Prospects for nucleic acid-based therapeutics against hepatitis C virus

In this review,we discuss recent advances in nucleic acid-based therapeutic technologies that target hepatitis C virus(HCV)infection.Because the HCV genome is present exclusively in RNA form during replication,various nucleic acid-based therapeutic approaches targeting the HCV genome,such as ribozymes,aptamers,siRNAs,and antisense oligonucleotides,have been suggested as potential tools against HCV.Nucleic acids are potentially immunogenic and typically require a delivery tool to be utilized as therapeutics.These limitations have hampered the clinical development of nucleic acid-based therapeutics.However,despite these limitations,nucleic acid-based therapeutics has clinical value due to their great specificity,easy and large-scale synthesis with chemical methods,and pharmaceutical flexibility.Moreover,nucleic acid therapeutics are expected to broaden the range of targetable molecules essential for the HCV replication cycle,and therefore they may prove to be more effective than existing therapeutics,such as interferon-αand ribavirin combination therapy.This review focuses on the current status and future prospects of ribozymes,aptamers,siRNAs,and antisense oligonucleotides as therapeutic reagents against HCV.

反义BCR/ABL寡核苷酸体外抑制K562细胞的研究

目的：探讨反义ＢＣＲ和ＡＢＬ融合基因（ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因）寡核苷酸体外抑制Ｋ５６２细胞的作用及机制。方法：采用Ｋ５６２细胞培养，观察反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸体外对Ｋ５６２细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果：经反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ３ａ２（ＡＳｂ３ａ２）处理后培养８ｄ的Ｋ５６２克隆抑制率达６０６９％，液体培养中细胞数从２４ｈ开始较对照组减少，细胞存活率从８ｈ开始即较对照组明显下降，ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ２ａ２（ＡＳｂ２ａ２）及无义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞数和存活率无明显影响；３种寡核苷酸对ＨＬ６０细胞数和存活率也无影响。结论：ＡＳｂ３ａ２对Ｋ５６２细胞有序列特异性的抑制作用。ＡＳｂ３ａ２的这种抑制作用可能在于它诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。

端粒酶反义寡核苷酸对膀胱癌治疗作用的体外实验

目的 :探讨端粒酶反义核苷酸对膀胱癌的治疗作用。方法 :用 TRAP-银染方法检测 2 5例膀胱癌组织和 4例癌旁组织中端粒酶活性的表达。以端粒酶 RNA模板区为靶点 ,不同剂量的序列为 TAGGGTTAGACAA的硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸 (PS- ASON )作为实验组 (A、 B、 C) ,以硫代磷酸修饰 1 3个核苷酸的随机引物作为对照组 (D) ,仅加入培养液作为空白对照组 (E) ,与人膀胱癌细胞株 BIU87细胞共同孵育 1～ 30 d,计细胞数 ,光镜及电镜观察 ,DNA凝胶电泳检测、流式细胞仪测定和分析细胞的凋亡和坏死。结果 :2 5例膀胱癌组织中 ,2 4例(96 % )表达端粒酶活性 ,4例癌旁组织无端粒酶活性表达。与随机引物及空白对照组比较 ,实验组的 ASON能明显减少细胞增殖数目 ,实验组细胞在第 2、 8天及 8天后出现较明显的凋亡峰和 DNA梯状电泳带 ,并出现退化、老化、凋亡和坏死的形态学变化 ,凋亡率明显增高 (P<0 .0 0 1 ) ,并显示剂量的依赖性 (P<0 .0 1 )。结论 :以端粒酶 RNA模板区为靶点的反义寡核苷酸引起膀胱癌 BIU87细胞增殖抑制 ,退化、老化、凋亡和坏死 。

Bcl-xL反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物敏感性的影响

目的 观察 Bcl- x L 反义寡核苷酸 (ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物顺铂敏感性的影响。方法 建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型 ,分为对照组、ASODN治疗组、顺铂 (DDP)治疗组、ASODN+DDP联合治疗组 ,观察裸鼠瘤体变化及组织形态学改变。结果 单独应用 ASODN和 DDP治疗组的抑瘤率分别为 14 .2 %和 30 .9% ,而在相同条件下 ,联合用药组效果最明显 ,抑瘤率为 5 2 .2 % ,较 ASODN、DDP单独应用差异有显著性。结论 ASODN与 DDP联合化疗有协同作用 ,ASODN可以提高肿瘤细胞对顺铂的敏感性 。

吗啉代寡核苷酸的应用研究进展

磷酰二胺吗啡啉寡核苷酸(吗啉代寡核苷酸,PMO)是一类功能强大的合成寡核苷酸类似物,在核酸药物发展史上属于第3代反义寡核苷酸。PMO的电中性吗啡啉结构使其具有结合亲和性高和抗酶解稳定性强的特点,通过序列特异性结合靶RNA,达到抑制RNA翻译和干扰RNA加工的效果,已成功应用于核酸药物的研发和基因功能的研究。本文简要综述了PMO作为治疗药物和RNA研究工具的进展、挑战和前景,及其进一步的结构修饰优化。

心血管病迎来生物技术药治疗的新时代

近年来,生物技术药研发涌现于心血管病治疗,包括多肽、单克隆抗体、反义寡核苷酸、小干扰核糖核酸、基因编辑疗法和治疗性疫苗。这些信息令人鼓舞,部分药物已经批准临床应用,部分药物仍在进行临床研究,有望成为治疗心血管病的生物技术药,提高心血管病患者治疗的有效性和依从性。

c—fos反义寡核苷酸对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用

目的评价c—fos反义寡核苷酸（AS-ON）对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的抑制作用。方法将9只兔（18只眼）分为c—fos—AS-ON治疗组和对照组（每组9只眼）。c—fos—AS—ON治疗组以平衡盐溶液（BSS）配制2pgc—fos—AS—ON和10μg脂质体的混合液0．1ml、对照组以0．1mlBSS分别与2．5×10^5个／ml人视网膜色素上皮（RPE）细胞稀释液混合后同时注入玻璃体腔，观察两组在玻璃体腔注射后第7、14、21、28天PVR发生的程度。结果随着观察时间的延长，两组PVR程度逐渐加重。第7天两组PVR程度无统计学差异（P=0．05），第14、21、28天，c—fos—AS-ON治疗组的PVR程度较对照组轻，差异有统计学意义（P〈0．05）；第28天，c—fos—AS—ON治疗组牵拉性视网膜脱离发生率为25．0％，对照组为62．5％。结论c—fos—AS—ON对兔实验性PVR的发生有一定的抑制作用。