淫羊藿总黄酮含药血清对成骨细胞OPG/OPGL基因表达的影响

目的研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞骨保护素(OPG)和骨保护素配体(OPGL)基因表达的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化法体外培养成骨细胞;将含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以5%的质量浓度加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对OPG/OPGL基因表达水平的影响。OPG/OPGL基因表达水平用RT-PCR法检测。结果半定量RT-PCR显示5%含淫羊藿总黄酮大鼠血清干预成骨细胞时,存在OPG mRNA的转录,在此浓度下,随着时间的延长转录水平逐渐增加,而OPGL mRNA水平随着时间的延长转录水平逐渐减弱。结论淫羊藿总黄酮代谢产物能上调成骨细胞中OPG mRNA的表达、抑制OPGL mRNA的表达,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性。

核因子κB受体活化剂研究进展

核因子κB受体活化剂 ,是肿瘤坏死因子受体超家族成员 ,是骨保护素配体在破骨细胞上的受体 ,骨保护素配体通过与核因子κB受体活化剂结合 ,将细胞分化等信号传入破骨细胞前体内 ,促进其分化、融合 ,并促进成熟破骨细胞的激活过程。

联合甲状旁腺激素和普萘洛尔对人成骨细胞增殖及OPG和RANKL mRNA表达的影响

目的联合甲状旁腺激素(rhPTH1-34)和普萘洛尔(PRO)处理体外培养的人松质骨源性成骨细胞(HOB),观察其对人成骨细胞增殖及骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达的影响,探讨其对骨代谢影响的可能机制。方法(1)以成人髂骨和股骨颈部松质骨为原料,分离培养原代人成骨细胞并对其鉴定。(2)以人成骨细胞为体外实验模型,固定浓度rhPTH1-34(50 ng/ml)和不同浓度PRO(0.1μM、1μM、10μM)分别及联合刺激体外培养的人成骨细胞72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,用实时荧光定量PCR法检测成骨细胞OPG和RANKL基因的表达。结果 rhPTH1-34和PRO单独给药均可促进成骨细胞增殖(P<0.05),在PRO 10 uM时成骨细胞OPG基因的表达量增加(P<0.05),且大于RANKL基因的表达量;相反,联合rhPTH1-34和PRO给药抑制成骨细胞增殖(P<0.05),并抑制成骨细胞OPG和RANKL基因的表达(P<0.05),且随着PRO浓度的增加,OPG和RANKL基因表达均呈下降趋势。结论 rhPTH1-34和PRO单独给药均可促进成骨细胞增殖,而两者联合给药后却抑制了成骨细胞的增殖,可能是通过调控OPG和RANKL基因的表达来实现的。

绝经后妇女基质金属蛋白酶-3和抑制因子与骨密度和骨保护蛋白及其配体的关系

目的:探讨绝经后妇女血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和抑制因子(TIMP-1)浓度与骨密度(BMD)和骨保护蛋白(OPG)及其配体(OPGL)的关系。方法:120例绝经后妇女用双能X线吸收法(DEXA)测定腰椎正位,股骨颈,华氏区和大粗隆的BMD,根据BMD检测结果分为正常组(A组)、低骨量组(B组)和骨质疏松组(C组)各40例,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清MMP-3、TIMP-1和OPG及OPGL浓度,计算MMP-3/TIMP-1、OPG/OPGL比值;结果:①C组MMP-3浓度高于A组(153±121ng/ml与125±101ng/ml,P<0.05),而TIMP-1的数值略低于A组(134±106μg/L与147±130μg/L)。②C组中MMP-3与MMP-3/TIMP-1比值与血清OPG存在明显正相关性,MMP-3/TIMP-1比值与BMD和OPGL存在明显负相关性(均P<0.05),校正年龄和体质量指数后,以上数据相关性增高(P<0.05)。结论:绝经后骨质疏松症(PMOP)患者MMP-3/TIMP-1比值与BMD和OPG和OPGL具有关联性,MMP-3/TIMP-1比值升高可能为PMOP伴随骨代谢转换过程增快的表现。

鲑鱼降钙素对大鼠钙化血管中OPG／RANKL表达的影响

以VitD3为诱发药物,成功建立起大鼠动脉钙化模型,用免疫组化法检测了骨保护素(osteoprotegrin,OPG)、核因子kB受体激活物配体(receptor activator of nuclear factor kappaB ligand,RANKL)在血管组织中的表达,同时测定了血管组织中钙含量及碱性磷酸酶活性.结果显示,与正常对照组相比,VitD3处理组血管组织OPG表达明显减少而RANKL表达明显增加,血管组织钙含量及碱性磷酸酶活性明显增高;与VitD3处理组比较,鲑鱼降钙素治疗组血管钙化程度明显减轻,血管组织OPG表达明显增加而RANKL表达明显减少,血管组织钙含量及碱性磷酸酶活性明显降低.本研究结果表明OPG/RANKL参与血管钙化的调节,鲑鱼降钙素可能通过OPG/RANKL途径有效抑制血管钙化.