寡肽转运体PepT1的遗传药理学研究进展

质子依赖性寡肤转运体1(oligopeptide transporter 1,PepT1),广泛分布于人和动物体内各组织和器官,其主要作用是转运蛋白质消化后的二肤和三肤进入细胞内。研究发现特异性的靶向PepT1药物以其独特的优点,已经应用于临床上多种疾病的治疗此外,PepT1的功能及其基因多态性可能影响肠道疾病与癌症的发生。本文对PepT1的结构、生理功能、基因多态性及临床应用现状等方面进行综述,可为进行深入遗传药理学和转化医学的研究奠定基础。

寡肽转运蛋白(PepT1)的研究进展

寡肽转运蛋白1(oligopeptide transporter 1,PepT1;solute carrier family 15 member 1,SLC15A1)是一种主要存在于小肠上皮细胞的质子依赖型转运蛋白质,转运底物主要为蛋白质水解产物中的二肽、三肽以及与二肽、三肽结构类似的一些化合物。PepT1的研究有助于促进药物生物利用度的提高,对于肿瘤的治疗也具有十分重要的意义。现主要从PepT1的晶体结构、靶向前药、转运底物、相互作用的蛋白质及PepT1的疾病应答机制等几方面展开综述。

寡肽转运蛋白(PepT1)生物学特性及活性调控研究进展

作为蛋白质主要的消化产物,小肽的吸收不仅在氨基酸消化、吸收和代谢中起到至关重要的作用,对于维持反刍动物的生长、发育也具有重要意义。目前寡肽转运蛋白(PepT1)被预测出有12个跨膜结构域,Fei等对其跨膜结构域进行了初步的研究。PepT1所具有的无从差别转运小肽、在特定的PH条件下电现象等特点也使得其成为学者们研究的热点。此外,底物因素、生理生物因素以及营养因素等对于PepT1活性调控的影响也是人们研究的热点。本文基于对PepT1生物学特性及活性调控研究进展的论述,对PepT1的研究前景进行了展望,以期为促进PepT1的进一步研究提供进一步的参考。

靶向肠道寡肽转运体1(PepT1)前药的研究进展

目的对近年来靶向寡肽转运体1(oligopeptide transporter 1,PepT1)的各类前药及相应特点加以介绍,进而概括总结靶向肠道PepT1前药的进展情况。方法参考近年来国内外文献28篇对靶向PepT1的各类前药进行了综述。结果寡肽转运体目前是药物转运体中研究最深入、应用最广泛的转运体。对于很多口服吸收差的药物,以肠道转运体PepT1为靶点,按照底物结构特征的要求对药物分子进行结构修饰,可大大提高药物的跨膜吸收,改善其体内药动学性质,进而提高生物利用度。结论靶向PepT1的前药策略能够有效提高难吸收性药物的生物利用度。

驴小肽转运载体1基因的克隆、序列分析及组织表达研究

小肽转运载体1(PepT1)在动物肠道小肽的摄取过程中发挥重要作用。本试验旨在研究驴(Equus asinus)PepT1(ePepT1)基因的分子克隆、序列分析和组织表达。提取驴肠道组织总RNA,PCR克隆ePepT1基因片段,测序验证并进行序列分析;采用实时荧光定量PCR(real⁃time qPCR)方法分别测定驴肾脏、脾脏、心脏、肝脏、肺脏、胃、十二指肠、空肠和回肠组织中ePepT1基因的相对表达量。结果表明:ePepT1开放阅读框为2124 bp,共编码707个氨基酸残基。蛋白质理化性质预测显示,ePepT1蛋白分子质量为78.6 ku,等电点为7.52,具有11个跨膜区(TMD),且TMD 9和TMD 10之间有1个大的细胞外环;ePepT1蛋白有5个胞外N-糖基化位点,5个胞外蛋白激酶C(PKC)作用位点和3个蛋白激酶A(PKA)作用位点。组织分布研究发现,ePepT1基因在各组织均有表达,但在肠道(十二指肠、空肠和回肠)中相对表达量最高。综上所述,本研究首次克隆了ePepT1基因,研究了其组织表达规律,为进一步研究驴肠道小肽吸收提供了基础。

甲状腺素、胰高血糖素和表皮生长因子对肉鸡小肠Ⅰ型肽转运载体mRNA表达量的影响

本试旨在研究甲状腺素、胰高血糖素(PG)和表皮生长因子(EGF)对肉鸡小肠Ⅰ型肽转运载体(PepT1)mRNA表达量的影响。选择体重无差异的25日龄雄性肉仔鸡30只,分为5组,每组6只鸡,分别接受不同激素处理,每天1次,连续5d。对照组、EGF组、PG组分别皮下注射蒸馏水0.20mL/kg、EGF0.03m g/kg、PG0.10m g/kg;T4组、TH组分别灌服左旋甲状腺素钠(T4)330.00μg/kg、甲巯咪唑25.00m g/kg,同时皮下注射蒸馏水0.20mL/kg。最后1次处理12h后,测定血清人表皮生长因子(h-EGF)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、PG含量以及十二指肠、空肠、回肠PepT1mRNA表达量。结果表明:皮下注射EGF和PG对血清中相应含量无显著影响(P>0.05);口服T4、甲巯咪唑分别显著提高、显著降低血清T3含量(P<0.05)。皮下注射PG(P<0.05)和口服T4(P<0.01)均显著提高了鸡小肠PepT1mRNA表达量,皮下注射EGF和口服甲巯咪唑有降低PepT1mRNA表达量的趋势,但均未达到显著水平(P>0.05)。结果提示,甲状腺素和PG在肉鸡小肽的吸收中发挥着重要调控作用。

寡肽转运蛋白1在肿瘤靶向治疗研究中的应用进展

寡肽转运蛋白1(PEPT1)是一种具有转运小分子肽功能的载体蛋白。PEPT1在多种肿瘤中表达,并能靶向转运小肽类物质进入肿瘤细胞。以PEPT1为载体可特异性地将抗肿瘤药物递送至肿瘤细胞,减少药物对正常组织的毒副作用,最大程度地发挥药效。此外PEPT1还可介导小肽类肿瘤放射性示踪剂和肿瘤光动力治疗分子的转运,为肿瘤诊断和光动力治疗提供了新思路。从PEPT1在肿瘤中的表达,PEPT1介导抗肿瘤药物、肿瘤放射性示踪剂和肿瘤光动力治疗分子的靶向递送等几个方面综述了近年来PEPT1在肿瘤靶向治疗研究中的应用进展,并对其应用前景进行展望。

过表达驴小肽转运载体1 CHO细胞的构建

为了研究驴小肽转运载体1(oligopeptide transporter1,PepT1)的转运功能,试验取驴肝脏组织,对PepT1基因进行克隆构建了驴PepT1的表达载体pcDNA3.1-PepT1,并将其转染至中华仓鼠卵巢(CHO)细胞中,采用Western-blot方法检测转染效率,然后以未转染的CHO细胞作对照进一步检测转染后CHO细胞对β-丙氨酸-赖氨酸-N-7-氨基-4-甲基香豆素-3-乙酸(β-Ala-Lys-AMCA)的摄取情况。结果表明:成功扩增出驴PepT1基因CDS序列,并构建了表达载体pcDNA3.1-PepT1;转染pcDNA3.1-PepT124 h后,在CHO细胞中检测到过表达的驴PepT1蛋白,且过表达驴PepT1蛋白的CHO细胞对β-Ala-Lys-AMCA的摄取量显著高于对照组(P<0.05)。说明成功构建了pcDNA3.1-PepT1表达载体并转染至CHO细胞中,实现了驴PepT1蛋白的瞬时过表达。