超高效液相色谱-串联质谱法同时测定黄芩提取物中4种黄酮类成分

黄芩提取物样品中加入水,经甲醇超声提取2次,离心后,合并上清液,用水定容至50.0mL,过0.22μm微孔滤膜,采用超高效液相色谱-串联质谱法同时测定滤液中黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷等4种黄酮类成分的含量。以ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱为固定相,以不同体积比的0.01%(质量分数)氨水和乙腈的混合液为流动相进行梯度洗脱,串联质谱分析中采用电喷雾离子源负离子模式(ESI-)和多反应监测模式。4种黄酮类成分的质量浓度在5.0~500.0μg·L-1内与其对应的质谱响应值呈线性关系,检出限(3S/N)为0.3~1.5μg·kg-1,测定下限(10S/N)为1.0~5.0μg·kg-1。以空白黄芩提取物样品为基体进行加标回收试验,所得回收率为91.1%~99.1%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.0%~4.1%。

蒲地蓝消炎口服液活性成分在大鼠体内的药代动力学过程及对肝脏药物代谢酶的影响

该研究建立了大鼠灌胃蒲地蓝消炎口服液(PDL)后血浆中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵的LC-MS含量测定方法,分析了3个成分在大鼠体内的药代动力学过程,并探讨了PDL对大鼠肝脏中药物代谢酶的影响。液相色谱分离采用C18色谱柱;流动相为乙腈-水(含0.2%甲酸),梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾(ESI)离子源,多反应监测模式(MRM),正负离子交替模式检测。使用小动物自动采血仪进行血浆样品采集。Win Nonlin软件计算药代动力学参数。BCA法和分光光度法测定大鼠肝微粒体总蛋白浓度和CYP450总酶含量。方法学经专属性、线性范围、回收率、精密度和样品稳定性等考察,确证该实验建立的LC-MS分析方法简单、专属、准确、可靠,可满足大鼠灌胃PDL后血浆中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵的含量测定需求。药时曲线显示黄芩苷和汉黄芩苷有双峰现象,药代动力学参数表明PDL中黄芩苷、汉黄芩苷和紫堇灵具有一定的类药属性。PDL连续服用7 d,大鼠肝脏系数、肝微粒总蛋白和CYP450酶含量有升高趋势但是无显著性差异,表明PDL基于CYP酶发生药物-药物相互作用的可能性较小。该实验结果可为PDL体内药效及药物相互作用研究和临床应用提供参考。

基于全方特征图谱质量表征的芩连制剂质量评价研究

目的建立芩连制剂特征图谱质量表征方法,以全面表征芩连制剂质量,并应用于芩连制剂的质量评价。方法采用UHPLC-DAD多波长分析方法,Waters Cortecs T3(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱,以乙腈(含0.02%甲酸)-(10 mol/L乙酸铵-0.09%甲酸缓冲液)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温30℃,检测波长230、330 nm。结果建立了芩连制剂特征图谱质量表征方法,指认了38个特征峰,且检测了12个指标性成分的含量,平均加样回收率为83.58%~106.76%;测得11批芩连制剂中12个指标性成分质量分数分别为连翘酯苷A 0.21~9.08 mg/g、盐酸黄柏碱0.39~1.91 mg/g、芍药内酯苷0.13~9.28 mg/g、芍药苷3.02~20.24 mg/g、甘草苷0.19~0.51 mg/g、黄芩苷12.36~27.64 mg/g、1,2,3,4,6-五-O-倍酰-D-葡萄糖(PGG)0.22~3.63 mg/g、汉黄芩苷1.92~6.12 mg/g、连翘苷0.22~4.10 mg/g、盐酸小檗碱5.37~16.85 mg/g、盐酸巴马汀0.53~2.26mg/g、甘草酸0.45~2.06mg/g。不同厂家及其不同批次芩连制剂中成药的质量表征差异主要来源于黄芩(峰22、38、27)、赤芍[峰2、21(PGG)、7(芍药内酯苷)]、连翘[峰36(连翘酯素)、30]、黄连(峰24)、黄连-川黄柏(峰8、4)、连翘-赤芍(峰3)。结论建立的特征图谱质量表征方法可全面地表征与评价芩连制剂中成药,为该类品种的质量控制提供了科学依据,亦为中成药的质量控制提供方法学借鉴。