Opiorphin在肛肠手术模型大鼠针刺镇痛调节效应中的作用

[目的]在肛肠手术切口痛模型大鼠中,通过观察各组大鼠的热痛反应时间、血清阿片类物质(opiorphin,OPI)及脑啡肽的表达水平,探索OPI蛋白的镇痛效应机制及其在穴位电针镇痛效应中的调节作用。[方法]将大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针组、OPI组、纳洛酮组、纳洛酮+电针组,除空白对照组外,其余5组均建立手术切口痛模型,实施相关干预,于1h后观察各模型大鼠的热痛反应时间,观察结束后将空白对照组、模型组、电针组及OPI组大鼠麻醉猝死后取血清,并用ELISA检测大鼠血清OPI蛋白及脑啡肽的表达水平。[结果]各组大鼠的热痛反应时间在组间比较中差异具有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠的热痛反应时间明显短于空白对照组大鼠,差异有统计学意义(P<0.001)。模型组、纳洛酮组和纳洛酮+电针组的热痛反应时间明显短于电针组和OPI组大鼠,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001);模型组大鼠的血清脑啡肽表达较空白对照组显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05),电针组血清OPI蛋白较模型组显著增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]电针组及OPI组大鼠的热痛反应时间明显延长,但其镇痛效应可被纳洛酮所阻断,电针干预可能通过促进血清OPI蛋白释放,进而通过阿片受体参与及介导电针对手术切口痛大鼠的镇痛效应,血清脑啡肽在其中的作用有待更进一步的研究确认。

Opiorphin溶液构象分析

目的研究opiorphin在氟代二甲基亚砜(DMSO-d6)溶液中的构象。方法以固相多肽合成方法合成opiorphin,用2D NMR技术研究opiorphin在DMSO-d6溶液中的构象,记录COSY、TOCSY和NOESY共振谱用于构象分析。结果利用2D TOCSY确定了opiorphin多肽氨基酸残基的自旋系统,通过解析NOESY谱中的NOE相关点,完成了对其序列中主链和侧链质子的全部归属,并分析得到肽链的~1H的化学位移和质子间的NOE。三维结构计算表明opiorphin在DMSO-d6中为规划则卷曲形式存在。结论柔性无规则卷曲的柔性特征可能是opiorphin与其受体结合前的最佳状态。