鼠疫耶尔森菌carf1基因的克隆表达及其产物免疫学评价

目的表达具有免疫学活性重组F1抗原（rF1），并以其构建检测鼠疫抗体胶体金试纸条。方法将去掉信号肽编码序列的caf1基因片段与载体质粒pET32a（＋）通过BamHl和NotⅠ双酶切位点进行连接，将重组质粒[caf1-pET32a（＋）]转化入BL21（DE3）中进行诱导表达，表达产物经亲和层析纯化，以纯化rF1及天然F1抗原制备双检测鼠疫抗体胶体金标试纸条，并对浙江省528份人血清标本进行检测。结果含caf1-pET32a（＋）的BL21（DE3），经诱导产生相对分子质量（Mτ）约为35．5×10^3的rF1融合蛋白；rF1融合蛋白检测鼠疫抗体的敏感性等同甚至超越天然F1抗原；在528份人血清标本的检测中，rF1与天然F1的符合率为97．9％（κ=0．466），有较好一致性。结论制备的rF1，具有良好免疫学活性，该rF1可替代天然F1抗原，用于鼠疫免疫学检测。