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Ornithine decarboxylase, mitogen-activated protein kinase and matrix metalloproteinase-2 expressions in human colon tumors 被引量:13
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作者 Takahiro Nemoto Shunichiro Kubota +2 位作者 Hideyuki Ishida Nobuo Murata Daijo Hashimoto 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第20期3065-3069,共5页
AIM: To investigate the expressions of omithine decarboxylase (ODC), MMP-2, and Erk, and their relationship in human colon tumors.METHODS: ODC activity, MMP-2 expression, and mitogenactivated protein (MAP) kinase acti... AIM: To investigate the expressions of omithine decarboxylase (ODC), MMP-2, and Erk, and their relationship in human colon tumors.METHODS: ODC activity, MMP-2 expression, and mitogenactivated protein (MAP) kinase activity (Erk phosphorylation) were determined in 58 surgically removed human colon tumors and their adjacent normal tissues, using [1-14C]-ornithine as a substrate, ELISA assay, and Western blotting, respectively.RESULTS: ODC activity, MMP-2 expression, and Erk phosphorylation were significantly elevated in colon tumors, compared to those in adjacent normal tissues. A significant correlation was observed between ODC activities and MMP-2 levels.CONCLUSION: This is the first report showing a significant correlation between ODC activities and MMP-2 levels in human colon tumors. As MMP-2 is involved in cancer invasion and metastasis, and colon cancer overexpresses ODC, suppression of ODC expression may be a rational approach to treat colon cancer which overexpresses ODC. 展开更多
关键词 ornithine decarboxylase Human colon tumors mitogen activated protein
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Expression of ornithine decarboxylase in precancerous and cancerous gastric lesions 被引量:5
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作者 Xin-Pu Miao Jian-Sheng Li +3 位作者 Hui-Yan Li Shi-Ping Zeng Ye Zhao Jiang-Zheng Zeng 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2007年第20期2867-2871,共5页
AIM: To investigate the expression of ornithine decarboxylase (ODC) in precancerous and cancerous gastric lesions. METHODS: We studied the expression of ODC in gastric mucosa from patients with chronic superficial gas... AIM: To investigate the expression of ornithine decarboxylase (ODC) in precancerous and cancerous gastric lesions. METHODS: We studied the expression of ODC in gastric mucosa from patients with chronic superficial gastritis (CSG,n = 32),chronic atrophic gastritis CAG,n = 43; 15 with and 28 without intestinal metaplasia (IM),gastric dysplasia (DYS,n = 11) and gastric cancer (GC,n = 48) tissues using immunohistochemical staining. All 134 biopsy specimens of gastric mucosa were collected by gastroscopy. METHODS: The positive rate of ODC expression was 34.4%,42.9%,73.3%,81.8% and 91.7% in cases with CSG,CAG without IM,CAG with IM,DYS and GC,respectively (P < 0.01),The positive rate of ODC expression increased in the order of CSG < CAG (without IM) < CAG (with IM) < DYS and finally,GC. In addition,ODC positive immunostaining rate was lower in well-differentiated GC than in poorly-differentiated GC (P < 0.05). CONCLUSION: The expression of ODC is positively correlated with the degree of malignity of gastric mucosa and development of gastric lesions. This finding indicates that ODC may be used as a good biomarker in the screening and diagnosis of precancerous lesions. 展开更多
关键词 ornithine decarboxylase Gastric carcinoma Precancerous lesions DIAGNOSIS IMMUNOHISTOCHEMISTRY
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Effect of remedies of supporting resistance and relieving blood stasis on metastasis of postoperative gastric cancer and ornithine decarboxylase 被引量:2
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作者 BU Ping 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 1997年第2期72-73,共2页
AIM To study the action of remedies of supporting resistance and relieving blood stasis on metastasis of postoperative gastric cancer and its influence on ornithine decarboxylase (ODC). METHODS Sixty three postope... AIM To study the action of remedies of supporting resistance and relieving blood stasis on metastasis of postoperative gastric cancer and its influence on ornithine decarboxylase (ODC). METHODS Sixty three postoperative gastric cancer patients were randomly divided into two groups. Thirty one patients were treated with western medicine consisting of the FAP scheme (5 flurouracil, adriamycin and cisplatin) and the CODP scheme (cyclophosphamide, vincristine, daunorubicin and prednisone), whereas 32 patients with the FAP scheme and traditional Chinese medicine. Correlations were approached between the ODC levels detected before and after treatment and some other factors including tumor diameter, infiltration depth, histological type and lymph node metastasis. RESULTS The ODC levels in the gastric cancers and normal gastric mucosa adjacent to the cancer tissues were significantly higher in the patients than those of the controls. The increasing ODC was obviously correlated with the tumor size, infiltration depth, differentiation type, and lymph node metastasis. Six months later there was no significant changes in the ODC levels of the group using only western medicine, while the ODC levels decreased markedly in the group using combined western and traditional Chinese medicine ( P <0 01). CONCLUSION The remedies of traditional Chinese medicine on the metastases of postoperative gastric cancers were related to the reduction of ODC activities. 展开更多
关键词 stomach neoplasms/surgery NEOPLASMS METASTASIS ornithine decarboxylase traditional Chinese medicine
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REVERSION OF MALIGNANT PHENOTYPES OF HUMAN LUNG SQUAMOUS CARCINOMA CELLS BY ORNITHINE DECARBOXYLASE ANTISENSE RNA 被引量:4
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作者 关钧 范慕贞 曹淑兰 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1996年第4期240-243,共4页
Abnormally elevated activity of ornithine decarboxylase (ODC), and subsequent polyamine accumulation are intimately associated with the genesis.development and metastasis of cancer. In the present study, to control th... Abnormally elevated activity of ornithine decarboxylase (ODC), and subsequent polyamine accumulation are intimately associated with the genesis.development and metastasis of cancer. In the present study, to control the growth of tumor cells, ODC antisense RNA was used to transfect human lung squamous carcinoma cell line LTEP-78. Compared with the parental cells, growth of the antisense transfected LTEP-78 cells arrested in G0/Gl phase and colony formation in soft agarose and tumorigenicity in nude mice were significantly reduced. Nucleic acid hybridization demonstrated that the transfectants expressed a high level of ODC antisense RNA and a significantly reduced level of endogenous ODC mRNA.The results suggest that the reversion of malignant phenotypes of human lung squamous carcinoma cells transfected with ODC antisense RNA is associated with the inhibition of polyamine biosynthesis. 展开更多
关键词 Human lung squamous carcinoma cells ornithine decarboxylase Antisense RNA
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Ornithine decarboxylase gene is overexpressed in colorectal carcinoma 被引量:1
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作者 Hai-YanHu Xian-XiLiu +7 位作者 Chun-YingJiang YiLu Shi-LianLiu Ji-FengBian Xiao-MingWang ZhaoGeng YanZhang BingZhang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第15期2244-2248,共5页
AIM: To investigate the ornithine decarboxylase (ODC)gene expression in colorectal carcinoma, ODC mRNA was assayed by RT-PCR and ODC protein was detected by a monoclonal antibody against fusion of human colon ODC prep... AIM: To investigate the ornithine decarboxylase (ODC)gene expression in colorectal carcinoma, ODC mRNA was assayed by RT-PCR and ODC protein was detected by a monoclonal antibody against fusion of human colon ODC prepared by hybridoma technology.METHODS: Total RNA was extracted from human colorectal cancer tissues and their normal counterpart tissues. ODC mRNA levels were examined by RT-PCR.ODC genes amplified from RT-PCR were cloned into a prokaryotic vector pQE-30. The expressed proteins were purified by chromatography. Anti-ODC mAb was prepared with classical hybridoma techniques and used to determine the ODC expression in colon cancer tissues by immunohistochemical and Western blotting assay.RESULTS: A cell line, which could steadily secrete antiODC mAb, was selected through subcloning four times.Western blotting reconfirmed the mAb and ELISA showed that its subtype was IgG2a. RT-PCR showed that the ODC mRNA level increased greatly in colon cancer tissues (P<0.01). Immunohistochemical staining showed that colorectal carcinoma cells expressed a significantly higher level of ODC than normal colorectal mucosa (98.6±1.03%vs 5.26±5%, P<0.01).CONCLUSION: ODC gene overexpression is significantly related to human colorectal carcinoma. ODC gene expression may be a marker for the gene diagnosis and therapy of colorectal carcinoma. 展开更多
关键词 ornithine decarboxylase RT-PCR Colorectal Cancer
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The Inhibitory Effect of Curcumin on Ornithine Decarboxylase against Hepatic Carcinoma
6
作者 Abeer A. Khamis Amira H. Sharshar +1 位作者 Amal H. Mahmoud Tarek M. Mohamed 《Journal of Biosciences and Medicines》 2019年第5期127-145,共19页
Curcumin the active component of turmeric is widely used as an anticancer agent for treating many human cancers. This study aimed at the extraction of curcumin from Curcuma Longa and investigates its therapeutic effec... Curcumin the active component of turmeric is widely used as an anticancer agent for treating many human cancers. This study aimed at the extraction of curcumin from Curcuma Longa and investigates its therapeutic effect as ornithine decarboxylase (ODC) inhibitor in HepG2 cells. The proliferation of HepG2 cells was carried out by using the MTT assay. In addition, cell cycle analysis was evaluated by using the flow-cytometric technique. Our results showed that curcumin has the ability to inhibit the proliferation of HepG2 cells with IC50 of 24.79 μg/ml and induced G2/M cell cycle arrest. Moreover, it caused an elevation in the intracellular concentration of Ca2+. Moreover, in the curcumin administration the downregulation expression level of ODC and Bcl-2 genes (p ≤ 0.05) was significant found. On the other hand, upregulation in the expression level of P53, Bax, and caspase-3 genes (p ≤ 0.05). This study concluded that curcumin may be considered as a new saving candidate for the future progress of antitumor agents. 展开更多
关键词 Curcumin-HepG2 Cells-Apoptosis ornithine decarboxylase Bax CELL Cycle
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THE EFFECTS OF CHINESE DRUGS FOR SUPPORTING HEALTHY ENERGY AND REMOVING BLOOD STASIS ON POSTOPERATIVE METASTASIS OF GASTRIC CARCINOMA AND ORNITHINE DECARBOXYLASE
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作者 卜平 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 1998年第1期3-6,共4页
32 postoperative cases of gastric carcinoma were treated by traditional Chinese medicine (TCM) drugs for supporting healthy energy and removing blood stasis, and their therapeutic results were compared with those in t... 32 postoperative cases of gastric carcinoma were treated by traditional Chinese medicine (TCM) drugs for supporting healthy energy and removing blood stasis, and their therapeutic results were compared with those in the control group treated by western medicine. After 6 months of treatment, in the TCM group, the rate of metastatic recurrence was significantly reduced, and the level of ornithine decarboxylase was also markedly lowered. Therefore, it is considered that the action of anti-metastatic recurrence of TCM drugs in postoperative cases of gastric carcinoma is probably related to the lowered activity of ornithine decarboxylase. 展开更多
关键词 Adult Aged Aged 80 and over Antineoplastic Combined Chemotherapy Protocols CISPLATIN DOXORUBICIN Drugs Chinese Herbal Female Fluorouracil GASTRECTOMY Gastric Mucosa Humans Lymphatic Metastasis Male Middle Aged Neoplasm Recurrence Local ornithine decarboxylase Postoperative Period Stomach Neoplasms
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siRNA-757干扰旋毛虫Ts-ODC基因对其抗酸能力的影响
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作者 薄禄琪 王雪莹 +7 位作者 侯嘉茗 张力 张鉴慧 阮入琳 张博涵 王爽 宋铭忻 张子群 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2114-2125,共12页
旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最... 旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最佳干扰siRNA分子及最佳干扰条件;并在pH 1.5、2.5、4.5和6.6的条件下将肌幼虫分别培养0.5、1和2 h,从肌幼虫Ts-ODC基因转录水平、酶活性及存活率等方面分析Ts-ODC基因干扰对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响;将Ts-ODC基因被干扰的旋毛虫肌幼虫感染小鼠,在7和42 d时分别收集成虫和肌幼虫,分别计算其减虫率;将子一代肌幼虫在pH 2.5的酸性条件下培养2 h,计算其存活率,对Ts-ODC基因干扰的遗传性进行分析。结果显示,Ts-ODC siRNA-757为最佳干扰分子,转染12 h、浓度为2μmol·L^(-1)培养3 d时为最佳干扰条件;各组pH 2.5培养2 h时Ts-ODC基因转录水平最高,pH 1.5培养2 h时虫体的存活率明显低于其他培养条件(P<0.01),pH 4.5培养0.5 h时虫体体内酶活性最高;转染Ts-ODC siRNA-757的肌幼虫接种小鼠后,7 d时成虫和42 d时肌幼虫的减虫率分别为58.95%和65.91%;其子一代肌幼虫在pH 2.5的培养液内培养2 h时其存活率为49%。综上表明,旋毛虫肌幼虫体内具有鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究首次通过siRNA技术干扰旋毛虫肌幼虫Ts-ODC基因,且证实干扰Ts-ODC基因可降低肌幼虫抗酸能力,为后期旋毛虫病的防治提供新思路。 展开更多
关键词 旋毛虫 鸟氨酸脱羧酶 RNA干扰 抗酸系统
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大鼠心肌多胺代谢限速酶ODC、SSAT活性分析 被引量:9
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作者 赵雅君 王丽娜 +4 位作者 李鸿珠 张力 徐长庆 孙轶华 Wang Rui 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期555-559,共5页
目的建立大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性分析方法。方法以Langendorff离体灌流心肌为实验材料,制备心肌组织匀浆;分别以dl[114C]Ornithine及[114C]acetylCoenzymeA为底物,以液体闪烁计数仪记... 目的建立大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性分析方法。方法以Langendorff离体灌流心肌为实验材料,制备心肌组织匀浆;分别以dl[114C]Ornithine及[114C]acetylCoenzymeA为底物,以液体闪烁计数仪记录生成的14CO2及[14C]acetylspermidine的放射活度,并以其代表ODC,SSAT的活性;计算大鼠心肌ODC、SSAT的酶促反应动力学参数,筛选出适宜的底物浓度;同时观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对酶活性的影响。结果①大鼠心肌ODC、SSAT基础活性分别为:(9.67±3.09)nmol·mg-1Pro·h-1;(3.59±0.91)nmol·mg-1Pro·min-1。②ODC催化LOrnithine的酶促反应动力学参数Km=(54.95±8.14)μmol·L-1;Vmax=(2.364±0.37)nmol·mg-1·h-1;SSAT催化AcetylCoenzymeA的酶促反应动力学参数Km=(12.87±1.88)μmol·L-1;Vmax=(0.50±0.07)nmol·mg-1·min-1。③大鼠心肌ODC、SSAT活性检测的底物浓度分别为:90μmol·L-1(18.5kBq)DL[114C]Ornithine及36μmol·L-1(2.96kBq)[114C]acetylCoA。④SNP呈浓度依赖性地抑制ODC的活性、诱导SSAT的活性。结论建立了大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性的分析方法,该方法简便易行;根据Km值确定测定大鼠心肌ODC及SSAT? 展开更多
关键词 大鼠 心肌 鸟氨酸脱羧酶 精脒/精胺乙酰转移酶 方法
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人ODC基因第三外显子反义RNA腺病毒载体的构建 被引量:9
10
作者 张岩 刘贤锡 +3 位作者 胡海燕 耿昭 王晓明 张冰 《山东大学学报(医学版)》 CAS 2003年第4期371-374,共4页
目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体。方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经SalⅠ、BglⅡ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr。经PmeⅠ酶切线... 目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因第三外显子反义RNA的腺病毒载体。方法:RT-PCR方法克隆出人ODC基因第三外显子的片段,插入pMD18-T载体中,经SalⅠ、BglⅡ酶切,插入穿梭质粒pAd-Track-CMV形成重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr。经PmeⅠ酶切线性化后,转入pAdesy-1细菌中与含腺病毒基因骨架的质粒pAdesy-1同源重组。将重组质粒pAdesy-ODCr经PacⅠ酶切后,转染293细胞包装成腺病毒颗粒,经荧光显微镜和PCR方法对重组腺病毒进行鉴定。结果:用RT-PCR方法从人前列腺癌组织中扩增出120bp的cDNA片段,经测序证实为ODC基因第三外显子的片段。重组质粒pAdTrack-CMV-ODCr转入pAdesy-1细菌中获得多个阳性克隆。重组质粒pAdesy-ODCr转染293细胞进行包装,经荧光显微镜观察可见其在293细胞中表达。进一步通过PCR法证实其含有目的基因。结论:成功地构建了ODC基因第三外显子反义RNA重组腺病毒载体,为研究其抗肿瘤的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒载体 反义RNA 外显子
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建鲤ODC1基因型与增重的相关性分析 被引量:15
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作者 李红霞 李建林 +1 位作者 唐永凯 俞菊华 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期414-421,共8页
构建了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)jlODC1a基因上6个和jlODC1b基因上4个SNP位点的PCR-RFLP方法,检测了这10个位点在12个家系约900尾建鲤选育群体中的基因型,各位点的基因型频率存在差异,... 构建了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)jlODC1a基因上6个和jlODC1b基因上4个SNP位点的PCR-RFLP方法,检测了这10个位点在12个家系约900尾建鲤选育群体中的基因型,各位点的基因型频率存在差异,最小等位基因频率(MAF)为0.14—0.48。各位点不同基因型与增重相关分析结果,其中7个SNPs与建鲤增重显性相关的位点,ODC1s基因上与雌鱼增重相关的SNP位点(7个)较雄鱼(4个)多。标记富集结果表明富集与建鲤增重相关的优势基因型的SNP个数越多的个体增重速度越快SNP个数越多的个体增重速度越快,富集4个的平均增重显著快于富集0—3的个体增重,且比0标记的快约14%,这反映出生长为数量性状。进一步对所检测位点进行双倍型分析,结果显示具有四个优势基因型且全部杂合优势基因型的4567(XXXXXXACCTCTCT)组的增重最快,比0优势基因型的增重快达26.6%,可以考虑用于今后的快增长建鲤的选育计划中。此外,双倍型分析结果还表明,不同位点之间可能存在或颉抗或协同的互作,如1和4之间存在拮抗关系,因此在今后的选育计划中,在考虑标记富集的情况下还应考虑标记之间的关系。宜在选择互为协同作用优势基因型的前提下,富集尽可能多的SNP标记。 展开更多
关键词 建鲤 鸟氨酸脱羧酶 基因型 SNP-增重相关分析
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急性高原肺水肿患者ODC1蛋白表达差异与肺动脉高压的相关性研究 被引量:8
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作者 久太 冯喜英 +12 位作者 关巍 华毛 杜发茂 拉周 崔金霞 李玉红 刘洪千 安文静 马维秀 时莹庆 颜然然 徐海亮 冯斐 《临床肺科杂志》 2017年第12期2160-2163,共4页
目的钻研高原肺水肿患者血浆中一氧化氮浓度改变;研究高原肺水肿患者血浆一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶酶活力和蛋白表达变化,及其血清蛋白浓度与肺动脉高压的相关性研究。经此研究,探究一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶对高原肺水肿发生和发... 目的钻研高原肺水肿患者血浆中一氧化氮浓度改变;研究高原肺水肿患者血浆一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶酶活力和蛋白表达变化,及其血清蛋白浓度与肺动脉高压的相关性研究。经此研究,探究一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶对高原肺水肿发生和发展的作用。方法通过对30例高原肺水肿患者血浆中一氧化氮浓度、一氧化氮合酶和鸟氨酸脱羧酶活力和蛋白表达进行检测,并与30例正常人进行差异性比较。结果高原肺水肿患者血浆中一氧化氮水平显著下降(P<0.01);一氧化氮合酶显著降低(P<0.01);鸟氨酸脱羧酶酶活力较正常人没有差异(P>0.01),但是有上升的趋势;鸟氨酸脱羧酶显著升高(P<0.01);高原肺水肿患者肺动脉压与血浆中鸟氨酸脱羧酶含量呈负相关(P<0.05)。结论一氧化氮和一氧化氮合酶在高原肺水肿的发生和发展起着重要的调节作用;鸟氨酸脱羧酶在高原肺水肿患者血浆中的高表达可能对受损组织起到修复作用。 展开更多
关键词 高原肺水肿 一氧化氮 一氧化氮合酶 鸟氨酸脱羧酶
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人ODC基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 被引量:3
13
作者 迟伟玲 刘贤锡 +1 位作者 宋现让 李文通 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第3期199-202,207,共5页
目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的RNAi慢病毒载体。方法:根据ODC mRNA序列, 选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火后插入pSuper载体的H1RNA启动子后产生pRiODC,将其中的ODC shRNA表达结构酶切插入慢... 目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的RNAi慢病毒载体。方法:根据ODC mRNA序列, 选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火后插入pSuper载体的H1RNA启动子后产生pRiODC,将其中的ODC shRNA表达结构酶切插入慢病毒转移质粒pHR' CMVGFP,产生pHRiODC/GFP。与△R8.2和pCMVVSVG共转染HEK293T细胞,包装产生慢病毒,分别采用转导HEK293T细胞和Real-Time RT-PCR的方法测定慢病毒的功能滴度和病毒RNA分子拷贝数。结果:酶切和测序证实,pRiODC质粒构建正确,产生能同时表达GFP和转录产生ODC shRNA的慢病毒转移质粒PHRiODC/GFP,未浓缩及浓缩病毒悬液的功能滴度分别为6.3×104 TU/ml和7×106TU/ml, RNA拷贝数分别为3.4×108copies/ml和3.6×1010copies/ml。结论:成功构建人ODC基因RNAi慢病毒载体,为通过阻断ODC基因表达治疗恶性肿瘤奠定了基础。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 基因疗法 逆转录病毒 RNA干扰
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ODC反义RNA表达质粒的构建及其对人肺鳞癌细胞生长特性的影响 被引量:3
14
作者 关钧 范慕贞 曹淑兰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期21-24,共4页
鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶,其活性的异常升高及多胺堆积与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关.作者构建一个能表达人ODC反义RNA的真核表达质粒pCMV/ODCas,用磷酸钙沉淀法将其导入人肺鳞癌细胞系LTEP-78(L78),经G... 鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶,其活性的异常升高及多胺堆积与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关.作者构建一个能表达人ODC反义RNA的真核表达质粒pCMV/ODCas,用磷酸钙沉淀法将其导入人肺鳞癌细胞系LTEP-78(L78),经G418筛选,获两株转染细胞系L78/ODCasl和L78/ODCas4.与亲本细胞相比,其生长速度减慢;软琼脂集落形成能力减弱,DNA、RNA及蛋白质等生物合成受到抑制,ODC酶活性降低.经Southern blot及PCR分析,进一步证明了上述变化与ODC反义序列稳定完整地整合到转染细胞基因组中有关. 展开更多
关键词 odc 肺鳞癌细胞 反义RNA 表达质粒 转染细胞 多胺生物合成 集落形成 基因组 DNA 磷酸钙沉淀法
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大鼠全脑缺血再灌注后皮质和海马中ODC的表达 被引量:1
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作者 万新 姜冰 +3 位作者 刘运生 刘宏伟 吴光勇 李文泽 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期534-536,共3页
目的 :检测大鼠全脑缺血再灌注不同时相皮质、海马中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达 ,探讨脑缺血再灌注后ODC活性增高的机制。方法 :采用改良的四血管关闭法复制大鼠全脑缺血再灌注 2h ,4h ,6h ,8h动物模型 ;用逆转录PCR(RT PCR)方法检测不... 目的 :检测大鼠全脑缺血再灌注不同时相皮质、海马中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达 ,探讨脑缺血再灌注后ODC活性增高的机制。方法 :采用改良的四血管关闭法复制大鼠全脑缺血再灌注 2h ,4h ,6h ,8h动物模型 ;用逆转录PCR(RT PCR)方法检测不同时相皮质、海马标本中ODCmRNA的表达。结果 :对照组大鼠皮质、海马中未检测出ODCmRNA的表达 ;实验组大鼠皮质、海马中检测出有ODCmRNA的表达 ,且不同时相的表达差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :大鼠全脑缺血再灌注后皮质、海马中ODCmRNA表达明显增加 ,脑缺血再灌注后ODC活性明显增加可能是ODCmRNA表达增加。 展开更多
关键词 海马 大鼠 全脑缺血再灌注 odc 皮质 MRNA表达 时相 表达差异 鸟氨酸脱羧酶 标本
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ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体对食管癌细胞凋亡影响的研究(英文) 被引量:1
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作者 田辉 徐杰 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 宋旭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期238-243,共6页
为探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,应用MTT法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响,采用Westernblot和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中OD... 为探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,应用MTT法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响,采用Westernblot和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,同时应用原位末端标记(TUNEL)法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变.实验结果显示,应用MTT法观察发现Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖有显著抑制作用.以Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达.HPLC结果显示,食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内3种多胺含量都明显降低.TUNEL标记检测结果显示Ad-ODC-AdoMetDCas可明显引起食管癌Eca109细胞凋亡.透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征(表现细胞体积缩小,核皱缩、碎裂,染色质呈块状边集等).实验表明,ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)具有显著抑制食管癌细胞生长增殖,降低细胞多胺合成,促进细胞凋亡,为探讨食管癌基因治疗的可行性提供实验依据. 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 食管癌ECA109细胞 基因治疗
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ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体抑制人食管癌Eca109细胞增殖和侵袭的研究 被引量:1
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作者 宋旭 田辉 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 徐杰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1144-1149,共6页
背景与目的:食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,对人民的生命和健康危害极大。有研究发现,在食管癌细胞和肿瘤组织中多胺的含量和生物合成明显增高。本研究中我们探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对人食管癌Eca109... 背景与目的:食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一,对人民的生命和健康危害极大。有研究发现,在食管癌细胞和肿瘤组织中多胺的含量和生物合成明显增高。本研究中我们探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对人食管癌Eca109细胞多胺合成、细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法:采用活细胞计数法和BrdU掺入实验观察Ad-ODC-AdoMetDCas对Eca109细胞增殖的影响;应用Westernblot法和HPLC法分别检测腺病毒对Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达的影响,以及胞内多胺合成的抑制作用,采用Matrigel侵袭实验分析腺病毒载体对Eca109细胞侵袭活性的影响,同时检测Ad-ODC-AdoMetDCas对Eca109细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。结果:活细胞计数法和BrdU掺入实验表明,Ad-ODC-AdoMetDCas对Eca109细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。Westernblot证实Ad-ODC-AdoMetDCas可明显抑制Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达。HPLC结果显示,感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,Eca109细胞内三种多胺腐胺、精脒、精胺含量均明显降低(P<0.05)。Matrigel侵袭实验结果显示,Ad-ODC-AdoMetDCas可显著降低Eca109细胞的体外侵袭能力(P<0.05)。同时发现,与Ad-GFP相比,Ad-ODC-AdoMetDCas对裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用。结论:ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体具有显著抑制Eca109细胞增殖和侵袭的作用。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 ECA109 细胞 增殖 侵袭 抑制作用
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双反义腺病毒载体Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌细胞凋亡及抑制细胞生长影响的研究 被引量:1
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作者 徐杰 田辉 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 宋旭 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期1359-1363,共5页
目的:探讨双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用及抑制细胞生长的影响。方法:应用MTT法测定不同MOI的腺病毒对肺癌Eca109细胞的基因转染效率,观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响;采用Wes... 目的:探讨双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用及抑制细胞生长的影响。方法:应用MTT法测定不同MOI的腺病毒对肺癌Eca109细胞的基因转染效率,观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响;采用Western印迹和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,采用流式细胞术检测腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA(Ad-ODCas)和Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞周期分布的影响,同时应用原位末端标记(TUNEL)法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响。结果:MTT法实验表明,Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖有显著抑制作用(P<0.05)。以Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达(P<0.05)。流式细胞术结果显示感染了Ad-ODC-AdoMetDCas的食管癌Eca109细胞周期阻滞在G1期。HPLC结果显示,食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内3种多胺含量均明显降低(P<0.05)。TUNEL标记检测结果显示,Ad-ODC-AdoMet-DCas可明显引起食管癌Eca109细胞凋亡(P<0.05)。结论:Ad-ODC-AdoMetDCas能显著抑制食管癌细胞生长,促进细胞凋亡,为探讨食管癌基因治疗的可行性提供实验依据。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 食管肿瘤 基因治疗
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芳维A酸乙酯对小鼠皮肤乳头状瘤形成过程中ODC、PCNA的影响 被引量:1
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作者 王儒鹏 张国威 +1 位作者 何云志 黄海 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期683-685,共3页
目的 通过测定小鼠二阶段皮肤乳头状瘤模型中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)、增殖细胞核抗原 (PCNA)的变化 ,探讨芳维A酸乙酯的癌化学预防作用机制。方法 ODC作用于14 C标记的鸟氨酸底物后释放14 CO2 ,通过测定14 CO2 生成量反映标本中ODC活性 ... 目的 通过测定小鼠二阶段皮肤乳头状瘤模型中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)、增殖细胞核抗原 (PCNA)的变化 ,探讨芳维A酸乙酯的癌化学预防作用机制。方法 ODC作用于14 C标记的鸟氨酸底物后释放14 CO2 ,通过测定14 CO2 生成量反映标本中ODC活性 ;用免疫组化方法检测样本中PCNA表达情况。结果 芳维A酸乙酯对肿瘤标志物ODC、PCNA有明显的抑制作用。结论 芳维A酸乙酯对ODC、PCNA的抑制作用是其预防小鼠乳头状瘤发生的重要机制 ,它具有肯定的癌化学预防作用。 展开更多
关键词 芳维A酸乙酯 皮肤乳头状瘤 鸟氨酸脱羧酶 增殖细胞核抗原 odc PCNA 小鼠
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ODC基因反义RNA对肺癌A-549细胞生长抑制作用的体外研究 被引量:1
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作者 李林 田辉 +2 位作者 刘贤锡 张岩 张冰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期905-907,911,共4页
目的:探讨重组腺病毒rAd-ODC/Ex3as对肺癌A-549细胞的体外抑制作用。方法:利用报告基因GFP测定病毒感染效率,采用MTT法实验观察rAd-ODC/Ex3as对肺癌细胞A-549生长增殖的影响,用WesternBlot检测rAd-ODC/Ex3as是否抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)... 目的:探讨重组腺病毒rAd-ODC/Ex3as对肺癌A-549细胞的体外抑制作用。方法:利用报告基因GFP测定病毒感染效率,采用MTT法实验观察rAd-ODC/Ex3as对肺癌细胞A-549生长增殖的影响,用WesternBlot检测rAd-ODC/Ex3as是否抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的表达,并应用TUNEL标记检测法观察rAd-ODC/Ex3as对细胞凋亡的影响。结果:当MOI为50时,腺病毒感染A-549细胞的效率约为75%;WesternBlot证实rAd-ODC/Ex3as可抑制ODC基因的表达;rAd-ODC/Ex3as以20MOI感染肺癌A-549细胞可明显抑制其生长增殖。TUNEL标记检测结果证实rAd-ODC/Ex3as可引起A-549细胞凋亡。结论:rAd-ODC/Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达,并可抑制肺癌A-549细胞的生长和增殖,诱导其凋亡,有望成为治疗肺癌的基因药物。 展开更多
关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒载体 肺肿瘤 A-549细胞 基因治疗
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