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三代EGFR-TKI奥希替尼(AZD9291)耐药细胞系建立及耐药标志预测分析 被引量:1
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作者 苗留飞 杨阳 +2 位作者 余柏增 张家勋 李晓军 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第5期28-31,共4页
目的建立三代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)奥希替尼耐药细胞系(PC9-OR)并分析其耐药标志。方法浓度梯度递增构建奥希替尼耐药PC9细胞系(PC9-OR)。利用生物信息学分析AZD9291耐药细胞株表达谱芯片和测序数据筛选出耐药细... 目的建立三代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)奥希替尼耐药细胞系(PC9-OR)并分析其耐药标志。方法浓度梯度递增构建奥希替尼耐药PC9细胞系(PC9-OR)。利用生物信息学分析AZD9291耐药细胞株表达谱芯片和测序数据筛选出耐药细胞高表达基因;荧光定量PCR验证表达;Logistics构建回归诊断模型并用ROC曲线验证其诊断效能。结果成功构建PC9-OR耐药细胞株,对3组独立PC9-OR细胞表达谱数据生物信息分析,发现19个基因表达在至少两个数据集中表达上调,3个基因在3个耐药细胞数据集表达均上调。荧光定量PCR检测PC9-OR细胞耐药相关基因有11个表达上调。Logistics回归显示5个基因诊断效能较好,ROC联合诊断模型显示曲线下面积0.985。结论构建了三代EGFR-TKI奥希替尼耐药细胞系PC9-OR,发现一组基因可以作为EGFR-TKI耐药的标志,可能为临床及时发现EGFR-TKI耐药提供依据。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 酪氨酸激酶抑制剂 非小细胞肺癌 奥希替尼(azd9291) 耐药标志
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miRNA-1对胃癌细胞体外EGFR-TKI敏感性影响的实验研究 被引量:2
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作者 娄智 吉亚君 +2 位作者 王鑫 胡晨曦 刘玮萱 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2022年第2期103-108,共6页
目的探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究。方法选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用... 目的探讨上调或沉默miRNA-1(miR-1)表达对胃癌细胞体外表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)敏感性影响的研究。方法选择人胃癌细胞系MKN-45作为受试对象,慢病毒转染miR-1或miR-1 shRNA,分别作为miR-1组和miR-1 shRNA组,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测GES-1和MKN-45细胞中miR-1表达。另外设置空白对照组和阴性对照组。采用MTT法检测MKN-45细胞对不同浓度AZD9291(奥西替尼)的敏感性;流式细胞术检测1μmol/L AZD9291作用48 h后MKN-45细胞凋亡活力和细胞周期。采用Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT通路相关蛋白的表达。结果qPCR证实miR-1在MKN-45细胞系中低表达。MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,miR-1组细胞对AZD9291敏感性明显增加,而miR-1 shRNA组细胞对AZD9291敏感性明显降低。Annexin V/PI双染法和BrdU法检测,miR-1组细胞凋亡率为(44.65±5.18)%,高于空白对照组的(15.40±2.13)%和阴性对照组的(17.92±3.14)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-1 shRNA组细胞凋亡率为(11.20±2.48)%,低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显降低,miR-1 shRNA组细胞IGF-1R、p-IGF-1R、p-AKT、p-p70S6K蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调miR-1表达可增加MKN-45胃癌细胞系对AZD9291的敏感性,其作用机制可能与抑制IGF-1R/PI3K/AKT信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 胃癌 EGFR-TKI MIR-1 azd9291(奥西替尼) IGF-1R/PI3K/AKT信号通路
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