间多重比较采用LSD检验，P〈0．05为差异具有统计学意义。结果激光共聚焦显微镜可见TFL抑制活化HSC-T6中NF-KB的核转位，并具有浓度依赖性。TFL可下调HSC-T6中TLR4、P-IKBQ、p-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI的蛋白表达水平，同时具有浓度依赖性。结论TFL的抗肝纤维化的机制可能与其抑制活化HSC-T6内NF-κB的核转位，下调HSC-T6中TLR4、P-IKBQ、D-NF-κBp65、NF-κB及CollagenI的表达相关。

荔枝核总黄酮对结肠癌细胞株HT29的抑制作用及相关机制

目的:探讨不同浓度的荔枝核总黄酮(total flavone of Litchi Semen,TFLS)对人的结直肠癌细胞株HT29的体外抑制作用及对该细胞系中核转录因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB);Toll样受体4(Toll-like receptors,TLR4);白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL^(-1)β)mRNA和蛋白表达的影响。方法:体外培养HT29细胞株,给予TFL(0,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56 g·L^(-1))干预,给药后24,48,72 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分别检测TFLS对HT29增殖的影响,采用逆转录PCR检测各组NF-κB,TLR4,IL^(-1)βmRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB,TLR4,IL^(-1)β蛋白表达情况。结果:MTT检测结果显示TFL对HT29增殖呈良好的时间依赖性和剂量依赖性,以作用72 h,质量浓度为2.56 g·L^(-1)抑制率最高。与空白组比较,TFL组作用72 h后,HT29细胞系中NF-κB,IL^(-1)β基因和蛋白表达水平均降低,尤以TFL 0.64,2.56 g·L^(-1)组较明显(P<0.05)。TFL组TLR4基因表达较空白组差异明显(P<0.05),蛋白表达差异不明显。结论:TFL在体外对HT29细胞系的增殖具有抑制作用,NF-κB可能为TFL抑制HT29细胞系增殖的关键因子。