目的研究骆驼刺提取物(Alhagi pseudalhagi(M.B.)Desv.Extract,APE)对脂多糖诱导的大鼠小肠隐窝上皮细胞(Intestinal epithelial cell,IEC-6)损伤模型NLRP3炎症小体及相关细胞因子的影响。方法培养IEC-6细胞,将其分为空白组、模型组、AP...目的研究骆驼刺提取物(Alhagi pseudalhagi(M.B.)Desv.Extract,APE)对脂多糖诱导的大鼠小肠隐窝上皮细胞(Intestinal epithelial cell,IEC-6)损伤模型NLRP3炎症小体及相关细胞因子的影响。方法培养IEC-6细胞,将其分为空白组、模型组、APE低、中、高浓度组,用1.0μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导建立细胞炎症损伤模型,APE(低、中、高浓度:15、25、35μg/mL)干预后采用CCK-8法检测细胞的存活率,通过ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α的分泌水平。蛋白质印迹法(WB)检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体信号通路5个关键蛋白:NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Cystein-asparate protease-1,Caspase-l)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)及抗凋亡蛋白Bcl-2(Anti-apoptosis Protein Bcl-2)和Bcl-xl(Anti-apoptosis Protein Bcl-xl)表达。结果与空白组比较,模型组IEC-6细胞的存活率降低,NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平降低,促炎因子IL-1β、IL-18和TNF-α的分泌水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,APE低、中、高浓度组细胞存活率升高,35μg/mL APE组IEC-6细胞的NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白相对表达水平降低,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。中、高浓度的APE能够抑制炎症因子分泌,25μg/mL APE对IL-1β、IL-18、TNF-α炎症因子分泌水平抑制率分别为31.60%、31.19%和31.09%(P<0.05)。结论骆驼刺提取物通过提高抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平,下调NLRP3炎症小体组成成分以及促炎因子IL-1β、IL-18和TNF-α分泌,从而抑制NLRP3炎症小体组装和激活,实现缓解LPS对IEC-6细胞的损伤。展开更多
目的 探讨急性脑梗死(Acute cerebral infarct,ACI)患者静脉溶栓前后核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体信号通路因子变化,分析NLRP3炎性小体信号...目的 探讨急性脑梗死(Acute cerebral infarct,ACI)患者静脉溶栓前后核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体信号通路因子变化,分析NLRP3炎性小体信号通路因子与功能结局的关系。方法 选取2022年6月-2023年6月北京市大兴区人民医院收治的180例进行溶栓治疗的ACI患者,检测患者溶栓前后NLRP3炎性小体信号通路因子[NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)]水平。根据日常生活能力量表(Activity of daily living scale,ADL)评分将ACI患者分为功能结局良好组(ADL评分>60分)及功能结局不良组(ADL评分≤60分)。收集两组患者一般资料,分析两组ACI患者溶栓前后外周血NLRP3和Caspase-1水平。Logistic回归模型分析ACI功能结局的影响因素,根据受试者工作特征(Receiver operating characteristic curve,ROC)曲线分析NLRP3炎性小体信号通路因子对ACI功能结局的预测价值。结果 与溶栓前比较,溶栓1周后,ACI患者外周血NLRP3[(1.81±0.35)vs(1.26±0.22)]及Caspase-1[(1.89±0.31)vs(1.33±0.19)] mRNA水平均降低(P<0.05);180例ACI患者中45例功能结局不良,功能结局不良发生率为25%(45/180);功能结局不良组溶栓前及溶栓1周后的NLRP3及Caspase-1水平均高于功能结局良好组(P<0.05);功能结局不良组美国国立卫生院卒中量表(National institute of health stroke scale,NIHSS)评分、空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)水平均高于功能结局良好组(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,NIHSS评分高、溶栓1周后的NLRP3及Caspase-1 mRNA高水平是影响ACI功能结局的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示:溶栓1周后NLRP3、Caspase-1mRNA单独及联合预测ACI功能结局的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.738(95%CI:0.667~0.800)、0.684(95%CI:0.684~0.815)、0.893(95%CI:0.838~0.934),溶栓1周后NLRP3、Caspase-1 mRNA联合的预测效能高于单独检测(Z=3.093、2.634,P均<0.05)。结论 ACI患者溶栓后外周血NLRP3、Caspase-1mRNA水平降低,外周血NLRP3、Caspase-1mRNA联合检测用于预测ACI功能结局具有较高的参考价值。展开更多
文摘目的研究骆驼刺提取物(Alhagi pseudalhagi(M.B.)Desv.Extract,APE)对脂多糖诱导的大鼠小肠隐窝上皮细胞(Intestinal epithelial cell,IEC-6)损伤模型NLRP3炎症小体及相关细胞因子的影响。方法培养IEC-6细胞,将其分为空白组、模型组、APE低、中、高浓度组,用1.0μg/mL的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导建立细胞炎症损伤模型,APE(低、中、高浓度:15、25、35μg/mL)干预后采用CCK-8法检测细胞的存活率,通过ELISA试剂盒检测炎症因子IL-1β、IL-18、TNF-α的分泌水平。蛋白质印迹法(WB)检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体信号通路5个关键蛋白:NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Cystein-asparate protease-1,Caspase-l)、凋亡相关斑点样蛋白(Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)及抗凋亡蛋白Bcl-2(Anti-apoptosis Protein Bcl-2)和Bcl-xl(Anti-apoptosis Protein Bcl-xl)表达。结果与空白组比较,模型组IEC-6细胞的存活率降低,NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平降低,促炎因子IL-1β、IL-18和TNF-α的分泌水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,APE低、中、高浓度组细胞存活率升高,35μg/mL APE组IEC-6细胞的NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白相对表达水平降低,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。中、高浓度的APE能够抑制炎症因子分泌,25μg/mL APE对IL-1β、IL-18、TNF-α炎症因子分泌水平抑制率分别为31.60%、31.19%和31.09%(P<0.05)。结论骆驼刺提取物通过提高抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xl的表达水平,下调NLRP3炎症小体组成成分以及促炎因子IL-1β、IL-18和TNF-α分泌,从而抑制NLRP3炎症小体组装和激活,实现缓解LPS对IEC-6细胞的损伤。
文摘目的 探讨急性脑梗死(Acute cerebral infarct,ACI)患者静脉溶栓前后核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体信号通路因子变化,分析NLRP3炎性小体信号通路因子与功能结局的关系。方法 选取2022年6月-2023年6月北京市大兴区人民医院收治的180例进行溶栓治疗的ACI患者,检测患者溶栓前后NLRP3炎性小体信号通路因子[NLRP3、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)]水平。根据日常生活能力量表(Activity of daily living scale,ADL)评分将ACI患者分为功能结局良好组(ADL评分>60分)及功能结局不良组(ADL评分≤60分)。收集两组患者一般资料,分析两组ACI患者溶栓前后外周血NLRP3和Caspase-1水平。Logistic回归模型分析ACI功能结局的影响因素,根据受试者工作特征(Receiver operating characteristic curve,ROC)曲线分析NLRP3炎性小体信号通路因子对ACI功能结局的预测价值。结果 与溶栓前比较,溶栓1周后,ACI患者外周血NLRP3[(1.81±0.35)vs(1.26±0.22)]及Caspase-1[(1.89±0.31)vs(1.33±0.19)] mRNA水平均降低(P<0.05);180例ACI患者中45例功能结局不良,功能结局不良发生率为25%(45/180);功能结局不良组溶栓前及溶栓1周后的NLRP3及Caspase-1水平均高于功能结局良好组(P<0.05);功能结局不良组美国国立卫生院卒中量表(National institute of health stroke scale,NIHSS)评分、空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)水平均高于功能结局良好组(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,NIHSS评分高、溶栓1周后的NLRP3及Caspase-1 mRNA高水平是影响ACI功能结局的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示:溶栓1周后NLRP3、Caspase-1mRNA单独及联合预测ACI功能结局的曲线下面积(Area under curve,AUC)分别为0.738(95%CI:0.667~0.800)、0.684(95%CI:0.684~0.815)、0.893(95%CI:0.838~0.934),溶栓1周后NLRP3、Caspase-1 mRNA联合的预测效能高于单独检测(Z=3.093、2.634,P均<0.05)。结论 ACI患者溶栓后外周血NLRP3、Caspase-1mRNA水平降低,外周血NLRP3、Caspase-1mRNA联合检测用于预测ACI功能结局具有较高的参考价值。
