结肠癌组织中Notch1和Numb基因异常表达对肿瘤生长的影响

研究人结肠癌组织中Notch1和Numb异常表达情况对肿瘤生长产生的影响。方法 收集我院2019-2023年经过手术切除经病理证实结肠癌组织标本120例,并采用免疫染色体方法检测Notch1和Numb的表达情况,并分析Notch1表达和结肠癌组织之间的关系。借助X2和Fisher确切概率法来检验Notch1和Numb表达情况和结肠癌的表达水平和临床指标之间的关系。结果 结肠癌患者的Notch1和Numb的表达指标要高于正常患者的表达水平。结论 通过讨论癌症分化程度、浸润程度、是否感染Hp感染、神经浸润和淋巴结转移与Notch1和Numb的关系可以熟知患者的病情。结论 在正常的结肠癌病患中Notch1和Numb的表达水平都会显著升高,这两大指标和患者胃癌临床病理因素确实有着密切的关系,在发展中也可能参与了结肠癌的发生、发展和浸润等不同的过程。

飞燕草素调节Numb/Notch信号通路诱导卵巢癌细胞凋亡

目的 探讨飞燕草素调节Numb/Notch信号通路诱导卵巢癌细胞A2780凋亡的作用机制。方法 使用顺铂(500μmoL/mL)和低剂量(500μmoL/mL)、高剂量(1000μmoL/mL)飞燕草素处理卵巢癌细胞A2780,同时设立卵巢癌细胞A2780对照组,各组设6个平行样,培养72 h后。实验结束后,采用CCK-8试剂盒测定各组细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell法测定细胞侵袭水平,划痕实验检测细胞迁移水平,实时荧光定量(RT-qPCR)及蛋白印记法(West-blot)检测细胞Numb、Notch1 m RNA和蛋白表达水平。结果 与A2780细胞组比较,顺铂组、飞燕草素低、高剂量组A值、存活率、穿膜数、迁移距离、Notch1 m RNA和蛋白表达降低(P<0.05);与顺铂组比较,飞燕草素低剂量组A值、存活率、穿膜数、迁移距离、Notch1 m RNA和蛋白表达升高(P<0.05),高剂量组A值、存活率、穿膜数、迁移距离、Notch1 m RNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05);与飞燕草素低剂量组比较,飞燕草素高剂量组A值、存活率、穿膜数、迁移距离、Notch1 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。与A2780细胞组比较,顺铂组、飞燕草素低、高剂量组凋亡率、Numb mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);与顺铂组比较,飞燕草素低剂量组凋亡率、Numb mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),高剂量组凋亡率、Numb mRNA和蛋白表达无明显变化(P>0.05);与飞燕草素低剂量组比较,飞燕草素高剂量组凋亡率、Numb mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论 飞燕草素可以通过激活Numb进而抑制Notch1通路来抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进其凋亡。

Numb调控ITGB1促进胃癌细胞对多柔比星敏感性的机制研究

目的探究细胞命运决定子Numb调控胃癌细胞对多柔比星(ADR)敏感性的作用,并明确Numb介导胃癌细胞化疗敏感性的分子机制。方法将SGC-7901随机分为对照组、ADR组、pLVX-Numb组、pLVX-Numb+ADR组,经过对应的ADR处理与转染处理后,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法测定细胞内耐药蛋白(P-gp)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、Cleaved-caspase9的蛋白表达水平。再使用Numb过表达及其对照慢病毒感染SGC-7901细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞内ITGB1表达变化,免疫共沉淀实验分析细胞内源性Numb与ITGB1结合情况。结果与ADR组比较,pLVX-Numb+ADR组细胞内浓缩、碎裂的蓝色凋亡体增多,细胞凋亡率升高,且细胞内P-gp和PARP蛋白相对表达量下调、Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9蛋白相对表达量上调(P<0.05)。此外,SGC-7901细胞中内源性Numb与ITGB1能够形成复合物,pLVX-Numb组细胞中ITGB1蛋白相对表达量显著低于对照组(P<0.05),且ITGB1蛋白泛素链明显强于对照组。结论Numb能够促进胃癌细胞对多柔比星的敏感性,该作用机制可能与其调控ITGB1蛋白表达相关。

Numb和CCDC78与结直肠癌演进的关系及对不良预后的预测价值

目的:探讨Numb、CCDC78基因表达与结直肠癌(CRC)疾病演进的相关性及其对患者不良预后的预测价值。方法:选取结直肠石蜡标本182例,其中结直肠良性病变组织30例,CRC组织标本及对应癌旁组织标本各60例,淋巴结转移癌组织32例。比较良性病变组织、淋巴结转移癌组织、癌组织与相对应癌旁组织中Numb、CCDC78 mRNA表达水平,采用χ2检验比较Numb、CCDC78高表达与低表达患者临床病理差异;采用Pearson相关性分析检验CRC组织中Numb、CCDC78 mRNA表达的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析Numb、CCDC78阳性对CRC患者不良预后的预测价值。结果:CRC组织中Numb mRNA相对表达量显著低于癌旁组织(P<0.05);CCDC78 mRNA相对表达量则显著高于癌旁组织(P<0.05)。淋巴结转移癌组织Numb、CCDC78蛋白阳性表达率最高,CRC组织、腺瘤组织、癌旁组织依次降低(P<0.05)。以基因表达量均数为依据将60例患者分为Numb mRNA低表达与高表达组,Numb mRNA表达水平与分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。以基因表达量均数为依据将60例患者分为CCDC78 mRNA低表达与高表达组,CCDC78 mRNA表达水平与淋巴结转移有关(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,CRC组织中Numb与CCDC78 mRNA表达呈负相关(r=-0.714,P<0.001,95%CI:-0.854~-0.481)。ROC曲线显示Numb、CCDC78 mRNA表达在预测患者不良预后中有较高诊断效能,AUC分别为0.863、0.800。结论:Numb、CCDC78基因异常表达与结直肠癌疾病演进密切相关;Numb、CCDC78可作为预测结直肠癌转移及不良预后的可靠标志物。

肝细胞癌组织中Numb、p53蛋白的表达及其意义

目的观察Numb蛋白和p53蛋白在肝细胞癌(HCC)组织中的表达情况及其两者的关系。方法采用免疫组化SP法检测30例HCC组织及其癌旁组织、8例肝硬化组织和9例正常肝组织中的Numb蛋白和p53蛋白的表达情况。结果 Numb蛋白在HCC组织中的阳性表达率为44.7%,明显低于癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05);p53蛋白在HCC组织中的阳性表达率为66.7%,明显高于癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.01);在HCC组织中,Numb蛋白表达与p53蛋白表达呈负相关(r=-0.4667,P<0.05)。结论 HCC组织中Numb蛋白和p53蛋白表达与非HCC组织比较均有变化,两者可能均参与了HCC的发生发展过程。

miR-182靶向NUMB调控结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的:研究miR-182对结直肠癌细胞HT-29增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法:运用qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、结直肠癌细胞HT-29中miR-182、NUMB的表达;将anti-miR-con组(转染anti-miR-con)、anti-miR-182组(转染anti-miR-182)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-NUMB组(转染pcDNA-NUMB)、anti-miR-182+si-con组(anti-miR-182和si-con共转染)、anti-miR-182+si-NUMB组(anti-miR-182和si-NUMB共转染)均用脂质体法转染HT-29细胞;Western blot检测各组细胞中NUMB的蛋白表达;Transwell检测各组细胞的迁移和侵袭;MTT法检测各组细胞的增殖;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光素酶活性。结果:与人正常结肠上皮细胞HCoEpiC相比,结直肠癌细胞HT-29中miR-182表达显著升高,NUMB表达显著降低(P<0.05);抑制miR-182、过表达NUMB均可下调HT-29细胞的增殖、迁移、侵袭;NUMB是miR-182的靶标。敲减NUMB可逆转抑制miR-182对HT-29细胞增殖、迁移、侵袭的下调作用。结论:miR-182可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其机制可能与靶向NUMB有关,将可为miR-182靶向治疗结直肠癌提供依据。

针灸对环磷酰胺化疗小鼠骨髓造血细胞中Notch信号传导通路相关差异基因Numb1、Numb2的影响

目的：通过观察针刺、艾灸对环磷酰胺（CTX）化疗后,健康小鼠骨髓造血细胞中Notch信号通路相关差异基因numb1、numb2表达的影响,从分子生物学方面探讨针灸改善化疗后骨髓抑制、提升外周血白细胞的机制。方法：取雄性昆明种SPF级小鼠40只,运用随机分层分组的方法分为空白组（A组）、模型组（B组）、针刺组（C组）、艾灸组（D组）。B组、C组、D组的小鼠注射CTX建立骨髓抑制模型,A组给予同等剂量生理盐水。针刺和艾灸治疗后,运用免疫组化法、RT-PCR法、Western-Bolt法检测Notch信号通路上相关差异基因numb1、numb2的蛋白表达水平及m RNA表达,进行数据统计分析。结果：numb1、numb2属于小鼠骨髓造血细胞Notch信号通路相关性基因,且具有显著差异性,针刺、艾灸可以上调numb1、numb2 mRNA的表达,促进numb1、numb2蛋白含量的增加。结论：上调Notch信号通路相关差异基因numb1、numb2的表达,抑制过度激活的Notch信号通路,增强骨髓造血功能,可能是针灸减轻CTX化疗引起的骨髓抑制、改善造血功能的微观机制之一。

细胞分裂方向的改变和Numb的表达增高在宫颈鳞癌中的作用

目的探讨细胞分裂方向及细胞命运决定子Numb的表达改变与宫颈鳞癌发生的关系。方法测量经病理检查确诊的59例CIⅡ-Ⅲ、21例CINⅠ及48例正常宫颈鳞状上皮的基底细胞的分裂角度,并采用免疫组织化学染色检测上述各例及50例宫颈浸润性鳞癌(ISCC)的Numb蛋白的表达结果在正常宫颈鳞状上皮中基底细胞分裂以垂直分裂为主(54.4%);在CINⅠ中,垂直分裂减少(40.3%),而水平分裂增加(32.8%);在CINⅡ-Ⅲ中,细胞分裂方向紊乱。基底细胞分裂角度在CINⅠ组和正常对照组间无显著性差异,而CINⅡ-Ⅲ组与CINⅠ组及正常对照组相比较有显著性差异。Numb的表达除在正常对照组和CINI组之间没有差异外,在各组之间有显著性差异,表现为从正常对照组到ISCC组逐渐增强。结论细胞分裂方向的改变和Numb分子的表达增高可能参与了宫颈鳞癌的发生发展过程。

宫颈癌组织细胞中Numb基因表达及相关性研究

目的探讨Numb基因在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌细胞增殖的影响。方法收集30例正常宫颈组织、56例宫颈癌组织和17例原位癌组织采用免疫组织化学染色观察Numb基因的表达情况。通过构建siRNA表达载体下调宫颈癌HeLa细胞株中内源性Numb基因表达，MTT实验检测下调Numb表达后细胞增殖能力的变化。结果免疫组织化学染色结果显示，Numb在宫颈癌及原位癌中的表达明显高于正常宫颈组织，其阳性表达率分别为72．2％，69．6％和60％，（χ^2=30．259，P〈0．05）。siRNA干扰宫颈癌HeLa细胞，干扰后Numb基因的蛋白表达水平（灰度值分别为：0．51±0．04和0．56±0．05）较对照组（灰度值分别为：0．78±0．06和0．75±0．05）明显下降（t=4．2，P〈0．05）。MTT实验显示，干扰Numb基因后HeLa细胞培养第1，3，5和7天时，增殖活力（吸光度值分别为：0．211±0．06l，0．235±0．013，0．438±0．05l和0．773±0．032）较对照组（吸光度值分别为：0．225±0．047，0．300±0．026，0．549±0．039和1．023士0．041）显著下降，差异具有统计学意义（t=5．1，P〈0．05）。结论Numb基因在宫颈癌组织中高表达，Numb在宫颈癌中可能通过促进癌细胞的增殖而促进宫颈癌的进展。

NUMB表达对肝细胞癌患者预后的影响

目的探讨NUMB在肝细胞癌(肝癌)中的表达及其与患者临床因素、预后的关系。方法根治性手术切除的肝癌病理标本119例,使用免疫组织化学(IHC)方法检测肝癌组织及癌旁组织中NUMB蛋白,并分析NUMB的表达与患者临床因素及预后的关系。结果肝癌组织中NUMB表达阳性率为36.1%(43/119),明显低于癌旁组织的100.0%(119/119)(P<0.01);NUMB表达缺失与肿瘤分化程度、脉管侵犯、早期复发及BCLC分期相关(P<0.05);NUMB表达缺失的患者,总体生存率及无瘤生存率均下降(P<0.01)。Cox多因素分析显示NUMB为影响肝癌患者预后的独立危险因素(P<0.01)。结论 NUMB在肝癌组织中表达缺失,并且其表达的缺失与肝癌侵袭特性有关,为影响患者预后的独立危险因素。

Numb在肿瘤发生中的作用机制

细胞内多基因表达异常是恶性肿瘤发生发展的基础，相关研究越来越多地集中在关键基因的探索．近年来发现的Numb蛋白在肿瘤形成、浸润与转移中的作用受到越来越多的关注。作为一种重要的发育分子．Numb是不对称分裂决定因子，参与神经前体细胞定向分化过程，并在非对称性分裂中对细胞分裂起关键调节作用。目前证实，Numb能调节细胞对分化信号的识别能力，在调控细胞生长分化、组织更新及稳定细胞内环境中发挥重要作用。目前在许多肿瘤细胞中发现Numb基因表达异常．表明Numb在肿瘤的发生发展中起着重要作用。本文就Numb的结构特性．及其与肿瘤发生可能有关的机制等方面研究作一综述。

Numb分子在结肠癌组织中的表达及其与临床分期的相关性

目的:检测Numb分子在结肠癌组织中的表达,探讨其与临床病理分期的关系。方法:收集并筛选2012年9月至2016年8月解放军第306医院病理科存档的手术切除且得到病理确诊的结肠癌病例75例,记录其肿瘤分期,采用免疫组织化学方法检测结肠癌标本及癌旁组织中Numb蛋白表达水平,分析其与临床病理因素的相关性。结果:在癌旁组织中Numb表达主要定位在细胞膜上,而在癌组织中胞膜及胞浆均有表达。结肠癌组织中Numb表达水平较癌旁组织降低(4.87±2.10 vs7.88±1.87),差异有统计学意义(P<0.01);Numb表达水平在N_0与N_(1~2)期间及TNM分期I^II与III^IV间差异具有统计学意义(P<0.01);而Numb表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:Numb在结肠癌组织中表达降低,提示Numb分子在结肠癌的发生发展中发挥作用。

慢性脑缺血大鼠海马区Numb的表达变化与认知功能关系的研究

目的探讨慢性脑缺血大鼠海马区Numb表达的动态变化与认知功能之间的关系。方法 SD大鼠随机分为8周、10周、12周对照组和实验组;复制慢性脑缺血模型;Morris水迷宫试验检测行为学变化;免疫组织化学和Western blotting检测海马区Numb的表达变化。结果实验组逃避潜伏期比对照组明显延长(P<0.05),实验组Numb的阳性细胞百分数及相对光密度值比对照组显著减少(P<0.05)。结论海马区Numb表达的持续下降可能是慢性缺血导致认知功能障碍的重要原因之一。

Numb蛋白抑制肿瘤发生的研究进展

Numb是一种重要的细胞命运决定因子,它通过不对称有丝分裂拮抗Notch家族的细胞质膜受体而控制细胞的命运。numb基因的缺失将导致癌基因notch的激活和抑癌基因p53表达降低。本文就Numb的结构功能、Numb的相关分子、Numb与肿瘤的关系等作一综述。

细胞生长分化及肿瘤形成中Numb的作用

Numb是一种进化保守蛋白,其作为内源性细胞命运决定因子,对细胞分裂的命运起决定作用。Numb在成熟组织内分布广泛,与Notch、WNT、Hedgehog等信号通路关系密切,其通过对Notch、WNT、Hedgehog等信号通路的调节,发挥多种作用,如控制细胞不对称分裂和细胞命运的抉择、细胞内吞作用、细胞黏附、细胞迁移、肿瘤发生及迁移等。近年研究表明,Numb除参与这些生理的发育机制外,在减弱肿瘤等多种疾病中均发挥重要作用。该文现对Numb的多种作用及其在细胞生长分化和肿瘤形成中的作用作一综述。

Numb基因在培养神经干细胞中的表达

为了观察在体外培养的神经干细胞内参与细胞发育分化和细胞非对称性分裂的 notch信号传导路的分子 numb的分布和表达 ,采用无血清培养技术 ,在体外进行神经干细胞克隆的培养传代 ,经过免疫细胞化学鉴定后 ,用 num b特异性引物对培养的神经干细胞进行 RT-PCR分析 ,PCR产物经克隆测序后 ,用地高辛标记 ,对神经干细胞克隆进行原位杂交。结果表明 :在培养的神经干细胞内有大量细胞 ( >95 % )均为 numb基因表达信号阳性 ;

命运分子cNumb在原肠期胚胎的表达及其生物信息学分析

目的探讨命运分子c Numb在原肠期胚胎中的表达情况及其基因和编码蛋白的基本生物学特征。方法利用原位杂交技术检测c Numb基因在原肠期鸡胚中的表达情况,同时应用生物学软件和在线平台对c Numb基因及其编码蛋白进行生物信息学分析。结果 c Numb mRNA在鸡胚4期开始表达于原条顶端,随发育过程逐渐扩展至亨氏节、头突和神经管,但表达区域仍相对集中。Numb基因在不同物种中具有较高保守性,c Numb编码的蛋白属于胞内蛋白,包含磷酸酪氨酸相互作用结构域和多个潜在磷酸化位点,可参与调节多种细胞生物学过程。结论通过生物信息学分析获得了c Numb基因及其蛋白的生物学特征,为进一步研究Numb在胚胎神经发育中的调控机制奠定了基础。

Numb基因在培养神经干细胞中的表达(英文)

目的观察参与细胞发育分化和细胞非对称性分裂的notch信号传导路的分子Numb在体外培养的神经干细胞内的分布和表达,以期为在体外控制神经干细胞的分化提供新的线索。方法取孕14d(E14)Balb/c近交系小鼠胚胎,采用无血清培养技术,在体外进行神经干细胞克隆的培养传代,经过免疫细胞化学鉴定后,用Numb特异性引物对培养的神经干细胞进行RT-PCR分析,PCR产物经克隆测序后,用地高辛标记,对神经干细胞克隆进行原位杂交。结果在培养的神经干细胞内有大量细胞(>95%)均为Numb基因表达信号阳性;干细胞克隆内部中心和边缘相互间未见明显差别。结论Numb基因可能在神经干细胞的增殖和分化过程中起重要作用。

原发性肝癌Numb与p53蛋白表达及其临床意义

目的探讨原发性肝癌组织中Numb蛋白和p53蛋白的表达及其与临床病理之间的关系,并讨论其在原发性肝癌中的临床意义。方法免疫组织化学方法检测38例肝癌病人和36例来源于外伤及非肝病患者的正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中Numb和p53蛋白表达。结果 Numb和p53蛋白在正常肝组织、癌旁组织、肝癌组织的表达情况刚好相反;Numb和p53蛋白的表达水平均与患者性别、年龄及肿瘤大小无关(P>0.05),与患者的临床分期、门脉癌栓形成有关(P<0.05);肝癌组织中Numb和p53的异常表达呈负相关(r=-0.5201,P<0.01)。结论在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中Numb蛋白表达呈逐渐下降趋势,而p53蛋白表达却正好相反;Numb与肝癌的恶性程度呈负相关,因此Numb可以作为判断肝癌恶性程度的指标之一。

Numb和numblike基因对小鼠胚胎期心血管发育的影响

Numb是近年来发现的第一个在多细胞生物中决定细胞命运的信号分子。在哺乳动物中,有4种不同的剪接形式,和同源分子numblike一起构成5种不同的分子。我们用血管内皮细胞特异性重组酶Tie2-cre同时介导敲除numb和numblike,发现小鼠在胚胎期E10.0出现表型,体积变小,E10.5出现心包积液(pericardial effusion)的病理模型,背主动脉管径显著变细,心脏小梁柱显著减少,E11.0前死亡。这些结果说明numb和numblike在心血管发育中有重要作用。本实验对研究心血管发育的分子细胞机制有重要指导意义,并将加深对心血管疾病发生新的认识。