2型糖尿病患者血清中Opticin蛋白的表达与视网膜病变的相关性研究

目的探究2型糖尿病患者血清中Opticin蛋白的表达与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法选择2015年1月至2017年1月济宁市第一人民医院收治的2型糖尿病患者120例作为研究对象,依据散瞳后直接眼镜、眼底照相或眼底荧光造影检查结果将患者分为糖尿病无DR(NDR)组、非增殖期DR(NPDR)组、增殖期DR(PDR)组,每组40例。比较3组患者高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平,并采用免疫组织化学法检测患者血清中Opticin蛋白表达情况,以及1年后3组患者视力变化。结果 3组患者HDL-C、LDL-C、TC、TG水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);3组患者血清肌酐(SCr)、尿素氮(UN)、肾小球滤过率估计值(eGFR)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PDR组患者Scr、UN水平最低,eGFR水平最高。PDR组患者血清Opticin蛋白水平均明显低于NDR组、NPDR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清Opticin蛋白水平与DR、SCr、UN呈负相关(r=-0.311、-0.357、-0.029;P<0.05);与eGFR呈正相关(r=0.302,P<0.05)。血清Opticin蛋白、eGFR水平降低为DR的独立危险因素(P<0.05)。随访1年PDR组患者视力下降率均高于NDR组、NPDR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Opticin蛋白在糖尿病患者血清中表达水平较低,且随视网膜病变程度加重而逐渐降低,为DR的独立危险因素,Opticin蛋白与患者预后有关,可成为评估DR患者预后指标之一。

牛眼眼科新糖蛋白opticin研究

目的:制备opticin特异性抗体并探讨opticin在牛眼中的分布。方法:将合成的多肽链免疫兔以获得OPT-C抗体,运用该抗体从玻璃体提取物中检测opticin,用免疫组织化学方法检测opticin在牛眼中的分布。结果:牛眼玻璃体提取物Western blot在40-50 kU可看到2个清晰可辨的分离的条带。牛眼免疫组织化学发现opticin存在于牛眼视网膜、玻璃体和睫状体无色素上皮中。结论:Opticin存在于睫状体中,支持opticin可能由睫状体无色素上皮细胞分泌这一推测。Opticin与玻璃体胶原纤维相连,可能与玻璃体结构的稳定有关。

Regulation of opticin on bioactivity of retinal vascular endothelial cells cultured in collagen

AIM:To investigate the effects of collagen and opticin on the bioactivity of human retinal vascular endothelial cells(hR VECs),and explore its regulations by integrins and RhoA/ROCK1 signal pathway.METHODS:h RVECs were cultured in collagen and treated by opticin,and cell-based bioactivity assays of cell proliferation,migration,and adhesion were performed.The expression of integrinα2,integrinβ1,Rho A and ROCK1 were examined with real-time PCR and Western blotting.RESULTS:Collagen could promote cell viability of proliferation and migration(all P<0.05),and enhance the m RNA expression of integrinα2,integrinβ1,Rho A and ROCK1(all P<0.05).Opticin could inhibit proliferation and migration ability of hR VECs cultured in collagen,and reduce the mR NA expression of integrinα2,integrinβ1,RhoA and ROCK1(all P<0.05).CONCLUSION:Collagen and opticin can affect bioactivity of hR VECs,which may be regulated byα2-,β1-integrins and RhoA/ROCK1 signal pathway.

眼科新糖蛋白opticin研究

Opticin是2000年发现的一种新糖蛋白,属于富含亮氨酸的重复单位(LRR)蛋白多糖家族第三类,在溶液中以一个稳定的约90KDa的二聚体存在。Opticin主要存在于眼玻璃体中,其mRNA在多个组织中被检测到。Opticin有维持玻璃体稳定、维持玻璃体与视网膜之间连接和抑制血管生成等作用。本文综述了opticin的发现、分子结构、基因、组织分布和功能等。

糖尿病小鼠玻璃体视网膜中Opticin的表达

目的:观察opticin在1型、2型糖尿病小鼠及正常小鼠玻璃体视网膜mRNA和蛋白表达的变化。方法:50只雄性小鼠随机分为柠檬酸钠缓冲液对照组(A)10只,链脲佐菌素诱导1型糖尿病组(B)10只,2型糖尿病组30只,并将其随机分为1,2,3月组(C、D、E),各10只。于1,2,3月后处死2型糖尿病组小鼠,3月后处死1型糖尿病组小鼠和柠檬酸钠缓冲液对照组,取玻璃体视网膜组织,保存于液氮中。实时聚合酶链反应检测玻璃体视网膜中opticin mRNA表达,Western-blot检测opticin蛋白表达。结果:1型糖尿病组玻璃体视网膜的opticinmRNA表达量是正常组玻璃体视网的68%,P<0.01;2型糖尿病1,2,3月组玻璃体视网膜的opticin mRNA表达量分别是正常组玻璃体视网的37%,36%,27%,P<0.01;但1,2,3月组之间的差异无统计学意义,P>0.05;1型、2型糖尿病组玻璃体视网膜的opticin蛋白表达量较正常小鼠玻璃体视网膜显著下降,P<0.01。2型糖尿病的2月、3月组小鼠玻璃体视网膜mRNA和蛋白表达均低于1月组小鼠。结论:1型、2型糖尿病小鼠玻璃体视网膜中opticin的mRNA和蛋白表达量较正常小鼠显著减少,2型糖尿病组小鼠玻璃体视网膜mRNA和opticin蛋白表达随时间延长逐渐降低。说明opticin在糖尿病视网膜病变的发生机制中可能起着重要作用。

雌二醇玻璃体腔注射缓解大鼠玻璃体后脱离的研究

目的探讨雌二醇缓解玻璃体后脱离（posterior vitreous detachment,PVD）的有效性和安全性。方法Sprague-Dawley雄性大鼠48只,随机分为A（正常对照组）、B（平衡盐液2μL）、C（纤溶酶3μg/2μL）、D（纤溶酶3μg＋雌二醇10-（-6）mol/L,2μL）组,每组12只,玻璃体腔内注射7 d后,各组大鼠用视觉电生理（flash electroretinography,F-ERG）、病理切片、免疫组织荧光法、蛋白质印迹法来观察和评价视网膜结构、玻璃体后脱离的情况以及各组玻璃体视网膜opticin蛋白的表达水平。结果各组视网膜形态结构较完整,A组和B组无PVD发生,C组发生完全性PVD,D组发生部分性PVD（8/12）或无PVD（4/12）。F-ERG显示各组均无视网膜毒性损伤。C组opticin蛋白表达较A、B组明显降低,D组opticin蛋白表达较C组增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论玻璃体腔注射雌二醇对大鼠玻璃体后脱离具有修复作用。