食管鳞状细胞癌C20orf54基因多态性与吸烟、饮酒及体质量指数的相关性研究

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)C20orf54基因多态性rs13042395位点与吸烟、饮酒、体质量指数的相关性。方法选取7 673例患者和11 013例正常者C20orf54基因多态性rs13042395位点基因分型资料(基因分型采用sequenom芯片)。比较各组间基因型和等位基因频率的分布。结果病例组与对照组间C20orf54基因多态性rs13042395位点基因型和等位基因频率分布,差异具有统计学意义(P<0.05),C20orf54T等位基因降低ESCC患病风险(P=1.21E-11,OR=0.86,95%CI=0.82～0.90)。C20orf54基因多态性位点rs13042395在吸烟/不吸烟、饮酒/不饮酒及各级BMI人群中未观察到与ESCC的相关性。结论 C20orf54基因多态性、rs13042395遗传多态性与ESCC的易感性相关,与吸烟、饮酒、体质量指数无明显相关性。

食管癌rs13042395位点SNP与C20orf54基因启动子甲基化相关性分析

目的探讨食管鳞状细胞癌患者C20orf54基因rs13042395位点单核苷酸多态性(SNP)与基因启动子甲基化及其蛋白表达之间的关系。方法收集40例食管鳞状细胞癌患者癌组织及配对癌旁组织,利用亚硫酸氢盐PCR测序法(Bisulfite genomie sequencing PCR,BSP)检测组织中C20orf54基因甲基化水平,免疫组织化学法检测蛋白表达水平;同时收集上述40例患者及40例健康对照人群静脉血,运用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测C20orf54单核苷酸多态性。结果 C20orf54基因启动子区12个CpG位点中7个呈现出甲基化改变,甲基化率为58.33%。食管癌组织C20orf54蛋白低表达组甲基化阳性率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。C20orf54基因rs13042395位点C/T多肽中CC、CT、TT基因型及等位基因在食管癌和对照人群中分布差异无统计学意义(P>0.05)。食管癌患者C20orf54基因rs13042395位点携带C等位基因的CC基因型患者甲基化水平(69.6%)明显高于携带T等位基因的CT/TT基因型(35.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。CC基因型患者C20orf54蛋白表达水平低于CT/TT基因型患者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管鳞状细胞癌患者中C20orf54基因启动子区甲基化水平明显升高,rs13042395位点SNP与基因甲基化有相关性,携带C等位基因可能是食管癌患者C20orf54基因发生甲基化的危险因素。

C20orf54抑制食管癌细胞增殖并促进其凋亡

目的观察过表达C20orf54对食管癌细胞周期和凋亡的影响,探讨C20orf54基因在食管癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组织化学染色方法检测C20orf54蛋白在食管癌组织和癌旁正常组织中的表达;应用MTT法和流式细胞术检测过表达C20orf54对食管癌细胞系EC9706细胞增殖能力、细胞凋亡与细胞周期的影响。结果 C20orf54在食管癌组织中免疫反应性显著低于癌旁正常组织。稳定转染表达C20orf54的EC9706细胞生长明显受抑制,且G0/G1期细胞积聚,周期阻滞,细胞凋亡增多。结论 C20orf54基因可能参与食管癌的生长调控,食管癌的发生与C20orf54基因的表达有关。

粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因orf20的功能

【目的】在大肠杆菌中,转录因子SoxR作为胞内氧化还原感应器,参与抗氧化胁迫的全局性调控。粤蓝链霉菌榴菌素生物合成基因簇内存在一个类soxR基因orf20,但其生理功能仍不清楚。【方法】将orf20基因在大肠杆菌中进行表达,分析携带重组质粒的大肠杆菌对百草枯抗性的变化。同时通过修改后的PCR-targeting方法构建粤蓝链霉菌orf20删除的突变株,分析突变株的表型变化和对百草枯抗性水平的变化。【结果】重组ORF20在羧基端含有组氨酸标签,并在大肠杆菌中获得可溶性表达,携带重组质粒pET28b-orf20的大肠杆菌对百草枯的抗性水平显著提高。粤蓝链霉菌orf20删除突变株仍具有产孢能力,生长特性没有改变,对百草枯的抗性水平也没有变化,但榴菌素的产量大幅提高,是野生株的3.3倍。【结论】在大肠杆菌中,orf20基因的编码产物能够被百草枯激活,替代SoxR参与抗氧化胁迫的调控。在粤蓝链霉菌中,orf20基因不参与抗氧化胁迫,而对榴菌素的产生有负调控效应。