西北地区草地贪夜蛾种群遗传多样性分析及治理策略

旨在明确甘肃省草地贪夜蛾的入侵来源,并制定科学有效的防控对策。基于mtCOI基因分子标记分析中国草地贪夜蛾不同生态区8个省12个地理种群276个样品的遗传多样性指数、遗传分化系数及基因流等。结果表明,甘肃省草地贪夜蛾种群的单倍型多样性指数和平均核苷酸差异数分别为0.133~0.157与0.133~0.317,均低于中国周年繁殖区广东、广西、云南种群的0.157~0.819与1.033~7.705;所有种群的Tajima’s D中性检验和Fu’s F检验结果均为负值,表明草地贪夜蛾入侵中国后经历了明显的种群扩张事件。四川种群与其他种群遗传分化显著,62个种群间存在中等程度以上的基因交流。陕西略阳、陕西宁强、甘肃徽县、甘肃成县种群的有效迁入个体数和有效迁出个体数之和分别为11 860.66、11 708.65、10 878.66和10 379.32,在中国草地贪夜蛾的基因交流过程中具有中继站的作用,表明陕南汉水谷地为中国草地贪夜蛾西线北迁入侵西北的主要通道。

以“虚实三态理论”构建急危重症中医辨治体系

急危重症病种多样、患者病情危重、证候复杂、变化迅速,有其固有的疾病演变规律。本文提出,中医辨证不同于中医内科学辨证体系,姜良铎教授、刘清泉教授依据多年治疗急危重症的临床经验概括其核心病机为“正气虚于一时,邪气暴胜而突发”,进而总结提炼出一种适用于中医药治疗急危重症的辨治体系——“虚态-实态-虚实互存态”的“虚实三态理论”。

糖尿病肾病中医辨证分型研究概述

近年来临床上关于糖尿病肾病(DKD)中医辨证分型和治法方药的研究涌现了多种学术观点。辨证方式主要包括根据病因病机辨证及根据临床分期辨证两种。病因病机辨证主要包括病因辨证与脏腑辨证,脏腑辨证中主要涉及脾不散精理论和心肾一体论;分期辨证则多以DKD的各种西医分期为基础。随着检验检查技术的提高,检验指标和检查结果逐渐成为辨证分型的物质基础和量化指标,DKD辨证分型涉及的检查指标主要有糖脂代谢指标、炎症因子、尿蛋白及肾功能相关指标、肾脏血流动力学指标等。参考文献82篇。

从“肺玄府-气液-络脉”理论分期辨治脓毒症急性肺损伤探析

笔者认为脓毒症急性肺损伤的病机演变与“肺玄府-气液-络脉”理论关系密切,宜分期辨治,早期宜清肺调玄、活血化饮、通利肺络,以阻断病情进展;炎性渗出期当泻肺调玄、活血利水、行气通络;肺水肿期需宣肺通玄、祛瘀逐饮、益气通络;肺实变期应益肺开玄、祛瘀化痰、补虚通络。提倡早期干预,中西医结合综合治疗,尽早阻断病情恶性循环,降低死亡率,为中医药防治脓毒症急性肺损伤提供新的思路。

史锁芳治疗感染后咳嗽经验

史锁芳教授认为感染后咳嗽病位在肺,涉及肝脾,病理因素多责之于风、痰、火。临床治疗可根据病程分阶段论治:初期重在宣透,处方以三拗汤加质轻性浮之品;中期以清解郁热为主,辅以疏风散邪,常用桑叶、桑白皮、薄荷等;晚期清热养阴、润肺益气,处方可选麦门冬汤、沙参麦冬汤、清燥救肺汤加减。同时,史教授还善用“风四药”(桑叶、菊花、全蝎、僵蚕)疏风解痉止咳。对于难治性感染后咳嗽,史教授遵循因人制宜、因时制宜原则,因势利导,常获佳效。附验案2则。

从“风、热、虚”探讨小儿外感银屑病辨治思路

小儿银屑病多继发于感冒发热、咳嗽咽痛、鼻塞流涕等外感病症之后,起病急骤,病情变化迅速,易反复发作、迁延不愈。本文从小儿特殊体质生理、病理特点出发,总结提出小儿外感银屑病以“风、热、虚”为主要病机特征表现,并倡导“风者散之,热者清之,虚者补之”的论治思路指导临床治疗,以期为小儿外感银屑病的中医诊疗及瘥后防复提供新思路。附案例1则,以资验证。

探讨中医适宜技术耳穴压丸改进选穴方法后对近视防控的作用

当前,中国的青少年视力健康面对着重大挑战,青少年近视发病率居高不下,达到52.7%,近视的防控却没有取得有效理论突破。近几年耳穴压丸在防控近视过程中发挥着一定优势,但临床实践中选穴方法比较模糊,效果不理想,为更好的在近视防控过程中应用耳穴疗法。文章将对近视的病因、病机、辨证分型作详细论述,对中医适宜技术耳穴压丸防控青少年近视的选穴方法进行改进,实施辨证压穴的方法,精准选用施治耳穴,以提高近视防控效果,为今后临床实施耳穴压丸防控近视提供新方法探讨。

浮针扫散治疗神经根型颈椎病(气滞血瘀证)的临床观察

目的 观察浮针扫散治疗神经根型颈椎病(气滞血瘀证)的临床效果。方法 患者82例按照随机数字表法分为治疗组(浮针扫联合三期辨证牵引法)和对照组(针刺联合三期辨证牵引法)各41例。2周为1个疗程,两组均治疗1个疗程。比较两组治疗前后的临床疗效、症状体征及简化McGill疼痛检测量表评分、血清炎症因子指标及血流动力学指标。结果 治疗组总有效率为87.80%,高于对照组的68.29%(P <0.05);两组的症状、体征积分、简化McGill疼痛检测量评分、血清炎性因子的含量、血液流变学指标均较治疗前改善明显(P <0.05);治疗组的症状、体征积分、简化McGill疼痛检测量评分、血清炎性因子的含量、血流变学指标与对照组差异有统计学意义(P <0.05)。结论 浮针扫散颈周患肌联合三期辨证牵引法可明显改善神经根型颈椎病(气滞血瘀证)患者的临床症状,而且有血流动力学和炎性因子支持。

江苏省农业绿色发展水平评价及区域差异分析

农业绿色发展是推进中国农业现代化发展的有效举措,为探究江苏省农业绿色发展水平和区域差异化特征,基于2012—2020年江苏省13个地级市农业发展统计数据,从环境友好、生态保育、质量高效、农村发展4个方面构建包括20个具体指标的农业绿色发展评价指标体系,采用熵值法和自然断点法对江苏省农业绿色发展水平和空间分异情况进行综合研究,探讨江苏省农业绿色发展现状及制约因素。结果表明:从时间维度上看,2012—2020年江苏省农业绿色发展水平呈现明显上升趋势,绿色优质的农产品供给是江苏省农业绿色发展的优势所在,而资源环境承载的压力是制约江苏省农业绿色发展的短板;从空间维度上看,江苏省农业绿色发展存在明显的空间分异态势,南京等发达地区发挥了积极的辐射带动作用,整体区域差异逐渐缩小,不过也存在两极化发展问题。

格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤的影响及其机制研究

目的探究格隆溴铵对高氧诱导幼鼠急性肺损伤(ALI)的影响及作用机制。方法从30只SD幼鼠中随机选取10只为对照组,其余幼鼠成功复制高氧诱导的ALI模型,随机分为ALI组、格隆溴铵组,每组10只。格隆溴铵组雾化吸入0.8 mg/(kg·d)格隆溴铵,ALI组、对照组吸入等体积生理盐水,连续给药7 d后,测量幼鼠肺组织湿/干重比值(W/D)、肺指数,检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及血清活性氧基团(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,比较肺组织病理学变化及Toll样受体4/髓分化因子88(TLR4/MyD88)通路蛋白的表达。结果与对照组比较,ALI组W/D及肺指数升高(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平升高(P<0.05),ROS水平降低(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量上调(P<0.05);与ALI组比较,格隆溴铵组W/D及肺指数降低(P<0.05),血清IL-1β、IL-6、TNF-α、SOD水平降低(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05),TLR4、MyD88蛋白相对表达量下调(P<0.05)。结论格隆溴铵能改善血清炎症指标及氧化应激指标,降低高氧诱导的ALI,其作用机制可能与TLR4/MyD88通路有关。

长江流域城市群高质量发展水平测评与空间分异探究

构建了长江流域城市群高质量发展评价指标体系,运用熵权TOPSIS法,从新发展理念的五个维度,对长江流域5个城市群及其所包含的城市进行了高质量发展测评与分析,找出了其发展中存在的问题,并提出了相应的对策。

浙闽五个红豆树自然保留种群的遗传多样性

红豆树是我国三级保护的珍稀濒危植物，是家具、装饰、雕刻等上等用材。应用ISSR分子标记研究浙闽2省5个红豆树自然保留种群的遗传多样性和种群遗传分化。结果表明，红豆树遗传多样性丰富，物种水平的多态位点百分率高达91．46％，总的种群基因多样性为0．3981，显著地高于其他珍稀濒危树种。研究的5个红豆树自然保留种群虽较小，但皆维持较高水平的遗传多样性，种群多态百分率（PPL）、Nei基因多样性（HE）和Shannon信息多样性指数（I）分别为81．71％～89．02％、0．3498—0．3831和0．5026～0．5506。因现有红豆树种群皆是在过渡采伐后保留下来的，片断化时间较短，种群间遗传分化较小，仅有6．45％的遗传变异存在于自然保留种群间，而种群内的变异占总变异的93．55％。较大的红豆树种群遗传多样性相对较高，应优先加强遗传保育。

TGF-β2和geneX对BrdU标记骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的作用

目的研究TGF-β2和gene X对Brd U标记的骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化作用的影响.方法采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞,传代并鉴定,设实验组和空白对照组,实验组分4组:A组:Brd U标记后的BMSCs组;B组:Brd U标记后的BMSCs+TGF-β2组;C组:Brd U标记后的BMSCs+gene X组;D组:Brd U标记后的BMSCs+gene X+TGF-β2组.空白对照组为Brd U标记后的单纯BMSCs加入基础培养基避光培养.诱导培养后观察骨髓间充质干细胞生长形态、检测生长动力学(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、碱性磷酸酶(ALP)和钙定量、进行细胞Von-Kossa法染色,观察成骨分化作用.结果 (1)4组BMSCs吸光度值(OD)分析比较显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)各组BMSCs成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)和钙定量检测结果显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(3)进行细胞Von-Kossa法染色,D组可见大量钙结节;C组可见较多钙结节;B组可见部分钙结节;A组可见少量钙结节;空白对照组未见钙结节.结论 (1)TGF-β2可促进骨髓间充质干细胞的增殖和诱导其向成骨细胞分化;(2)gene X可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,且在细胞因子TGF-β2联合作用下成骨分化作用更明显.

转化生长因子β_1/Smad3促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号促进大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化的机制。方法:常规细胞培养、免疫细胞化学染色观察TGF-β1作用下MSC中Smad3的表达情况;脂质体介导稳定转染Smad3中部分C端功能域突变体(Smad3△C),间接免疫荧光试验鉴定;采用RT-PCR检测转染细胞中碱性磷酸酶(ALP)和核心结合因子(cbfa1)mRNA的表达,用Gomori钙钴法定性检测ALP,用对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测细胞ALP活性,观察Smad3△C对MSC成骨分化的影响。结果:MSC细胞表达Smad3,受TGF-β1刺激后,呈现出即刻由细胞质向细胞核转位的趋势。稳定转染细胞中c-Myc抗原阳性表达;受TGF-β1刺激后,MSC和空载体对照MSC(V-MSC)中ALP染色呈强阳性反应,而Smad3△C-MSC中阳性率仅为34.9%(P<0.01);MSC和V-MSC中ALP、cbfa1 mRNA的表达水平以及ALP活性明显高于Smad3△C-MSC(P<0.05或P<0.01),而MSC和V-MSC之间无显著性差异(P>0.05)。结论:MSC中的Smad3是作为TGF-β1信号转导通路下游转导介质而存在的;通过Smad3选择性调节,具有多重生物学效应的TGF-β才得以实现其促进MSC成骨分化的功能。

荭草素抑制3T3-L1前脂肪细胞分化及其改善胰岛素抵抗的作用研究

目的研究荭草素对3T3-L1前脂肪细胞分化及对脂肪细胞胰岛素抵抗的影响,并探讨其作用机制。方法传统鸡尾酒法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,MTT法检测荭草素对前脂肪细胞活力的影响,油红O染色法检测脂质积累,酶法检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)的含量。地塞米松诱导成熟的脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-[N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diaxol-4-yl)amino]-2-deoxyglucose,2-NBDG)摄入法观察脂肪细胞对葡萄糖的摄取能力;Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl Co A carboxylase,ACC)的磷酸化水平及葡萄糖转运体4(glucose transporter type 4,GLUT4)的表达水平,免疫荧光法检测GLUT4的向膜转位能力。结果荭草素可浓度依赖性地减少细胞脂滴的积累及细胞内TG的含量,但对细胞活力无明显的影响(P>0.05)。胰岛素抵抗状态下,荭草素明显增加脂肪细胞对2-NBDG的摄取(P<0.05),明显上调AMPK、ACC的磷酸化水平(P<0.05),促进GLUT4的向膜转位及表达。结论荭草素抑制前脂肪细胞的分化,同时,荭草素通过上调AMPK/GLUT4信号途径相关蛋白的表达,促进了细胞对葡萄糖的摄取,达到改善胰岛素抵抗的作用。

骨髓基质细胞的体外培养和向成骨及软骨分化的实验研究

目的研究骨髓基质细胞（ＢＭＳＣ）的成骨及软骨分化功能。方法 采用细胞静置贴壁培养法，体外培养了兔和儿童的ＢＭＳＣ，用传至２－３代兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原联合治疗兔膝关节软骨缺损；采用成骨诱导培养法研究儿童ＢＭＳＣ的成骨效应。结果（１）Ⅱ型胶原和ｂＦＧＦ对兔ＢＭＳＣ的贴壁和生长是有效的。（２）用兔ＢＭＳＣ和Ⅱ型胶原治疗１２周后，能使兔膝关节软骨缺损获得恢复，其软骨细胞分化明显。（３）用成骨诱导培养法，可使儿童ＢＭＳＣ骨钙素分泌水平比常规对照组升高８～１０倍，并可见有典型的成骨化的黑色矿化细胞区。结论骨髓基质细胞具有成骨和软骨分化功能。

miR-21诱导犬BMSCs骨向分化的体外实验研究

目的体外研究检测miR-21诱导拉布拉多犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用。方法构建LentimiR-21-Luciferase与Lenti-Lac Z-Luciferase慢病毒载体,分别转染犬BMSCs,将研究分为miR-21组与Lac Z组。利用体外细胞划痕实验来比较转染后BMSCs的爬行迁移能力。在转染后的第0、1、4、7、14天分别提取miR-21组与Lac Z组BMSCs的mRNAs和蛋白。通过Real time-PCR技术和Western blot检测成骨分化关键因子骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的表达。结果Lenti-miR-21-Luciferase与LentiLac Z-Luciferase慢病毒载体成功转入BMSCs后,miR-21组的BMSCs细胞爬行迁移能力显著增强(P<0.001);Real timePCR和Western blot结果显示,miR-21可以显著上调BMSCs成骨分化关键因子OCN和OPN的表达(P<0.05)。结论miR-21可以显著促进BMSCs的成骨分化,为进一步的体内实验奠定基础。

植物雌激素金雀异黄酮通过p38MAPK通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化

目的研究丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPKs）的亚型p38 MAPK在植物雌激素金雀异黄酮（Genistein）促进小鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells ,BMSCs）向成骨细胞分化过程中的作用.方法 BMSCs用无酚红α-MEM（含经活性碳吸附的10% FBS、β-磷酸甘油、维生素C）培养,先用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,然后用SB203580（p38 MAPK通路阻断剂）以及PD98059（p44/42 MAPK通路阻断剂）阻断相应的通路后,再用Genistein处理细胞,观察BMSCs向成骨细胞分化情况,并同时观察上述处理后MAPK通路的变化.测定碱性磷酸酶（ALP）活性和钙（Ca）沉积量反映BMSCs向成骨细胞分化状况,用Western blot来检测MAPK通路是否激活.结果 Genistein（0.01,0.1,1 μmol·L-1）剂量依赖性增加小鼠BMSCs细胞内ALP活性和细胞外Ca沉积量,并同时引起p38MAPK通路的激活和p44/42MAPK通路的抑制.SB203580预处理能减弱Genistein刺激引起的p38MAPK通路的激活并同时阻止Genistein诱导的BMSCs向成骨细胞分化.结论 Genistein在0.01～1 μmol·L^-1剂量范围内可通过p38MAPK通路促进小鼠BMSCs向成骨细胞分化.

卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化及Ⅰ型胶原mRNA表达的影响

目的观察卡托普利对MC3T3-E1细胞增殖、分化和Ⅰ型胶原基因表达水平影响。方法在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的卡托普利,应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法、RT-PCR的方法观察卡托普利对MC3T3-E1细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果 10-11 mol.L-1浓度的卡托普利作用24 h能明显促进MC3T3-E1细胞增殖,作用3 d能明显促进MC3T3-E1细胞表达碱性磷酸酶。卡托普利可刺激MC3T3-E1细胞表达Ⅰ型胶原,以10-11 mol.L-1作用最强。结论卡托普利有促进MC3T3-E1细胞增殖、促进碱性磷酸酶表达和增加Ⅰ型胶原mRNA表达的作用。

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对MCF-7细胞增殖和分化的影响及其机制研究

目的研究4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-ami-no-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和分化的作用及其可能机制。方法不同浓度的ATPR作用MCF-7细胞后,绘制细胞生长曲线,分析细胞增殖情况;瑞氏-吉姆萨染色法观察细胞形态学改变;酶联免疫法(ELISA法)检测粘蛋白(mucin 1,MUC-1)活性;RT-PCR法检测维甲酸受体(RARα、RARβ、RARγ)、维甲酸受体诱导基因1(RRIG1)、雌激素受体(ERα、ERβ)mRNA的表达;Western blot法检测RARα、RARβ、RARγ蛋白的表达。结果 ATPR明显抑制MCF-7细胞增殖,且随浓度和时间增加而逐渐增强;镜下观察ATPR作用72 h后MCF-7细胞形态趋向正常细胞分化;ELISA结果显示ATPR明显降低MCF-7细胞培养上清MUC-1浓度(P<0.05);ATPR作用MCF-7细胞72 h后,RARβ、RRIG1、ERβ表达增强(P<0.05),RARγ表达下调(P<0.05),RARα和ERα表达则无明显变化。结论 ATPR可明显抑制MCF-7细胞增殖并诱导其分化程度增高,其机制可能与调节维甲酸受体和雌激素受体平衡,并上调RRIG1表达有关。