红细胞渗透脆性试验方法改良的探讨

目的：改良红细胞孵育渗透脆性试验（Osmotic fragility test，OFT）验证改良方法与标准操作方法结果一致性。方法对 OFT 采取加样取量及检测试剂减半和采用不同检测设备进行比色评价改良方法检测效果，即选取脆性增大和脆性降低样本100例（阳性50例，阴性50例），用一种加样改良和测试改良方法与传统方法进行结果比对。结果100例OFT 样本采取加样量与试剂减半检测出的结果与厂家标准操作加样量所测结果验证一致（T＝1．6608，P ＞0.05），两组数据间对比差别无统计学意义。结论OFT 改良方法替代传统 OFT 初筛方法可以更快、更客观地出结果服务于临床，且能有效地降低试剂和人力成本，提高检测效率。因此，该法可作为批量计生体检单位及检测设备缺乏的基层医院筛查珠蛋白生成障碍性贫血方法首选条件。

三种红细胞渗透脆性试验用于地中海贫血筛查的临床应用评价

目的 评价临床上常用的 3种红细胞渗透脆性试验作为临床地中海贫血 (地贫 )筛查技术的准确性及其应用价值。方法 以双盲试验对临床送检的 45 3份血样分别采用 3种红细胞渗透脆性试验、分子筛查手段和铁代谢状态分析检测红细胞溶血率、珠蛋白基因型和缺铁性贫血。结果 以分子筛查方法结合铁代谢状态作为诊断地贫和缺铁性贫血的金标准 ,双管、改良的单管和两管红细胞渗透脆性试验筛查地贫的有效率分别为 90 .3 %、86.8%和 85 .4% ;特异性分别为 99.4%、99.4%和 10 0 % ;敏感度分别为 88.6%、84.3 %和 77.7% ;总的误诊率分别为 9.7%、13 .2 %和 14 .6% ;对孕妇血样漏检率分别高达 2 7.7%、3 4.4%和 3 7.7%。结论 三种红细胞脆性试验均能较好地筛出地贫 ,其中以双管法最佳、单管法次之 ,两管法居末 ,但这些方法均不宜作为妊娠期筛查地贫的技术手段。

不同抗凝剂对红细胞渗透脆性试验结果的影响

目的了解EDTA-K2、枸橼酸钠、肝素锂抗凝血对红细胞渗透脆性试验结果的影响。方法对40份分别用EDTA-K2、枸橼酸钠、肝素锂抗凝的血标本进行红细胞渗透脆性试验;剩余血液用0.9%NaCl洗涤3次后配成50%红细胞悬液再进行试验;同时进行不加抗凝剂的对照试验。结果EDTA-K2抗凝血标本及洗涤后的渗透脆性均明显高于对照组,枸橼酸钠、肝素锂抗凝血标本对渗透脆性有一定影响,经洗涤后与对照组没有明显的差别。结论可以用枸橼酸钠或肝素锂抗凝血标本经洗涤后进行红细胞渗透脆性试验,不能用EDTA-K2抗凝的标本。

联合试验在地中海贫血诊断中的应用

目的 :探讨红细胞平均体积 (MCV)、红细胞脆性及血红蛋白 (Hb)电泳联合试验在地中海贫血 (简称地贫 )中的诊断价值。方法 :用日本SysmexKX 2 1自动血细胞分析仪、中山医科大学红细胞脆性一管定量法、美国Helena公司KEP型全自动电泳分析系统 ,分别对本实验室经分子生物学技术确诊的 14 8例地贫及 81例非地贫样品进行MCV、红细胞脆性及Hb电泳测定 ,并对结果作相关统计学分析。结果 :MCV、红细胞脆性、Hb电泳单项试验对地中海贫血诊断的灵敏度及特异度分别为 91.9%、81.1%、83.8%及 79%、91.4 %、90 .1%。MCV与Hb电泳、红细胞脆性与Hb电泳二项试验平行联合的灵敏度及特异度分别为 98.6 %、96 .6 %及 71.6 %、82 .7% ;系列联合的灵敏度及特异度分别为 77%、6 8.2 %及 97.5 %、98.8%。MCV、红细胞脆性、Hb电泳三项试验平行联合的灵敏度、特异度为 10 0 %、6 5 .4 % ;系列联合的灵敏度及特异度为 6 2 .8%、10 0 %。经u检验 ,平行联合试验的灵敏度与各单项试验灵敏度之间、系列联合试验的特异度与各单项试验特异度之间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :在地贫的诊断试验中 ,MCV、红细胞脆性、Hb电泳平行联合试验可提高灵敏度 ,系列联合试验可提高特异度 。

两种方法检测α、β-地中海贫血基因携带者的结果比较

目的 探讨红细胞渗透脆性试验 (简称渗透法 )与红细胞脆性一管定量法 (简称一管法 )在检测地中海贫血中的价值。方法 应用渗透法和一管法结合血红蛋白 ( Hb)电泳同时检测 443例标本 ;采用渗透法阳性判定值为 <3 .2 g/ LNa Cl仍未完全溶血 ,或一管法测定溶血度 <60 % ,或血红蛋白电泳有异常者 ,共 1 2 6例疑似为地中海贫血基因携带者 ,进一步作地中海贫血基因检测以确证。结果 渗透法诊断轻型地中海贫血的敏感度为 77.42 % ,特异性为 93 .75 % ,阳性似然比为 1 2 .3 9;一管法的敏感度为 80 .65 % ,特异性为 92 .1 9% ,阳性似然比为 1 0 .3 3。二法检出阳性率的差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 渗透法和一管法均适用于 α、β-地中海贫血基因携带者的筛查 ,因一管法更简单、快速 ,可选为常规检测方法。

4种方法筛查血红蛋白病的探讨

目的比较4种方法(电泳法、wHPLC、MCV法、一管法)筛查Hb病的检出效能及其准确性,为临床寻求一种较理想的筛查方法,提高实验诊断率。方法选择2007-2008年间在金域医学检验中心进行婚检、孕检、产检及体检标本9203例,同时采用电泳法、wHPLC(弱阳离子交换色谱法)、MCV法(平均红细胞体积测定)、红细胞脆性实验(一管法)进行检测,对1523例疑为Hb病筛查实验结果进行回顾性分析。结果4种方法筛查Hb病的检出率分别为16.5%、16.5%、16.8%、8.3%。准确率分别为90%、92%、96%、52%,4种筛查方法检出率及准确率经统计学分析,差异有统计学意义(P<0.01)。电泳法、wHPLC法、MCV法对筛查Hb病检出率明显高于一管法。结论联合应用电泳法、wHPLC(弱阳离子交换色谱法)及MCV法,能有效地检出Hb病患者。红细胞脆性实验(一管法)存在一定的漏检率,筛查效能差,不具备单独应用的临床价植。

酸化甘油溶血试验在红细胞储存研究中的应用

目的探索酸化甘油溶血试验在红细胞储存损伤研究中应用的可能性。方法随机采集无偿献血者全血标本20份,4℃储存5d。分别于储存d1,d3和d5采用AGLT和EOFT来检测渗透脆性。AGLT计算50%未溶血率对应的时间,EOFT计算50%溶血率对应的NaCl浓度。比较2种试验方法在检测红细胞渗透脆性上的差异。结果AGLT50%未溶血率所对应的时间从(34.60±1.40)s缩短到(28.71+±2.50)s(P<0.05),EOFT50%溶血率所对应的NaCl浓度从(4.36±0.21)g/L增加到(4.89±0.26)g/L(P<0.05);AGLT在性别之间无显著差异(P>0.05),EOFT在性别之间也无显著差异(P>0.05)。结论AGLT计算结果精确,物料耗费少,操作耗时短,是一种可以用于红细胞储存损伤研究的检测方法。

球形红细胞计数在遗传性球形红细胞增多症诊断中的意义

目的 :探讨球形红细胞计数在诊断遗传性球形红细胞增多症中的意义。方法 :总结15例遗传性球形红细胞增多症患儿 ,比较其球形红细胞计数、红细胞脆性试验、酸化甘油试验的变化。结果 :球形红细胞计数小于10 %10例(10/15) ,10 %～20 %4例(4/15) ,但其红细胞脆性试验及酸化甘油试验均为阳性。结论 :对于外周血球形红细胞计数小于10 %的非典型病例 。

地中海贫血筛查试验在小红细胞低色素性贫血病因鉴别诊断中的应用

目的探讨红细胞体积散布宽度变异系数(RDW-CV)、红细胞脆性(EFT)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性和血红蛋白(Hb)电泳在小红细胞性贫血病因鉴别诊断中的作用。方法所有2362例参检人群进行以上地中海初筛试验检测;对参检人群中筛选出的287例小红细胞性贫血的参检者进行血清铁蛋白及地中海贫血基因检测,作为确诊地中海贫血和缺铁性贫血(IDA)的分组依据。对结果做统计学分析。结果 IDA组的RDW-CV显著高于其他组;EFT、G6PD、Hb电泳检测对地中海贫血诊断的灵敏度分别为92.2%、80.4%、92.2%,特异度分别为86.0%、47.4%、45.6%。在排除了地中海贫血的小红细胞性贫血中,EFT、G6PD、Hb电泳检测对IDA的诊断灵敏度分别为13.0%、65.2%、71.7%,特异度分别为72.7%、90.9%、100%。结论以血液学指标MCV、MCH、RDW-CV为基础,结合Hb电泳、EFT、G6PD结果可对小红细胞性贫血进行地中海贫血及IDA及慢性病贫血的鉴别诊断。

红细胞渗透脆性试验联合G6PD检测在诊断新生儿黄疸中的临床应用价值

目的探讨红细胞渗透脆性试验联合葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测在新生儿黄疸诊断中的临床应用价值。方法选取50例黄疸新生儿作为观察组,同期50例健康新生儿作为对照组。检测并比较两组红细胞渗透脆性和G6PD活性水平,比较两组红细胞渗透脆性阳性和G6PD缺乏阳性发生情况。结果观察组红细胞渗透脆性和G6PD活性水平分别为(61.74±14.59)%、(9.54±1.36)U/g,均明显低于对照组的(80.84±12.36)%、(18.57±1.84)U/g,差异有统计学意义(P<0.05)。两组红细胞渗透脆性阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组G6PD缺乏阳性率为8.00%高于对照组的0,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿黄疸中存在少数G6PD缺乏和红细胞渗透脆性试验阳性患儿,针对此类患儿应及时明确诊断并采取正规有效干预,以便提高患儿的成功救治率。

湛江地区720例地中海贫血筛查结果分析

目的探讨红细胞脆性试验(一管法)结合红细胞指数(MCV、MCH、RDW)在地中海贫血筛查中的应用价值。方法以红细胞脆性试验(一管法)结合血细胞分析法中MCV、MCH、RDW进行地中海贫血筛查。结果 720例受试者中红细胞脆性试验(一管法)筛查地中海贫血异常者为120例,占16.7%;MCV、MCH降低而RDW正常者为115例,占16.0%;两种方法有较好的一致性。120例异常者进行地中海贫血基因诊断确诊为地中海贫血携带者或杂合子为85例(其中α地贫50例,β地贫35例),占11.80%,也与之有较好的符合性。结论红细胞脆性试验(一管法)结合红细胞指数筛查地中海贫血,方法简便、经济、可接受性高,可及早发现高危人群,对预防和降低重型地中海贫血患儿出生具有重要意义。

长期皮肤黄染伴乏力确诊儿童遗传性球形红细胞增多症临床研究并文献复习

目的探讨遗传性球形红细胞增多症(HS)患儿的临床表现及诊断经过,并进行相关文献复习。方法选择2018年4月,首都儿科研究所附属儿童医院收治的1例HS患儿为研究对象。采用回顾性分析方法,收集该例患儿的临床病例资料,并对其病史、相关实验室检查和基因检测结果进行分析。对国内外数据库中,儿童HS相关文献进行复习。本研究符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①本例患儿为女性,年龄为13岁8个月。患儿6岁时初次发病,以皮肤及巩膜黄染、乏力为主要表现。多次在其所居住地的县、市及省级医院就诊,均未被明确诊断。②于本院及外院主要实验室检查结果:外周血涂片检查显示,球形红细胞所占比例为9%~27%。胆红素检测显示,总胆红素为52.6~313.8μmol/L,直接胆红素为8.2~14.6μmol/L,间接胆红素为38.0~302.1μmol/L,均异常增高。红细胞渗透脆性(EOF)试验显示,红细胞开始出现溶血时,EOF为0.68%NaCl(正常参考值为0.38%~0.46%NaCl),完全溶血时EOF为0.44%NaCl(正常参考值为0.28%~0.32%NaCl)。③基因检测结果:患儿全外显子基因检测显示,红细胞血影蛋白β(SPTB)基因2号与3号外显子疑似杂合缺失,疾病表型为球形红细胞增多症2型(常染色体显性遗传)、椭圆形红细胞增多症3型(遗传方式不明确)、致死性或近致死性新生儿溶血性贫血(遗传方式不明确)。患儿父亲存在PIEZO1基因chr16-88804044位点杂合突变c.1118C>T(p.P373L),其母亲未发现HS相关基因突变。④诊断及治疗:根据实验室检查及基因检测结果,该例患儿被确诊为HS。治疗建议:必要时进行脾切除术。2020年6月,患儿于当地医院进行脾切除术后,黄疸消失,但是出现轻度贫血。⑤文献复习结果:根据本研究制定的检索策略,共计检索到35篇关于HS患儿相关文献,其中7篇报道12例HS患儿发病与SPTB基因有关,SPTB基因不同位点突变患儿的临床表现不同。结论HS患儿临床表现异质性大,易被临床漏诊、误诊。临床需结合患儿临床表现、家族病史、针对性实验室检查和基因检测结果,对该病患儿进行早诊断、早治疗,进而改善患儿预后。