HPLC法同时测定红枣中cAMP和cGMP含量

建立了以有机相(甲醇)-水相(0.5%甲酸水)为流动相同时测定枣果中cAMP和cGMP含量的HPLC方法,该方法的分析条件为:Spuirsil C_(18)型色谱柱(250×4.6 mm,i.d.),流动相5%甲醇∶0.5%甲酸水=5∶95(V/V),流速0.7 mL/min,柱温30℃,检测波长256 nm。该方法具有流动相配制简单、分析时间短、色谱峰分离度好、准确度高等特点。通过10个红枣品种的分析,发现同一品种的cAMP含量高于cGMP,不同品种的cAMP和cGMP含量差异显著(p<0.05),其中骏优、骏枣和灰枣的cAMP和cGMP含量较高,这3个品种均为干制加工品种,说明cAMP和cGMP可作为新疆干制红枣品质评价的重要指标。

5味山姜属中药乙醇提取物对胃溃疡寒证模型大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响

目的：观察高良姜、大高良姜、草豆蔻、红豆蔻、益智5味山姜属中药乙醇提取物对醋酸灌胃型胃溃疡寒证大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP及cAMP/cGMP的影响,探讨同属中药温热药性的相关性及其本质。方法：采用灌服4℃冰知母水提液和浓度为15%的冰醋酸建立大鼠胃溃疡寒证模型,造模成功后随机分为模型组、西咪替丁组、附子理中丸组、各受试药物乙醇部位高、低剂量组,共14组,每组10只。观察各组中药的乙醇提取物对大鼠胃组织AC,PDE,cAMP,cGMP含量及cAMP/cGMP比值的影响。结果：5味山姜属中药乙醇提取物均能显著升高胃溃疡寒证大鼠胃组织中AC含量（P〈0.05或P〈0.01）,降低PDE含量（P〈0.05或P〈0.01）,升高cAMP含量及cAMP/cGMP比值（P〈0.05或P〈0.01）。结论：通过“性效关联”规律,利用“病证结合”模型验证了山姜属5味中药具有相似的药性。5味山姜属中药乙醇提取物都是通过升高胃组织细胞内AC与cAMP含量、降低PDE含量、调节cAMP/cGMP稳定而呈现温热性能,说明同属中药具有相似的药性,可能是由于具有亲缘关系的同属中药有相同的药效部位或相似的物质基础。

ACh对人垂体腺瘤细胞内蛋白激酶C、胞内游离钙及cAMP/cGMP的影响

我们曾发现ACh可明显地抑制垂体腺瘤细胞的增殖代谢 ,为深入探讨ACh抑制垂体腺瘤细胞增殖作用的机制 ,观察了ACh作用后垂体腺瘤细胞内蛋白激酶C (PKC)、[Ca2 +]i及cAMP/cGMP的变化。结果发现 :( 1)与空白处理组相比 ,使用PKC的激动剂PMA处理培养的人垂体腺瘤细胞时可使胞浆、胞膜和细胞总PKC活性浓度均升高 ,但ACh ( 10 μmol/L)作用 15min后 ,胞浆、胞膜和细胞总PKC活性均下降 ,且此作用可被阿托品阻断 ;( 2 )ACh ( 10 μmol/L)作用于单个人垂体腺瘤细胞后 ,立即使垂体腺瘤细胞 [Ca2 +]i 相对水平降低 ,但此作用可被阿托品阻断 ;( 3 )ACh作用于人垂体腺瘤细胞 15min后 ,胞内cAMP水平均明显升高 ,而cGMP没有改变。该结果为探讨ACh抑制垂体腺瘤细胞增殖的分子机制提供了重要线索 ,同时提示 。

参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠cAMP/cGMP、Na^+-K^+-ATP酶的影响

目的:通过观察参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠Na+-K+-ATP酶的影响,探讨其治疗缓慢性心律失常的机制。方法:用普萘洛尔制备缓慢性心律失常大鼠模型,观察参仙升脉口服液对缓慢性心律失常大鼠cAMP/cGMP、Na+-K+-ATP酶的影响。结果:参仙升脉口服液组与模型组比较差异显著,明显提高缓慢性心律失常大鼠cAMP/cGMP、Na+-K+-ATP酶的活性,这可能是其治疗缓慢性心律失常的机制之一。

针刺“内关”对家兔急性缺血心肌中cAMP和cGMP含量的影响

本实验用静脉注射垂体后叶素(2.5 u/kg)造成家兔心肌急性缺血,用放射免疫分析法测定心肌细胞内cAMP和cGMP,以观测针刺双侧"内关"穴对急性缺血心肌细胞中cAMP和cGMP含量的影响。结果表明,心肌急性缺血时细胞内cAMP含量、cAMP/cGMP比值均明显增高,针刺"内关"可抑制这种过度增高,使心肌细胞内的cAMP/cGMP比值维持相对稳定。

cAMP、cGMP及基因表达谱在心气虚型家兔心衰模型中的变化

目的通过观察cAMP、cGMP的含量和比值,以及对基因表达谱芯片的分析,从微观角度揭示家兔心气虚证心衰模型的发病机制。方法导管术造成家兔充血性心力衰竭,于15 d、30 d取血检测cAMP、cGMP含量并剪取心肌组织进行HE染色及病理观测损伤程度,并利用全基因表达谱芯片分析心气虚型心衰模型家兔的基因表达差异。结果①正常家兔的心肌细胞无损伤,造模15 d、30 d家兔均出现心肌细胞损伤,且30 d的损伤更加广泛和严重;②与正常对照组比较,造模15 d和30 d组cGMP含量增加(P<0.05),cAMP含量和cAMP/cGMP比值下降(P<0.05),且30 d组与15 d组比较cGMP含量增加(P<0.05),cAMP含量和cAMP/cGMP比值下降(P<0.05);③15 d、30 d模型组与正常对照组间差异基因的交集基因有665个,对NCBI中功能注释明确的家兔基因,应用序列比对来注释功能,得到16个功能明确的基因,它们主要与离子通道、肌收缩和信号转导等功能有关。结论血清cAMP、cGMP含量、cAMP/cGMP比值可较好地反映心气虚证家兔心衰的病变程度,可用于对该模型进行评价;交集的665个基因包含模型稳定影响的基因,对该部分基因进行分析挖掘有望找到受模型影响的特异基因。

外阴白色病变组织中cyclin D1、p16和CD34表达情况及其与血清cAMP和cGMP含量的关系

目的分析外阴白色病变组织中cyclin D1、p16和CD34表达情况及其与血清c AMP和c GMP含量的关系。方法选择在该院接受治疗的外阴白色病变患者36例作为观察组对象,另取同期在该院进行体检的健康女性35例作为对照组,比较观察组患者外阴病变组织及非病变组织中cyclin D1、p16和CD34的表达情况,观察组及对照组的血清c AMP和c GMP含量。结果观察组患者病变组织皮肤的cyclin D1和CD34表达高于正常组织,p16表达明显低于正常皮肤组织(P<0.05)。观察组患者的血清c AMP含量及c AMP/c GMP低于对照组、c GMP含量高于对照组(P<0.05)。观察组患者的血清c AMP含量与病变组织cyclin D1和CD34表达呈负相关,与p16表达呈正相关;血清c GMP含量与病变组织cyclin D1和CD34表达呈正相关,与p16表达呈负相关。结论外阴白色病变组织中cyclin D1和CD34表达增高,p16表达降低,同时患者血清c AMP和c GMP含量变化与病变组织中的各调控因子表达呈直接相关关系。

头穴透刺对急性脑梗塞大鼠血浆中cAMP、cGMP含量的影响

为探讨头穴透刺治疗急性脑栓塞对血浆中cAMP、cGMP含量的影响 ,用线栓法直接阻断大鼠大脑中动脉开口处制作急性脑梗塞动物模型 ,应用放免技术 ,检测头穴透刺对急性脑梗塞大鼠血浆中cAMP、cGMP含量的影响。结果 :头穴透刺后 ,血浆中过度降低的cAMP含量明显升高 ,过度升高的cGMP含量逐渐下降 ,病理性减小的cAMP/cGMP比值增大 ,并均趋于正常值水平。提示头穴透刺可以调节急性脑梗塞大鼠血浆中cAMP。

大黄黄连泻心汤、理中丸对幽门结扎型胃溃疡寒、热证模型大鼠血清cAMP、cGMP含量的影响

目的:探讨幽门结扎型胃溃疡寒、热证模型的形成机制及寒、热性方剂对胃溃疡寒、热证模型的基本作用机理并进一步探讨方证相应的客观规律。方法:采用寒、热因素结合幽门结扎模型建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,采用酶联免疫法检测受试大鼠血清cAMP、cGMP的含量。结果:各模型组大鼠血清cAMP的含量与空白对照组比较明显降低,cGMP的含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。热性模型血清cGMP含量显著高于寒性模型。大黄黄连泻心汤可显著升高热性模型组大鼠血清cAMP的含量,降低cGMP的含量(P<0.05或P<0.01);理中丸可显著升高寒性溃疡组大鼠血清cAMP的含量,降低cGMP的含量(P<0.05或P<0.01)。结论:通过"方证相应"理论验证了"病证结合"的胃溃疡寒、热证模型复制成功,大黄黄连泻心汤对热性胃溃疡、理中丸对寒性胃溃疡的治疗作用,可通过促进cAMP含量的释放、降低cGMP的含量而实现。

哮喘大鼠肺组织cAMP、cGMP的动态变化及补肾定喘汤对其的影响

支气管哮喘是一种气道慢性变应性炎症性疾病,临床上表现为反复发生的喘息、呼吸困难。补肾法是临床上防治支气管哮喘的常用方法,“发时治肺,平时治肾”,因此补肾常用于哮喘的缓解期。目前,有关补肾防治支气管哮喘的临床研究较多,而实验研究较少。为了阐释补肾的作用机制,我们观察了哮喘大鼠肺组织中cAMP、cGMP的动态变化及补肾定喘汤对其的影响。1 实验材料1.1 动物 清洁级雄性SD大鼠,购自上海计划生育研究所,

心力衰竭时血浆心钠素、cAMP、cGMP与左心功能关系研究

为研究心力衰竭患者血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、心钠素（ＡＮＦ）的变化，同时与超声左心功能指标相比较以探讨它们的互相关系。收集了６５例心功能不全患者，１５例正常健康对照病例，静脉血用放射免疫法测定血浆中ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＡＮＦ。２０例完成超声心动图左心室射血分数（ＥＦ）、短轴缩短率（ΔＤ）、左心室舒张期末容积（ＬＥＤＶ）的测定。结果：血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＡＮＦ的升高程度与心衰严重程度密切相关。ＮＹＨＡⅢ～Ⅳ级心功能患者的血浆生化指标明显高于ＮＹＨＡⅠ～Ⅱ级患者，而后者则明显高于无心功能不全的健康人。血浆ｃＡＭＰ、ＡＮＦ与ＥＦ、ΔＤ呈弱负相关而与ＬＥＤＶ成强正相关；血浆ｃＧＭＰ与ＥＦ成强负相关，与ΔＤ呈很弱负相关，与ＬＥＤＶ成较弱正相关，血浆ＡＮＦ与血浆ｃＡＭＰ有很好的相关性，而与ｃＧＭＰ有较弱的相关。结论：血浆ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＡＮＦ为判断心功能好坏的一较好指标。

针刺对糖尿病大鼠坐骨神经中cAMP、cGMP含量的影响

本实验采用链脲佐菌素 (STZ)诱发大鼠实验性糖尿病 ,以坐骨神经中cAMP、cGMP作为检测手段 ,观察了针刺对糖尿病大鼠的治疗作用。结果显示 ,糖尿病大鼠 (DM)坐骨神经中cAMP、cGMP含量明显低于正常大鼠 (ND) (P <0 .0 1 ) ,而给予STZ糖尿病大鼠针刺治疗 4个月后 ,针刺治疗组 (Ac)坐骨神经中cAMP、cGMP含量与造模组比较有明显差异 (P <0 .0 1 )。提示针刺可防止糖尿病大鼠坐骨神经中cAMP、cGMP含量的下降 。

游泳训练后大鼠心肌细胞cAMP、cGMP含量的变化

目的:探讨游泳训练后大鼠心肌环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量的变化。方法:用心脏重量(mg)/体重(g)计算心脏系数,放射免疫法测定心肌cAMP、cGMP含量。结果:8周游泳训练导致心脏系数显著增高(P<0.05),心肌cAMP水平升高不显著(P>0.05),cGMP水平显著升高(P<0.05)。结论:8周游泳训练导致心脏代偿性肥大,cAMP/cGMP比值减小。

鱼棉平喘方对哮喘豚鼠血浆中cAMP、cGMP及PAF含量影响

目的 :探讨鱼棉平喘方 (DYA)对嗜喘豚鼠的平喘作用及作用机理。方法采用氯化乙酰胆碱和磷酸组胺混合液雾化引喘 ,观察豚鼠引喘潜伏期的变化 ;采用 4 %卵清蛋白生理盐水和 4 %氢氧化铝凝胶致敏 ,卵清蛋白复制哮喘模型 ,生物定量法测定血浆中血小板活化因子 (PAF)的含量。结果 :DYA给药后各组豚鼠的引喘潜伏期比给药前及正常组均显著延长 (P <0 .0 1 )。DYA治疗各组与模型组比较 ,血浆cAMP含量及cAMP/cGMP比值均显著升高 (P <0 .0 1 ) ,血浆cGMP含量显著降低 (P <0 .0 1 )。结论 :DYA有明显的平喘作用 ,其作用机理与其调节机体cAMP、cGMP水平 ,稳定cAMP/cGMP比值 。

益气活血颗粒对大鼠心气虚证cAMP/cGMP影响的研究

目的:观察益气活血颗粒对大鼠心气虚证cAMP/cGMP的影响。方法:用大鼠负重强迫游泳后通过给予大剂量心得安使大鼠造模定位于心脏,作为心气虚证实验动物模型。分别以益气活血颗粒、天王补心丸、生理盐水灌胃。于大鼠胸壁心跳最明显处,将针头刺入心脏,分别取出2～3mL血液。观察大鼠血浆和心肌中cAMP、cGMP及cAMP/cGMP的变化。结果:造模组与各组间比较均有显著性差异(P<0.01、P<0.05),大剂量治疗组分别与小剂量、阳性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。心肌中小剂量治疗组与阳性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:心气虚证模型成立。益气活血颗粒可升高cAMP含量,降低cGMP含量。

一氧化碳对大鼠肺动脉平滑肌细胞[Ca^(2+)]、cAMP、cGMP的作用

目的 观察低浓度一氧化碳 (CO)对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)的作用。方法 应用细胞培养 ,Lowry法测量蛋白质含量 ,Fura 2荧光指示剂测PASMC的胞内钙浓度 ([Ca2 + ] ) ,放射免疫cAMP、cGMP药盒测cAMP、cGMP浓度。结果 ①缺氧组PASMC内质网扩张 ,胞浆内出现髓鞘样结构 ,线粒体肿胀、空泡化。低浓度CO组PASMC的损害减轻、仅线粒体稍肿大 ,部分内质网有扩张。②缺氧组PASMC[Ca2 + ]明显升高 (P <0 .0 1) ,低浓度CO组PASMC[Ca2 + ]接近常氧组。③缺氧组PASMC的cAMP均有升高趋势 ,cAMP先降后升 ,cGMP缓慢升高。低浓度CO组PASMC的cGMP虽比常氧组有所升高 ,但无明显差异 (P >0 .0 5 )。缺氧及复合CO作用下cAMP均呈上升趋势 ,和常氧组比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 缺氧可能通过第二信使系统促进PASMC的增生 ,而低浓度CO可以抑制缺氧的作用 ,至少部分可能是通过 [Ca2 + ]

检测血浆、组织cAMP及cGMP对鉴别良恶性胃病的临床价值

目的探讨血浆、组织中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)及cAMP/cGMP(CA/CG)比值的测定对鉴别良恶性胃病的临床意义。方法对105例因胃肠道症状接受胃镜检查配合活检确诊,分为慢性胃炎组42例,溃疡病组28例,胃癌组35例。用放免法分别测定血浆、组织cAMP,cGMP和CA/CG比值。结果35例胃癌患者血浆及组织中cAMP,cGMP,CA/CG(x-±s)分别为19.14±2.52pmol/ml,6.90±1.78pmol/ml,3.66±2.12和459.95±103.25pmol/g湿组织,25.47±9.20pmol/g湿组织,18.36±9.70,其中cGMP,CA/CG指标胃癌组与慢性胃炎组及溃疡病组相比差别有统计学意义(P<0.001),而cAMP与各组相比差别无统计学意义(P>0.05)。结论测定血浆、组织cGMP及CA/CG比值对辅助鉴别良恶性胃病有重要临床意义。

电针“内关”对急性心肌缺血家兔延髓、心肌、血浆中cAMP、cGMP含量的影响

本实验用静脉注射垂体后叶素(2 . 5μ/kg) 造成家兔急性心肌缺血, 电针“内关”观察对急性心肌缺血家兔心肌、延髓、血浆中cAMP、cGMP及cAMP/cGMP含量的影响, 结果发现电针“内关”可抑制上述组织中cAMP的过度增加, 促使cAMP/cGMP接近正常值水平。

17β-雌二醇对人成骨细胞株HOS TE85细胞增殖及胞内cAMP,cGMP,iNOS影响

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对ＨＯＳＴＥ８５细胞增殖及胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ影响。方法［３Ｈ］－ＴｄＲ参入，放射免疫及Ｌ－３Ｈ－精氨酸转化法。结果Ｅ２１．０ｍｍｏｌ·Ｌ－１处理４８ｈ，细胞计数为（９４．３×１０７±７．５×１０７）个·Ｌ－１，对照组为（６５．０×１０７±５．９×１０７）个·Ｌ－１，［３Ｈ］－ＴｄＲ参入量增加４５．０％；细胞ｉＮＯＳ活性为（７３．０±６．６）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·ｇ－１·ｍｉｎ－１（比对照组增加４６１．５％），ｃＧＭＰ为（０．６９±０．０３）ｐｍｏｌ·Ｌ－１·１０－８ｃｅｌ（比对照组增加３０５．９％）；抑制ｈＰＴＨ诱导胞内ｃＡＭＰ升高。结论Ｅ２能刺激成骨细胞增殖。Ｅ２可能通过影响胞内ｃＡＭＰ，ｃＧＭＰ，ｉＮＯＳ含量和活性而发挥作用。