葡萄籽的开发与利用

葡萄籽含有 14 %～ 17%的油脂 ,还含有 3.9%的原花青素。为了合理利用葡萄籽资源 ,采用仁壳分离的方法 ,仁用于提取葡萄籽油 ,壳用于提取原花青素。同时 ,还对葡萄籽的国内外研究利用情况 ,市场应用情况和前景作了客观的分析论述 ,以期促进葡萄籽资源的合理利用。

葡萄籽中低聚原花色素的性能研究

从葡萄籽中提取有效成分低聚原花色素(OPC)。研究了提取产物的溶解性、紫外吸收光谱、热稳定性、光稳定性和抗氧化性。结果表明,低聚原花色素水溶性较好,最大吸收波长为278nm,当T≤60℃时,对热稳定,具有一定的耐光性。OPC对猪油具有较强的抗氧化作用,且存在剂量效应关系。相同添加量时,其抗氧化能力优于VC、VE;三者混合使用时,VC、VE对OPC的抗氧化性均具有协同增效作用。

葡萄籽提取物的质量评价

概述了葡萄籽提取物常规品质的各项指标 。

葡萄籽中低聚原花青素提取条件研究

研究了葡萄籽中低聚原花青素的提取条件,考察了提取温度,时间,磷酸浓度对提取液总酚含量的影响,并对提取物的溶解性作了分析。结果表明:3%磷酸的乙酸乙酯-水溶液作提取剂,室温下搅拌提取10h的条件最适,所得产物颜色淡,水溶性好,其低聚原花青素提取率大于2.0%,总酚含量大于70%。

脱脂葡萄籽中低聚原花青素的提取

研究了葡萄籽中低聚原花青素的提取 .采用石油醚脱脂的干葡萄籽为原料 ,以乙醇为溶剂热提取后 ,通过调节pH除去蛋白质 ,再用乙酸乙酯萃取分离粗提物 ,最后用石油醚沉淀纯化产品 .

葡萄籽中低聚原花青素研究进展

低聚原花青素作为一种强力抗氧化剂,已经引起人们极大的关注。综述了从葡萄籽中提取、纯化、分析低聚原花青素的研究进展概况。

葡萄籽低聚原花青素提取及性质分析

考察了提取温度、时间、磷酸体积分数对提取液低聚原花青素质量浓度的影响,并对提取物的理化性质作了分析。结果表明:φ(水)=8%、φ(磷酸)=3%的乙酸乙酯溶液作提取剂,室温下搅拌提取10h的条件最适,所得产物颜色淡,水溶性好,聚合度值为3 8±0 2,其低聚原花青素质量分数大于70%,提取率达2 2%。

葡萄籽中低聚原花青素的研制

研究了从葡萄籽中提取低聚花青素 (OPC’s)。采用石油醚脱脂的干葡萄籽为原料 ,以乙醇为溶剂热提取后 ,通过调节pH除去杂质性蛋白 ,再用乙酸乙酯萃取分离粗提物 ,石油醚沉淀精制产品 ,最后经过聚酰胺柱层析得到纯度较高抗氧化性能优良的OPC’s产品。同时对不同层次产品的抗氧化性进行了考察 ,二聚体的抗氧化性最高。

低聚葡萄籽原花青素对异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大的影响

目的:在原代培养的新生大鼠心肌细胞上观察低聚葡萄籽原花青素(oligomeric grape seed proanthocyanidins,GSP)对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)诱导心肌细胞肥大的影响。方法:采用SD大鼠乳鼠原代心肌细胞培养法,BCA法测定心肌细胞总蛋白含量;流式细胞仪检测心肌细胞内氧自由基(reactive oxygen species,ROS)含量;比色法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:1×10-5 mol/L Iso能明显诱导心肌细胞肥大,GSP可剂量依赖性地抑制Iso诱导心肌细胞肥大,抑制细胞内ROS的生成,降低MDA含量、提高SOD活性。结论:GSP对Iso诱导的心肌细胞肥大具有明显的逆转作用,其机制至少部分与抑制ROS生成、降低氧化应激水平有关。

葡萄籽原花青素对DOCA-盐高血压小鼠心室重构的影响

目的研究葡萄籽原花青素(GSP)对DOCA-盐型高血压小鼠心室重构保护作用并初步探讨其机制。方法皮下注射去氧皮质酮(DOCA)同时予高盐饮水形成DOCA-盐型高血压小鼠模型。实验分为对照组、模型组和GSP 130 mg.kg-1组。计算小鼠心脏重量指数以及肾脏重量指数,HE染色和V-G染色观察心肌病理形态学改变,比色法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及心肌羟脯氨酸(Hyp)含量。结果与空白对照组相比,DOCA-盐型高血压模型组小鼠心重指数、肾重指数、心肌细胞横截面积(CSA)、心肌胶原纤维明显升高,血清MDA含量升高,SOD活性降低,心肌组织羟脯氨酸含量增加。与模型组相比,GSP 130 mg.kg-1组小鼠心重指数、肾重指数、CSA、心肌胶原沉积明显降低,血清MDA含量降低,SOD活性增加,心肌组织Hyp含量减少。结论 GSP能明显改善DOCA-高盐高血压小鼠心室重构,其机制可能与抗氧化应激有关。

薄层色谱法分离葡萄籽中的低聚原花青素

通过对不同溶剂展开体系的选取 ,确定低聚原花青素分离的薄层色谱展开体系为v(甲苯 )∶v(丙酮 )∶v(乙酸 ) =3∶3∶1.从原花青素中分离制备得到儿茶素的单体、二聚体、三聚体 ,运用高效液相色谱对其进行了分析验证 .

葡萄籽中低聚原花青素的提取研究

以葡萄酒生产加工的副产品——葡萄籽为原料提取原花青素,并对影响原花青素提取率的因素,即提取溶剂的选择、提取温度、提取时间及料液比等进行考察,并通过正交试验确定最适的提取条件为以70%丙酮作为提取剂,提取温度为60℃,提取料液比为1:8,提取时间为3h。提取物中原花青素含量可达7.88%。

葡萄籽中低聚原花青素提取工艺初探

通过对各影响因素的实验,在中心组合实验基础上,运用响应面分析法确定出提取低聚原花青素的最优工艺条件:料液比1:7,提取温度48.6℃,提取时间30min,乙醇浓度61.4%,提取3次。在此条件下提取率达90%以上。

示波极谱法测定葡萄籽提取物中原花青素

提出了测定葡萄籽提取物中原花青素的电化学分析新方法。在碱性硼砂底液中,原花青素与Zn(Ⅱ)在(-1.02±0.02V)(vs.SCE)电位处产生灵敏络合吸附波。其峰电流IP与原花青素在40～200mg·L-1范围内呈良好的线性关系,方法的检出限为25mg·L-1。该方法已用于保健食品中原花青素的含量测定,重现性好,结果满意。

低聚葡萄籽原花青素联合顺铂对人肺腺癌细胞A549凋亡的影响

目的:研究低聚葡萄籽原花青素(oligomeric?grape?seed?proanthocyanidins,O-GSP)联合顺铂对人肺腺癌细胞A549抗氧化、细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法:细胞分为对照组、顺铂(5 mg/L)组、O-GSP(4 mg/L)组、O-GSP(4 mg/L)+顺铂(5 mg/L)组。硫代巴比妥酸法测定细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide?dismutase,SOD)活力;流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive?oxygen?species,ROS)含量和细胞凋亡率;Western?blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和caspase-3的表达。结果:顺铂导致A549细胞MDA、ROS含量显著升高(P<0.05),GSH含量和SOD活力显著降低(P<0.05),O-GSP对细胞内MDA含量、GSH含量、SOD活力无显著影响(P>0.05)。O-GSP+顺铂组相对于顺铂组,细胞内MDA、GSH、SOD水平无显著性变化(P>0.05),而ROS含量明显降低(P<0.05)。顺铂、O-GSP以及两者联用均能显著促进细胞凋亡(P<0.05),并且能够显著提高Bax及Bax/Bcl-2值,顺铂和O-GSP+顺铂可显著降低Bcl-2的表达(P<0.05),同时激活caspase-3。结论:O-GSP联合顺铂可促进A549细胞的凋亡,其机制与O-GSP的抗氧化作用没有显著联系,而是与两者可共同调节凋亡相关蛋白基因表达有关。

低聚葡萄籽原花青素联合顺铂对A549细胞增殖及细胞周期的影响

目的:探讨低聚葡萄籽原花青素(oligomer grape seed proanthocyanidins,O-GSP)联合顺铂(cisdichlorodiamineplatinum(Ⅱ),DDP)对A549细胞增殖、细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响。方法:体外培养A549细胞,四甲基偶氮唑蓝法检测DDP和O-GSP单独及联合用药对A549细胞存活率的影响;流式细胞仪检测O-GSP联合DDP对A549细胞周期的影响;Western Blot检测促细胞周期相关蛋白CDK 4、Cyclin D1和p-Rb的表达。结果:DDP(≥5 mg/L)和O-GSP(≥16 mg/L)单独用药均对A549细胞增殖有抑制作用,且两者同时作用对细胞增殖抑制具有联合作用。5 mg/L DDP单独用药可以于S期阻滞A549细胞,4 mg/L O-GSP单独用药可以于G_0/G_1期阻滞A549细胞,两者联合可显著降低细胞周期调控蛋白CDK 4、Cyclin D1和p-Rb的表达(P<0.05)。结论:O-GSP可以联合DDP抑制A549细胞增殖,且这种联合作用与Cyclin D1-CDK 4-Rb通路介导的细胞周期调控有关。

低聚体葡萄籽原花青素对顺铂损伤HEK293细胞及抗癌活性的影响

目的:探讨低聚体葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins extract,GSPE)及其结构单元儿茶素(catechin,C)对顺铂(cis-dichlorodiamineplatinum(II),DDP)损伤HEK293人胚肾细胞的保护作用以及对DDP抗A549人肺腺癌细胞活性的影响。方法:体外培养HEK293细胞和A549细胞,以DDP建立损伤模型,分别用不同质量浓度的低聚体GSPE和儿茶素对细胞进行预处理,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞抑制率和存活率。结果:当低聚体GSPE质量浓度为16 mg/L时,对DDP诱导的HEK293细胞损伤的保护作用最佳,与DDP损伤组相比有显著差异(P<0.05),并且在达到此质量浓度时可显著增强DDP对A549细胞的损伤效果(P<0.05)。相同条件下儿茶素对DDP诱导的HEK293细胞损伤无显著影响(P>0.05)。结论:体外培养条件下,一定质量浓度的低聚体GSPE对DDP诱导的HEK293细胞损伤具有一定的保护作用,同时能增强DDP对A549细胞的杀伤作用。儿茶素对DDP诱导HEK293细胞损伤的保护作用不明显。

葡萄籽寡聚体原花青素对大鼠酒精性肝损伤及脑功能障碍的保护作用

目的:研究葡萄籽寡聚体原花青素(oligomeric proanthocyanidins,OPC)对大鼠酒精性肝损伤及脑功能障碍的保护作用.方法:将31只SD大鼠随机分为4组.A组为生理盐水组,B组为OPC组,C组为OPC+酒精组及D组为酒精组.2次/d灌胃法,连续灌胃23d.观察动物醉酒潜伏期,血浆天门冬氨酸氨基转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)含量以及肝脏和脑组织病理组织学改变.结果:(1)AST和ALT在A、B及C组之间比较,差别都没有统计学意义(P>0.05);D组与其他3组比较,AST和ALT都显著升高,差别有统计学意义(P<0.001);(2)A组及B组肝脏组织均未见明显病理改变.C组及D组大鼠肝脏损伤发生率分别为57.1%及100%;肝组织损伤面积分别为3.6%±3.2%及63%±28%,差异有统计学意义(P<0.001);(3)C组比D组大鼠平均醉酒潜伏期时间明显延长(P<0.0001);(4)4组大鼠脑组织在光镜下均未见明显病理改变.结论:葡萄籽寡聚体原花青素对大鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用,还有抗醉酒作用.

葡萄籽原花青素对H_2O_2损伤PC12细胞的保护作用

目的:检测葡萄籽原花青素对H2O2引起PC12细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法:用盐酸-香草醛法检测葡萄籽原花青素中低聚花青素的含量,并用DPPH(1,1-d iphenyl-2-p icrylhydrazyl)法检测其对自由基的清除能力,以PC12细胞为实验对象,进一步检测葡萄籽原花青素对氧化损伤的PC12细胞的保护效应。结果:低聚原花青素含量为45.16%的葡萄籽原花青素在浓度为64μg/m l时对DPPH自由基的清除率为76.69%,对H2O2损伤的PC12细胞在浓度为100μg/m l时保护率为83.1%,同时可使细胞内超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽(GSH)活性增加,细胞的脂质过氧化水平降低。结论:葡萄籽原花青素是通过清除自由基和提高细胞内源抗氧化酶来保护PC12细胞免受氧化损伤。

低聚葡萄籽原花青素对顺铂所致人胚肾细胞线粒体损伤的保护作用

目的:探究低聚葡萄籽原花青素(oligomeric grape seed proanthocyanidins,O-GSP)对顺铂(cis-diamminedichloroplatinum,CDDP)导致的人胚肾细胞HEK293中线粒体损伤的保护作用及其作用机制。方法:通过试剂盒检测O-GSP、CDDP及O-GSP+CDDP处理后细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reaction oxygen species,ROS)含量、细胞质内糖代谢酶(己糖激酶和乳酸脱氢酶)活力和线粒体糖代谢酶(苹果酸脱氢酶)活力变化情况,并采用流式细胞术对各组细胞ATP含量、线粒体膜电位变化以及细胞凋亡率进行检测。结果:O-GSP预处理极显著改善了CDDP引起的细胞内MDA含量升高,还原型GSH、ROS、ATP含量及线粒体膜电位降低和糖代谢异常(P<0.01),从而减轻了CDDP诱发的线粒体损伤,对HEK293细胞凋亡有极显著的缓解作用(P<0.01)。结论:O-GSP对CDDP所致HEK293细胞线粒体损伤具有拮抗作用,并且该作用与O-GSP的抗氧化活性有关。