温热刺激增强卵巢癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin) 化疗的敏感性

目的探讨温热刺激对卵巢癌细胞化疗效果的影响与潜在作用机制.方法首先采用Cell Counting Kit-8(CCK8)细胞毒性实验检测温热刺激下,奥沙利铂对卵巢癌细胞A2780作用半数致死浓度(IC50)的变化;然后采用流式细胞术检测温热刺激对卵巢癌细胞凋亡的影响.最后采用电感耦合等离子体-质谱法(inductively coupled plasma-mass spectrometry,ICP-MS)检测细胞内铂浓度,并经qPCR检测细胞膜铜转运蛋白1(CTR1)与有机阳离子转运蛋白(OCT1-3)mRNA表达情况.结果与单纯药物处理组相比,温热刺激能显著降低奥沙利铂对卵巢癌细胞的IC50(t=3.47,P=0.0084),还能显著增加奥沙利铂诱导卵巢癌细胞凋亡现象的发生(t=10.42,P=0.0091).与单纯药物处理组相比,细胞摄入的铂含量在热刺激后增加(t=3.198,P=0.0494),CTR1(t=19.79,P<0.0001)与OCT1-3(OCT1:t=16.02,P=0.005;OCT3:t=7.95,P=0.0169)转录水平表达量也显著增加.结论温热刺激能增强卵巢癌细胞A2780的化疗效果,作用机制可能与其CTR1与OCT1-3的表达、促进细胞对铂类药物的摄入有关.

氯化两面针碱在大鼠心脏中的积聚及其机制研究

氯化两面针碱(nitidine chloride, NC)为抗肿瘤候选化合物。本研究考察其在大鼠心脏的分布及其机制,为其潜在的心脏毒性提供依据。动物实验获得了浙江大学医学中心动物保护和使用委员会的批准(2015-380-01),符合中国动物福利标准。大鼠单次静脉注射5 mg·kg^(-1)NC后0.25、0.5和2 h,心脏中NC浓度分别为47.7、71.1和63.2μg·g^(-1),与相同时间点血浆中的浓度比分别为576、1352和1212。大鼠连续静脉注射5 mg·kg^(-1)NC 20天,末次给药后2 h,心脏中NC浓度为458.5μg·g^(-1),与血浆中的浓度比为7336。NC在MDCK-hOCT1、MDCK-hOCT3中的积聚分别为mock细胞的16.1、4.99倍,但在MDCK-hOCTN1、MDCK-hOCTN2、MDCK-hPMAT中的积聚与mock细胞未显示明显差异。此外, OCTs的抑制剂奎尼丁、左旋延胡索乙素、Decynium 22可显著降低NC在原代培养的乳大鼠心肌细胞和成纤维细胞中的积聚。MTT结果显示, NC在心肌细胞和成纤维细胞上的LC_(50)分别为10.9和10.4μmol·L^(-1)。此外,不同浓度的NC可显著增加原代心肌细胞和成纤维细胞中LDH酶渗漏。上述结果表明, NC在大鼠心脏积聚和蓄积,对原代心肌细胞和成纤维细胞具有一定的毒性; OCT1和OCT3可介导NC的心脏积聚。