柞蚕杀菌肽对桉树青枯病假单胞菌的杀菌作用

桉树、木麻黄青枯病是广东省林业主要病害，近年为害猖獗导致严重损失。本文报道柞蚕杀菌肽Ｄ对桉树、木麻黄青枯病假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ）的杀菌作用。以荧光黄染料隅联的杀菌肽作用于青枯病假单胞菌，用电镜及激光共焦扫描显微镜观察，发现杀菌肽能迅速地将菌体包围、作用于细胞膜，造成许多小孔并进入胞内，尔后损伤的小孔扩大形成喇叭口，内含物由此泄出胞外，最后菌体变成空囊而死亡。

农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入桑树的研究

人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因通过根癌农杆菌Ｔｉ质粒载体转入桑树叶盘，获得基因转化工程苗。柞蚕抗菌肽对桑树青枯病假单孢菌有明显杀菌作用。人工合成柞蚕抗菌肽基因导入农杆菌感染桑树叶盘并诱导成苗。经卡那霉素筛选，胭脂碱电泳检测及抗菌肽基因探针进行印迹点杂交，确认抗菌肽基因转化桑苗成功，为培育抗青枯病品种打下基础。

柞蚕黄体色大茧型品种沈黄2号的选育及杂交组合的选配

以耐高温干旱柞蚕黄体色品种沈黄1号选育早期分离世代发现的成虫前翅前缘脉呈红褐色的特征性个体为育种素材,采用系统选育的方法,历经6年12代选育出黄体色大茧型新品种沈黄2号,并与现行青黄蚕大茧型品种特大组配成杂交组合沈黄2号×特大。沈黄2号秋季小区饲养千粒茧质量10.10 kg,全茧量11.12 g,茧层率10.79%;在品种比较试验中的千克卵收茧量春季比沈黄1号增产5.49%,秋季增产3.46%;在繁种试验中的单蛾收茧量春季比沈黄1号增产5.89%,秋季增产2.26%。沈黄2号×特大的千克卵收茧量春季比沈黄1号×选大1号增产4.53%,秋季增产8.96%。新品种及其杂交组合对柞蚕核型多角体病毒和柞蚕链球菌的侵染有较强的抵抗能力,属于强健性丰产型品种和杂交组合,其中沈黄2号在春季的增产效果明显,沈黄2号×特大在秋季的增产效果明显,由此实现了对耐高温干旱柞蚕黄体色品种的全茧量遗传改良育种目标。

农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入烟草的研究

柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,对烟草等茄科作物的青枯病假单胞菌(Pseudomonassolanacearum)具有较强的杀菌效果。人工合成抗菌肽基因(122 bp)转入根癌农杆菌(Agrobnctcrium tumefaciena),感染烟草叶盘,诱导成苗。通过对卡那霉素敏感筛选,胭脂碱脱氢酶检定及抗菌肽片段探针杂交,确认抗菌肽基因已转入烟草。现正研究其在烟草中表达及抗青枯病的可能性。

利用RAPD标记分析柞蚕品种资源的亲缘关系

目的从分子水平揭示柞蚕品种资源之间的遗传关系,为柞蚕的育种及种质资源的利用提供依据。方法利用RAPD(randomamplifiedpolymorphicDNA)技术,对来自中国6个主要柞蚕产区的66个品种(系)和2个朝鲜的品种的基因组DNA多态性进行分析。根据扩增结果计算单匹配相似系数,用Neighbor-Joining法构建聚类图。结果筛选出的33个随机引物对68个柞蚕品种(系)共扩增出296条DNA带,其中多态性带269条(90.88%)。品种间的成对遗传距离在0.120～0.324之间,主要集中在0.200～0.300之间,有99.05%的品种对的遗传距离小于0.300。聚类分析表明,供试的68个柞蚕品种(系)聚为6个类群,并表现出按目前所在地域(产地)聚类的特性。结论柞蚕品种资源之间的遗传差异较小,并且遗传聚类与其目前的地理分布有密切相关性。

昆虫抗菌肽在医药上的应用

柞蚕抗菌肽有广谱杀菌作用 ,能抑制乙型肝炎病毒DNA复制 ,又能选择性杀伤肿瘤细胞。属于一类具有明确化学结构及杀菌功能的成份 ,又有新作用靶位及不同于一般抗菌素的作用机制 ,对动物安全、无毒、无副作用。在医药上已制成“肾肝宁”胶囊治疗肾炎及肝炎。以免疫血淋巴干冻粉制成柞蚕素胶囊治疗乙型肝炎 ,已取得临床试验批文。现将进一步把抗菌肽纯化为单体 ,作为治疗耐药性细菌感染的消化道炎症的新药 ,以克服常用抗生素的毒、副作用和易引起病菌抗药性的弱点。

柞蚕蛹综合利用技术

详细介绍了柞蚕蛹综合利用技术的生产工艺及生产工艺的主要特点,分析了目前蚕蛹综合利用存在的问题,并对开发前景进行了展望.

柞蚕抗菌肽对柑桔黄龙病及溃疡病病原菌的杀菌作用

首次报道柞蚕（Ａｎｔｈｅｒａｅａｐｅｒｎｙｉ）抗菌肽对柑桔黄龙病病原类细菌（ＢａｃｔｅｒｉａｌｌｉｋｅＯｒｇａｎｉｓｍ，ＢＬＯ）及溃疡病黄单胞菌（ＸａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓＰＶｃｉｔｒｉＤｙｅ）的杀菌作用，分别在平板培养基上用孔穴法注入５—１０μｌ免疫血淋巴，则出现明显的抑菌圈。用纯化的抗菌肽１０μｇ／ｍｌ处理ＢＬＯ及Ｘ．ｃｉｔｒｉ２０─６０ｍｉｎ，用电镜及激光共焦扫描显微镜观察到病原菌细胞膜的损坏、内容物泄出乃至死亡的过程，对抗菌肽的杀菌机理进行了讨论。

高产稳产优质柞蚕新品种辽蚕582的选育

以蚕茧高产、稳产,全茧量雌雄开差小作为柞蚕新品种的选育目标,选择柞蚕高饲料效率品种8821及其早熟、大型雄性成虫突变个体为亲本材料,采用杂交和系统分离的育种方法,历经10年19代育成了高产、优质,对柞蚕微粒子病有一定耐受性的柞蚕新品种辽蚕582。新品种属青黄蚕系统,二化性、四眠,秋蚕期的千粒茧质量为11.38 kg,全茧量雌雄开差率春、秋蚕季平均为25.37%,比对照品种8821缩小20.42%,平均一粒茧丝长1 219.38 m,解舒率57.98%,生丝回收率为70.13%。新品种感染柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi,Np)的雌蛾产卵孵化的幼虫在室内正常条件下饲养,其结茧率为73.60%,比对照品种青六号提高28.22%;Np对新品种4~5龄幼虫的半数致死剂量(LD50)比对照品种8821高2.82倍,比青六号高7.10倍。新品种在小区品种比较试验及繁种试验中,蚕茧产量分别比对照品种8821增加9.39%、19.20%。综上认为,辽蚕582是丰产、稳产性好,全茧量雌雄开差较小,茧丝加工工艺性状优良并对柞蚕微粒子病感染有一定耐受性的品种,适合在二化性蚕区放养。

柞蚕丝素基因5′端部分序列的克隆及结构分析

利用PCR技术从中国柞蚕品种 74 1中扩增并克隆出柞蚕丝素基因 5′端部分片段 ,它由CAAT盒、TATA盒 (Hognessbox)、primtranscript、丝素蛋白的起始密码子ATG和部分结构基因及内含子组成。通过与天蚕丝素基因的 5′端序列进行比较 ,发现 12 4～ 5 0 6bp、796～ 1194bp、12 16～ 12 98bp同源性高 ,同源率分别为91.6 %、95 %、95 %。将柞蚕丝素基因 5′端的CAAT盒、TATA盒、primtranscript序列与KikuchiY所测家蚕、HuiCC所测家蚕及家蚕P2 5蛋白、天蚕丝素基因相应序列进行比较 ,发现柞蚕与天蚕相应序列的同源率远高于家蚕。从序列中可以看出 :若转录起始点第一个核苷酸标为 +1,则TATA盒位于 - 2 5处 ;CAAT盒位于 - 70处。

柞蚕抗菌肽的分离纯化及杀菌效应

大肠杆菌 (E .coliK12 D3 1)诱导的柞蚕 (Antheraeapernyi)蛹血淋巴 ,经加热处理后 ,进行CM -Sepharose阳离子交换层析 ,FPLCPepRPC反相柱及HPLCHi-PoreC18反相柱层析 ,纯化得到一类抗菌肽 .SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定其相对分子质量约为 2 4 0 0 ,氨基酸组成分析表明其富含赖氨酸、丙氨酸和甘氨酸 ,摩尔分数分别为 18 6 %、15 5 %和 13 6 % ,不含甲硫氨酸、半胱氨酸、酪氨酸和组氨酸 .

九如天宝液含雌性激素样物质的作用研究

以柞蚕雌蛾提取液为主要成分的九如天宝液，经药效学和临床验证表明：腹腔注射和灌胃高、中、低三个剂量均可使丙殴事九素所致的大鼠前列腺增生的体积明显缩小，重量减轻（P值均＜001），高利量腹腔注射与阳性对照药物雌H醇的效果接近；治疗前列腺肥大的总有效率达92．1％，妇女更年期综合症的总有效率达88.0％

柞蚕蛹蛋白的提取及SDS-PAGE分析

以柞蚕蛹为原料,采用索式提取法,以石油醚、丙酮和环己烷为溶剂进行脱脂,然后以1%NaOH和0.9%NaCl乙醇溶液提取脱脂柞蚕蛹中的碱溶和醇溶蛋白,同时采用SDS-PAGE凝胶电泳进行分析。实验发现,碱溶蛋白提取率高于醇溶蛋白。电泳分析结果为,碱溶蛋白8条带为:178、72、64、62、42、30、28、16kDa;醇溶蛋白7条带为:178、64、62、42、30、28、16kDa。

大眼蝉长蝽人工饲料的初步研究

大眼蝉长蝽[Geocoris pallidipennis(Costa)]作为一种捕食性昆虫,是棉花和其他作物害虫的重要捕食性天敌,室内大规模繁殖大眼蝉长蝽对于棉田害虫的控制具有十分重要的意义。本试验以米蛾卵+菜豆叶片饲养作为对照,研究了4种不同的人工饲料对大眼蝉长蝽生长、发育和繁殖的影响。4种人工饲料分别以柞蚕匀浆液、柞蚕脱脂粉、柞蚕全脂粉和柞蚕冷冻干粉为主,并添加蔗糖、玉米油、鸡蛋黄、脱脂奶粉等配制而成。研究结果表明:以匀浆液为主要成分的饲料喂养效果最佳,大眼蝉长蝽成虫获得率最高,达到了76.0%,若虫发育历期为(34.42±0.80)d、产卵前期为(7.80±0.33)d,均显著长于对照;雄虫体重为(1.88±0.05)mg、雌虫体重为(2.90±0.04)mg,单雌产卵量为(46.10±1.85)粒、卵的孵化率为(0.80±0.04),与对照差异不显著。

柞蚕蛹溶菌酶的诱导与提取

本文报道热空气、大肠杆菌K_(12)D_(31)诱导柞蚕蛹(Antheraea pernyi)血淋巴溶菌酶活力提高的最适条件以及从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶.以Sephadex G-50和CM-Sepharose柱层析法从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶,并首次获得柞蚕蛹溶菌酶结晶,溶菌酶制剂比活力达到57353单位/mg蛋白,提高了257倍,总活力回收79.2%.首次应用选择性热变性,等电点沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析、包被甲壳素-纤维素亲和层析等分离技术从柞蚕蛹免疫血淋巴中提取溶菌酶.溶菌酸制剂比活力达25 375单位/mg蛋白,提高了140倍,活力回收51%.用15%、pH4.0聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和3.0-100%.pH6.7-8.9SDS-PAGE鉴定了酶制剂的纯度,并测定了柞蚕蛹溶菌酶的部分氨基酸组成.

柞蚕抗菌肽对水稻白叶枯病菌的抑制作用

柞蚕蛹诱导含抗菌肽的免疫血淋巴,对水稻白叶枯病病原细菌(X(?)(?)pv (?))有明显的抑菌作用,对中国白叶枯病菌Ⅳ群强致病力菌株(RX77)的抑菌圈直径达12mm。电镜观察抗菌肽作用于白叶枯病菌能使其细胞膜破坏,内容物渗出而致死亡。处理10～30min即有效果。将抗菌肽与白叶枯病菌按不同比例混合后接种于水稻秧苗及孕穗期的叶子上,20天后调查病斑平均长度,经方差分析认为抗菌肽对病菌致病力有显著的减弱作用。

叶面肥喷施宝对柞树和柞蚕的增产效应

采用叶面肥喷施宝对柞树做喷施试验，结果表明，柞树上喷施喷施宝对柞树产叶量的增产效果明显，同时对柞蚕茧质也有不同程度的提高。喷施浓度以８０００倍液效果最佳。柞树产叶量的提高主要是通过促进新梢加速生长、叶片数和单片叶重增加而实现的。

天蚕白僵病的菌种鉴定及致病性的研究

天蚕患白僵病后使蚕体色稍暗、食欲减退、行动呆滞、蚕体上出现油渍状病斑,死前排软粪,尸体硬化,最后被白僵菌的白色菌丛所覆盖。引起天蚕白僵病的病原菌是[Beauveria bassiana(Bals.)Vuill.],分生孢子呈球形或卵圆形,球形直径2.5～4.4μm,卵圆形为2.8～4.4×2.5～3.8μm,多数分生孢子堆积在一起呈白粉状。体内的营养菌丝呈丝状无色,具隔膜,分枝生长,直径为2,5～3.3μm。芽生孢子圆筒形,大小为6.3～46.6×1.0～3.9μm。体表的气生菌丝直径为2.5～3.3μm,无色具隔膜,分枝生长。试验证明白僵菌能经接触侵染天蚕、桑蚕和柞蚕虫体引起白僵病,来自3种蛋体上的白僵菌可以互相感染,感染率均为100％。

柞蚕蛹蛋白的提取与分析

报道了以柞蚕蛹为原料提取蛋白质,对提取条件进行了探索.用改进的凯氏定氮方法对岫岩柞蚕蛹的蛋白质含量进行测定,结果表明该法简便、快速、准确可行.

开创中国柞蚕教育 致力柞蚕人才培养——记中国柞蚕教育的先驱者陆明贤教授和冯绳祖教授

本文介绍了中国柞蚕高等教育发展历程中至关重要的两位开创者。陆明贤教授(1927-2016),国际知名昆虫生理学家,江苏省昆山市人,1953年12月获北京农业大学硕士学位,1954年1月到沈阳农学院植物保护系任教,历任植物保护系副主任、蚕学系主任、沈阳农业大学图书馆馆长、辽宁省蚕学会理事长、全国昆虫学名词审定委员会委员、《蚕业科学》编委和沈阳市第九届政协委员。1992年9月离休,享司局级待遇及国务院政府特殊津贴。冯绳祖教授(1930-),国际知名野蚕学家,江苏省苏州市人,1956年毕业于浙江农学院蚕桑专业,同年留校任蚕桑系助教,为筹建蚕学专业于1958年调至沈阳农学院植物保护系工作,历任柞蚕教研室主任、农业部柞蚕研究室主任。陆明贤和冯绳祖两位教授在我国唯一专门为柞蚕产业培养高级人才的蚕学专业创建中起到了至关重要的作用,见证了沈阳农业大学蚕学专业的创建、发展与辉煌。陆明贤教授侧重于柞蚕解剖与生理学等基础科学研究,出版了我国第一部昆虫形态学方面的专著《柞蚕解剖》;冯绳祖教授侧重于柞蚕放养与良种繁育等应用研究,主持编写了我国第一部柞蚕科学领域的农业部规划教材《柞蚕学》,为国家培养了一大批优秀的柞蚕领域优秀人才。