马齿苋酰胺E治疗大鼠溃疡性结肠炎的作用及其机制

目的探讨马齿苋酰胺E(OE)治疗大鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法60只雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、三硝基苯磺酸(TNBS)组、OE低[9 mg/(kg·d)]、中[18 mg/(kg·d)]和高剂量组[36 mg/(kg·d)]。采用TNBS灌肠法建立大鼠UC模型,OE低、中、高剂量组在造模后第3天开始分别按相应剂量灌肠给药,每天1次,连续10 d。正常组和TNBS组灌肠给予等体积0.5%CMC-Na溶液。观察各组大鼠体质量、结肠损伤评分、结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的变化。结果与TNBS组比较,OE低、中、高剂量组大鼠体质量均明显增加(P<0.01)。OE中、高剂量组大鼠的结肠损伤评分、MPO、MDA较TNBS组显著降低(P<0.01)。与TNBS组相比,OE高剂量组大鼠SOD活性升高,NO下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论OE灌肠能够通过减轻肠道炎症反应和氧化应激来改善UC大鼠的结肠损伤。OE是马齿苋治疗UC的有效活性成分。

马齿苋中环二肽成分研究

目的对马齿苋的化学成分进行研究。方法利用柱色谱方法分离化合物,根据核磁共振光谱等数据进行化合物结构鉴定。结果从马齿苋70%乙醇提取物中分离鉴定了3个环二肽成分,分别为环(苯丙氨酸-酪氨酸)(Ⅰ)、环(丙氨酸-亮氨酸)(Ⅴ)和环(丙氨酸-异亮氨酸)(Ⅵ)的混合物。此外,还分离得到马齿苋酰胺E(Ⅱ)、丁二酸(琥珀酸)(Ⅲ)和6,7-二羟基香豆素(Ⅳ)。结论环二肽成分为首次从马齿苋中分离得到。

马齿苋酰胺E干预肾癌的作用机制研究

目的探讨马齿苋酰胺E对人肾癌786-O细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法体外培养786-O细胞,给予马齿苋酰胺E(10、20、40μmol/L)进行干预,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用划痕实验检测细胞迁移能力;采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力;采用AO/EB试剂盒检测细胞凋亡率。建立裸鼠移植瘤肾癌模型,给予马齿苋酰胺E(3、15mg/kg)进行干预,测定各组裸鼠肿瘤质量及体积,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肿瘤组织病理变化;采用Westernblotting法检测786-O细胞和荷瘤裸鼠瘤组织中细胞增殖标志物如Ki67、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclear antigen,PCNA)及凋亡标志物如活化半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、Cleaved Caspase-9及侵袭相关蛋白如基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9及希佩尔-林道抑癌基因(VonHippel-Lindau,VHL)/缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)通路相关蛋白VHL、HIF-1α的表达情况。结果马齿苋酰胺E显著抑制786-O细胞活力(P<0.05、0.01),下调Ki67、PCNA蛋白表达水平(P<0.05、0.01);明显促进786-O细胞凋亡(P<0.05、0.01),上调Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达水平(P<0.05、0.01);有效改善786-O细胞迁移与侵袭能力(P<0.05、0.01),显著降低MMP-2、MMP-9蛋白表达水平(P<0.05、0.01);显著上调VHL蛋白表达水平(P<0.05、0.01)并显著下调HIF-1α蛋白表达水平(P<0.01)。马齿苋酰胺E可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积(P<0.05、0.01),抑制肿瘤细胞增殖并促进其凋亡,显著下调Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9、HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05、0.01),显著上调Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、VHL蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论马齿苋酰胺E体外可有效抑制786-O细胞增殖、迁移与侵袭,促进786-O细胞凋亡,体内可有效降低荷瘤裸鼠肿瘤质量与体积,其作用机制可能与调控VHL/HIF通路及其下游蛋白表达有关。

花椒果皮正丁醇部分化学成分研究

目的对花椒Zanthoxylum bungeanum果皮正丁醇部分化学成分进行研究。方法利用大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备HPLC等方法进行分离纯化,并综合应用HR-ESI-MS、NMR、IR、CD等多种波谱方法确定化合物结构。结果从花椒果皮正丁醇部分分离得到25个化合物,分别鉴定为2α,3β-dihydroxy-3α-vanilloylmethyl-γ-lactone(1)、phellolactone(2)、香草酸(3)、异香草酸(4)、4-hydroxycryptone(5)、ZP-amide A(6)、ZP-amide B(7)、ZP-amide D(8)、马齿苋酰胺E(9)佛手柑内酯(10)、(±)-dorsteniol(11)、苔黑酚葡萄糖苷(12)、phloroacetophenone 4-O-β-D-glucopyranoside(13)、(1R,2R,4S)-trans-2-hydroxy-1,8-cineole-2-O-β-D-glucopyranoside(14)、(3S,6S)-6-ethenyltetrahydro-2,2,6-trimethyl-2H-pyran-3-yl-6-O-β-D-glucopyranoside(15)、trans-linalool-3,6-oxide-7-O-β-D-glucopyranoside(16)、betulabuside A(17)、大豆苷(18)、葛根素(19)、金丝桃苷(20)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(21)、槲皮素-3-O-β-D-鼠李糖苷(22)、扁蓄苷(23)、橙皮苷(24)和tamarixetin 7-rutinoside(25)。结论化合物1为新的γ-内酯类化合物,命名为异花椒戊内酯(isophellolactone),化合物1、2、9、11、13、14、17~19和22、23系首次从花椒属植物中分离得到,化合物5、10、15和24系首次从花椒中分离得到。