油菜细胞质雄性不育基因orf138、orf288的功能分析

为确定油菜ogu CMS不育基因orf138编码蛋白的毒性与雄性不育的关系以及hau CMS不育基因orf288的核心功能区域,对2个不育基因进行不同长度的截短,进行原核表达和拟南芥、油菜遗传转化。不育基因orf138截短研究结果显示,IPTG诱导后,转入含有跨膜螺旋的pET32a^(1-138)和pET32a^(1-93)的大肠杆菌生长受到了明显的抑制,而转入去掉跨膜螺旋的pET32a^(45-138)的大肠杆菌生长不受影响,表明ORF138的毒性区域位于包含跨膜螺旋的N端;遗传转化结果证实PS∶Rfp138^(35-138)和PS∶Rfp138^(45-138)均不能引起拟南芥和油菜雄性不育,说明N端的毒性区域是ORF138引起植物雄性不育所必需的。不育基因orf 288不同长度截短的超表达载体拟南芥转化结果显示,PS∶Rfp288^(104-288)、PS∶Rfp288^(134-288)和PS∶Rfp288^(164-288)的转基因阳性苗出现雄性不育表型,PS∶Rfp288^(194-288)的转基因阳性苗则全部可育,初步证明orf 288的核心功能区域是orf 288^(164-288),ORF288的164-194 aa可能与hau细胞质雄性不育密切相关。

水稻线粒体蛋白ORF288抑制细菌的正常生长

目的:对水稻线粒体基因orf288功能进行初步探索。方法:笔者在大肠杆菌中构建水稻线粒体基因orf288的原核表达载体pET-30a-orf288,转化入BL21(DE3)后利用IPTG诱导,绘制生长曲线,分析其表达产物对细菌生命活动的影响。结果:成功构建了pET-30a-orf288重组子,并能成功表达ORF288。结论:原核表达产物ORF288对细菌的生长具有明显的抑制作用,为进一步研究orf288作用提供了研究线索。