蛇床子素化学结构修饰研究进展

蛇床子素,其化学名为7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素,又名甲氧基欧芹酚,是蛇床子成熟果实中的主要有效成分,属香豆素类化合物,拥有丰富的生物活性。为深入研究蛇床子素活性与其结构的关系,人们对其进行了大量的结构修饰研究工作,修饰部位主要集中在内酯环、C-7位甲氧基和C-8位异戊烯基。综述蛇床子素的结构修饰研究进展,以期为该类化合物结构修饰深入研究和应用开发提供参考。

蛇床子素通过减轻阿尔茨海默病大鼠模型中的神经炎症改善认知功能障碍

目的抗炎治疗为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供了一个潜在的靶点。蛇床子素(Ost)已被证明可以改善记忆并具有多效性保护作用,但其在AD治疗过程中的确切机制尚不清楚。方法在本研究中,作者研究Ost对β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)诱导的认知功能障碍和海马炎症反应的保护作用。采用双侧海马注射Aβ_(1-42)建立AD大鼠模型,在Aβ_(1-42)注射前7 d至注射后7 d每日给予Ost。采用Morris水迷宫(MWM)试验评估大鼠的认知功能。采用免疫组化和Western blot法检测海马神经胶质反应及Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和核因子-κB(NF-κB)的表达。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定促炎细胞因子的产生。结果Ost治疗显著改善了AD大鼠模型海马中Aβ_(1-42)毒性诱导的认知障碍,减轻了胶质细胞的激活,降低了炎症细胞因子的释放(P<0.01)。经Ost处理后,Aβ_(1-42)诱导的TLR4、TRAF6和NF-κB表达的明显降低(P<0.01)。结论Ost通过抑制TLR4/NF-κB信号通路而减轻Aβ_(1-42)诱导的神经炎症,可能是一种很有前途的治疗药物。

蛇床子素通过NF-kB信号通路调控退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应及凋亡

目的 研究蛇床子素对退变髓核细胞的细胞外基质表达、炎症反应和凋亡的作用及其潜在机制。方法 采用氧糖剥夺(Oxygen Glucose Deprivation, OGD)培养建立退变髓核细胞模型,将细胞分为:对照组(正常培养)、OGD组(OGD培养)、蛇床子素组(OGD培养+蛇床子素处理)、PDTC组(OGD培养+NF-κB通路抑制剂PDTC处理)和蛇床子素+PDTC组(OGD培养+蛇床子素+PDTC处理)。采用Western blot检测细胞中Ⅱ型胶原(Collagen typeⅡ,Col2al)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、P65和p-P65蛋白表达,ELISA法检测细胞培养液中炎性因子血清白细胞介素-1β(interleukin-1 β,IL-1β),白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 与对照组比较,OGD组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显降低,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高,细胞凋亡率明显升高,细胞中p-P65蛋白表达明显升高;与OGD组比较,蛇床子素组和PDTC组细胞中Col2al、Aggrecan蛋白相对表达水平明显升高,细胞培养液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低,细胞凋亡率明显降低,细胞中p-P65蛋白表达明显降低,而蛇床子素+PDTC组上述指标改变最为明显。结论 蛇床子素可能通过抑制核因子激活的B细胞的κ轻链增强(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路的活性,促进退变髓核细胞的细胞外基质合成、抑制退变髓核细胞的炎症反应和凋亡。

蛇床子素调节PI3K/Akt/m TOR信号通路对老龄自发性高血压大鼠肾氧化应激损伤的影响

目的:探究蛇床子素对老龄自发性高血压大鼠的影响机制。方法:购买20月龄的老龄自发性高血压大鼠(SHRs)及健康Wistar-Kyoto(WKY)大鼠,对SHRs进行蛇床子素灌胃治疗处理持续8周。对大鼠收缩压及舒张压进行监测,使用苏木精-伊红(H&E)、碘酸雪夫染色(PAS)和Masson染色观察大鼠肾脏组织病理学变化。使用ELISA试剂盒检测大鼠肾脏超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性。采用Western blot对PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白进行检测。结果:蛇床子素降低SHRs收缩压及舒张压,改善了SHRs大鼠肾脏的组织病理学变化,降低SHRs肾脏MDA活性,提升SOD及GSH活性。蛇床子素降低p-PI3K、p-Akt、p-mTOR水平。结论:蛇床子素通过降低PI3K/Akt/mTOR信号通路活性发挥对老龄自发性高血压大鼠肾氧化应激损伤的保护作用。

基于BMP2/Smad4信号通路探究蛇床子素对骨质疏松性骨折大鼠愈合过程的影响

目的基于骨形态发生蛋白(BMP)2/Smad4信号通路探究蛇床子素对骨质疏松性骨折(OPF)大鼠愈合过程的影响。方法将90只SD大鼠分成Sham组、OPF组、低剂量组(10 mg/kg蛇床子素)、高剂量组(20 mg/kg蛇床子素)、高剂量+NC组(2μl shRNA)、高剂量+shRNA-BMP2组(2μl shRNA-BMP2),15只/组;摘除大鼠的双侧卵巢以构建骨质疏松(OP)模型,在此模型基础上进行右侧股骨干骨折建立OPF大鼠模型,术后除Sham组及OPF组外其余组灌胃相应剂量蛇床子素,而Sham组及OPF组给予等量生理盐水灌胃,高剂量+NC组、高剂量+shRNA-BMP2组在灌胃第1天于尾静脉注射相应慢病毒,其余组则注射等量生理盐水,灌胃8 w(1次/d);使用双能X线BMD仪检测骨痂部位骨密度(BMD);酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)和碱性磷酸酶(ALP)水平;三点弯曲实验进行股骨生物力学性能检测;Micro-CT扫描股骨骨痂;HE染色观察骨痂组织形态;Western印迹检测骨痂组织成骨细胞特异性转录因子(Osterix)、Runt相关转录因子2(RUNX2)及BMP2/Smad4通路蛋白表达。结果与Sham组比较,OPF组股骨骨痂BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著降低,股骨刚度及最大载荷、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)显著减小,TRACP水平显著升高,骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增大(均P<0.05);与OPF组比较,低、高剂量组BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著升高,股骨刚度及最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著增加,TRACP水平显著降低,Tb.Sp显著减小(均P<0.05);与高剂量组比较,高剂量+shRNA-BMP2组BMD、ALP水平、RUNX2、Osterix、BMP2、Smad4表达显著降低,股骨刚度及最大载荷、BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著减小,TRACP水平显著升高,Tb.Sp显著增大(均P<0.05)。结论蛇床子素通过激活BMP2/Smad4信号通路来促进OPF大鼠的骨折处愈合。

含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物的合成及抗菌活性

设计合成了25个含(杂)芳磺酰基哌嗪的蛇床子素衍生物,经核磁共振波谱(1H NMR和13C NMR)及元素分析确证了其结构.抗菌活性测试结果表明,化合物4q对金黄色葡萄球菌(S.aureus)、大肠杆菌(E.coli)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氟喹诺酮大肠杆菌(FREC)的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.5,1,2和2μg/mL,化合物4s对S.aureus,E.coli,MRSA和FREC的MIC分别为0.25,0.5,1和2μg/mL,化合物4u对S.aureus,E.coli,MRSA和FREC的MIC分别为0.5,2,1和4μg/mL,3个化合物的抗S.aureu活性与对照药苯唑西林相似,且优于诺氟沙星;抗E.coli,MRSA和FREC活性优于对照药苯唑西林和诺氟沙星.研究结果表明,(杂)芳磺酰基哌嗪的引入能有效提高抗菌活性,扩大抗菌谱.

蛇床子素通过阻断钙通道降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度

目的探讨蛇床子素对蛙坐骨神经复合动作电位的作用以及离子机制。方法通过细胞外空气间隔法诱导蛙坐骨神经复合动作电位,观察蛇床子素作用及其机制。结果蛇床子素剂量依赖降低蛙坐骨神经复合动作电位幅度。胞外0钙能够减小蛇床子素的抑制效应。广谱钙通道阻断剂氯化镉,氯化镧阻断蛇床子素的抑制效应。L型钙通道阻断剂地尔硫卓、维拉帕米,P/T型钙通道阻断剂氯化镍都能阻断蛇床子素的抑制效应。结论蛇床子素通过抑制钙通道降低蛙的坐骨神经复合动作电位幅度。

芳香丙烯酸酯类蛇床子素衍生物的合成与抗菌活性

在前期对蛇床子素研究的基础上,保留其优势结构,与芳香丙烯酸组合,设计合成了24个酯类衍生物,经^(1)HNMR、^(13)CNMR和元素分析对其进行结构确证。抗菌活性测试结果显示:化合物(E,E)-4-硝基苯基丙烯酸[(7-甲氧基-2-氧代-2H-色烯-8-基)-3-甲基-2-丁烯]酯(Ⅲh)和(E,E)-噻唑-2-丙烯酸[(7-甲氧基-2-氧代-2H-色烯-8-基)-3-甲基-2-丁烯]酯(Ⅲt)的抗菌效果最为显著,前者对金黄色葡萄球菌(S. aureus)、大肠杆菌(E. coli)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐氟喹诺酮大肠杆菌(FREC)的最小抑菌浓度(MIC)分别为4、16、8和16 mg/L,后者对S. aureus、MRSA、E. coli和FREC的MIC分别为2、8、4和8 mg/L,对所测细菌的抑制活性优于前期化合物,具有潜在的研究价值。

蛇床子素下调miR-143-3p抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖和胶原合成的实验研究

目的 观察蛇床子素对小鼠肺成纤维细胞(MLF)增殖和胶原合成的影响并探讨其可能的分子机制。方法 体外培养MLF,将其分为对照组、TGF-β1组、低剂量蛇床子素组、中剂量蛇床子素组、高剂量蛇床子素组、anti-miR-NC组、anti-miR-143-3p组、高剂量蛇床子素+miR-NC组、高剂量蛇床子素+miR-143-3p组;RTqPCR检测微小核糖核酸-143-3p(miR-143-3p)的表达水平;MTT检测细胞活力;Western blotting检测蛋白表达。结果 与对照组比较,TGF-β1组MLF的miR-143-3p表达水平、增殖和胶原合成能力显著升高,细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)表达水平显著升高(P <0.05);与TGF-β1组比较,中、高剂量蛇床子素组MLF的miR-143-3p表达水平、增殖和胶原合成能力显著降低,CyclinD1、PCNA、ColⅠ和ColⅢ表达水平显著降低(P <0.05);下调miR-143-3p显著降低MLF的增殖和胶原合成能力,CyclinD1、PCNA、ColⅠ和ColⅢ表达水平显著降低(P <0.05);上调miR-143-3p逆转了蛇床子素对MLF增殖和胶原合成的影响(P <0.05)。结论 蛇床子素可能通过下调miR-143-3p表达抑制小鼠MLF的增殖和胶原合成。

蛇床子素对乳腺癌细胞的放疗增敏作用及其机制

目的探讨蛇床子素(OST)对4T1细胞放疗增敏的作用及其机制。方法4T1细胞经不同浓度OST(25,50,75,100,125,150,175,200μmol/L)处理24 h后用CCK-8法检测细胞活力。将4T1细胞分为IR组和OST(50μmol/L)+IR组,采用克隆平板形成实验检测放疗增敏影响。将4T1细胞分为对照组、OST组(50μmol/L)、IR组(2 Gy)、OST(50μmol/L)+IR(2 Gy)组,TUNEL染色检测细胞凋亡,Western blot检测细胞内Nrf2及NQO1蛋白表达水平变化。结果与0μmol/L OST组相比,不同浓度OST(25,50,75,100,125,150,175,200μmol/L)组4T1细胞的增殖活力明显降低(P<0.05)。与IR组相比,OST+IR组细胞克隆存活分数显著降低(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组细胞的增敏比为1.14。与对照组相比,OST组和IR组细胞凋亡率均增加(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。与对照组相比,OST组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显增加(P<0.05),IR组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与IR组相比,OST+IR组Nrf2及NQO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论蛇床子素可以增加乳腺癌细胞的放疗敏感性,其可能与Nrf2/NQO1通路机制有关。

蛇床子素对脂肪干细胞成膜和成骨能力的影响

研究蛇床子素对脂肪干细胞增殖、细胞膜片形成和成骨分化能力的影响。方法 分离培养C57BL/6小鼠脂肪干细胞(ASCs)并鉴定其多向分化能力;根据细胞培养液中加入蛇床子素的含量(0、10-5、10-6、10-7mol/L)将细胞分为空白对照组、10-5组、10-6组和10-7组。CCK-8 法检测各组细胞增殖水平。用含蛇床子素的成膜诱导液诱导7天收获细胞膜片,冰冻包埋切片后焦油紫染色观察各组膜片厚度。用含蛇床子素的成骨诱导液培养ASCs和ASC膜片,成骨诱导7天后行碱性磷酸酶染色,成骨诱导28天后行茜素红染色,检测其成骨能力。Image J 测量膜片厚度和染色阳性区域面积。结果 蛇床子素对ASCs的增殖没有显著影响;10-7 mol/L蛇床子素可以使ASC膜片显著增厚(P<0.01);成膜诱导与蛇床子素二者联合运用对ASCs成骨能力有更好的促进作用,其中10-7 和10-6mol/L蛇床子素可显著促进ASC膜片的成骨能力(P<0.01),10-7组效果最好。结论 蛇床子素可以促进ASCs的成膜能力;成膜诱导与蛇床子素共同应用对于ASCs的成骨能力具有协同促进效应。

蛇床子素对糖尿病肾病大鼠NF-κB信号通路介导的炎症反应的影响

目的分析蛇床子素对糖尿病肾病大鼠k基因结合核因子(nuclear factor-k-gene binding,NF-κB)信号通路介导的炎症反应的影响。方法选择50只雄性健康SPF级大鼠,采用随机数表法分为空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组共5组;大鼠利用丝裂霉素联合肾脏切除术构建糖尿病肾病大鼠模型;低剂量组大鼠腹腔注射1 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,中剂量组大鼠腹腔注射10 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,高剂量组大鼠腹腔注射50 mg/kg蛇床子素生理盐水溶液,空白组和模型组腹腔注射等体积生理盐水处理;记录各组大鼠治疗过程中一般情况,治疗结束后24 h检测大鼠血清肌酐(serum creatinine,SCr)、24 h尿蛋白总量(24 h-protein,24 h-Pro)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平;取肾脏组织采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)及Masson染色进行干预;采用酶联免疫吸附法检测组织匀浆中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-)1蛋白水平;聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测组织中NF-κB p50、NF-κB p65及NF-κB信使核糖核酸(NF-κB messenger ribonucleic acid,NF-κB mRNA)水平;Western blot法检测肾组织匀浆中NF-κB p50、NF-κB p65及NF-κB蛋白水平。结果对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组大鼠体质量、24 h饮水、24 h饮食及24 h尿量、SCr、24 h-Pro、BUN、FBG、IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1存明显差异,且差异存统计学意义(P<0.05);组间比较分析发现,随使用剂量增加各组大鼠体质量也明显升高,24 h饮水、24 h饮食、24 h尿量、IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1、SCr、24 h Pro、BUN、FBG均明显降低,且差异存在统计学意义(P<0.05);对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组大鼠NF-κB p50、NF-κB p65蛋白及mRNA存明显差异,且差异存统计学意义(P<0.05),组间比较分析发现,随使用剂量增加各组大鼠NF-κB p50、NF-κB p65蛋白及mRNA也明显降低,且差异存在统计学意义(P<0.05);低剂量组、中剂量组、高剂量组及对照组大鼠肾组织HE染色结果显示,其肾小球结构基本正常,偶尔可见少量红细胞,无或轻度肾小球毛细血管扩张,肾小囊内血浆蛋白渗出率较低,可见系膜基质轻度增多,肾小球轻度肥大,少见或不见糖原沉积,系膜区轻度增宽,少见或不见肾小管空泡变形,给药后大鼠病理检测结果显著优于模型组。结论蛇床子素可有效调节糖尿病肾病大鼠NF-κB信号通路抑制体内炎症反应,并改善大鼠病理改善特征。

蛇床子素通过Nrf2-Gpx4铁死亡途径对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的改善作用

目的探讨蛇床子素对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的影响及其机制。方法大鼠随机分为正常组、模型组、蛇床子素低剂量组(20 mg/kg)、蛇床子素高剂量组(40 mg/kg)、蛇床子素+ML385组(蛇床子素40 mg/kg+Nrf2抑制剂ML38530 mg/kg),每组12只。除正常组外,其余大鼠采用经鼻反复感染肺炎支原体构建肺炎模型,给予相应药物干预后,ELISA法检测血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平,HE染色观察肺组织病理学变化,检测肺组织MDA、GSH、Fe^(2+)水平和SOD活性,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡率,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平和肺组织炎症浸润评分、MDA、Fe^(2+)水平、细胞凋亡率均升高(P<0.05),肺组织GSH水平、SOD活性、Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05);与模型组比较,蛇床子素各剂量组大鼠血清MP-IgM、IL-6、TNF-α水平和肺组织炎症浸润评分、MDA、Fe^(2+)水平、细胞凋亡率均降低(P<0.05),肺组织GSH水平、SOD活性、Nrf2、SLC7A11、Gpx4 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05);ML385可减弱蛇床子素对肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤的保护作用(P<0.05)。结论蛇床子素可改善肺炎支原体肺炎大鼠肺损伤,其作用机制可能与激活Nrf2-Gpx4信号通路,抑制铁死亡有关。

蛇床子素通过调控miR⁃26a表达对人牙周膜干细胞生物学特性的影响

目的探究蛇床子素通过调控miR-26a表达对人牙周膜干细胞(PDLSCs)生物学特性的影响及其相关机制。方法体外培养PDLSCs细胞,以不同浓度蛇床子素(0、1×10^(-4)、1×10^(-5)、1×10^(-6)、1×10^(-7)mol/L)进行干预,筛选适宜浓度;另将细胞分为蛇床子素(1×10^(-5)mol/L)+anti-miR-NC组、蛇床子素(1×10^(-5)mol/L)+anti-miR-26a组。采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测细胞活力和增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-26a表达,蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP2)、基质金属蛋白酶(MMP9)蛋白表达。结果与对照组比较,1×10^(-5)mol/L蛇床子素组细胞OD值、迁移数、miR-26a表达和Ki-67、PCNA蛋白表达升高(P<0.05),MMP2、MMP9蛋白表达降低(P<0.05)。与蛇床子素+anti-miR-NC组比较,蛇床子素+anti-miR-26a组细胞OD值、迁移数、miR-26a表达和Ki-67、PCNA蛋白表达降低(P<0.05),MMP2、MMP9蛋白表达升高(P<0.05)。结论蛇床子素可能通过上调miR-26a表达促进PDLSCs细胞的增殖和迁移。

新型二硫醚蛇床子素衍生物的合成及抗增殖活性

为寻找高效低毒的抗肿瘤先导化合物,依据药物分子设计中的拼合原理,设计合成系列含二硫醚单元的蛇床子素衍生物,利用核磁共振氢谱和碳谱对其结构及性质进行表征和分析。采用MTT法对目标化合物进行体外抗肿瘤活性测试,结果显示目标化合物对各肿瘤细胞均具有一定的抑制活性。其中,对MCF-7细胞最为敏感,化合物的IC50值在10.8~17.1μmol·L^(-1)之间,其中5a的IC_(50)为10.8μmol·L^(-1),强于氟脲嘧啶(20.8μmol·L^(-1))和顺铂(13.9μmol·L^(-1))。初步构效关系表明,目标化合物对各肿瘤细胞增殖的抑制活性随着R直链烷烃上碳原子的增多而逐渐降低,当R为甲基时,目标化合物的抗增殖活性显著提高。

蛇床子素通过PI3K/Akt/mTOR通路对糖尿病肾病大鼠纤维化及HSP90、SIRT1的影响

目的 研究蛇床子素对糖尿病肾病大鼠磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素蛋白(mTOR)信号通路对及热休克蛋白(Hsp)90、沉默信息调节因子(SIRT)1的影响。方法 将糖尿病肾病模型大鼠随机分为5组:模型组和灌胃蛇床子素1、10、20和50 mg/(kg·d)组,正常组和模型组分别给予相同体积的生理盐水。于给药8 w后,测定大鼠血糖变化和24 h尿微量白蛋白;取血检测大鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),并计算肌酐清除率(Ccr)。采用RT-聚合酶链反应(PCR)检测大鼠肾脏组织SIRT1、Hsp90α和Hsp90β mRNA及蛋白表达情况;观察大鼠肾脏组织病理变化;采用Western印迹法测定纤维化相关蛋白:肾脏Ⅳ型胶原蛋白、纤联蛋白(FN)和基质金属蛋白酶(MMP)抑制剂(TIMP)-1、MMP-9及PI3K、Akt蛋白表达。结果 模型组血糖、尿微量白蛋白、Scr、BUN、PI3K、Akt、肾脏Ⅳ型胶原蛋白、FN和TIMP-1水平均显著高于正常组(P<0.05),Ccr、SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白、MMP-9水平显著低于正常组(P<0.05)。与模型组相比,治疗组Scr和BUN水平均降低,Ccr水平均增加,当剂量达到20和50 mg/(kg·d)时,差异显著(P<0.05)。与模型组相比,治疗组PI3K和Akt水平均降低,且具有剂量依赖性,剂量达到10、20、50 mg/(kg·d)时,PI3K明显降低(P<0.05);剂量达到1、10、20、50 mg/(kg·d),Akt明显降低(P<0.05)。各治疗组与模型组相比,SIRT1 mRNA、SIRT1蛋白、MMP-9表达水平均显著增加,肾脏Ⅳ型胶原蛋白、FN、TIMP-1水平、血糖及尿微量白蛋白均显著降低(P<0.05);各组Hsp90α和Hsp90β mRNA及Hsp90α和Hsp90β蛋白表达水平均无显著差异(P>0.05)。与正常组相比模型组肾小球肥大,肾小球数量增加,伴有肾小球系膜扩张和基底膜厚度增加,肾小管有空泡变形。治疗组肾小球肥大、增生及系膜扩张和基底膜变后现象均较轻,其中高剂量治疗组改善最显著。结论 蛇床子素可以降低糖尿病肾病大鼠尿微量白蛋白,降低肾组织病理损伤,可能与PI3K/Akt/mTOR通路有关,且可以上调SIRT1表达水平,降低肾纤维化,对HSP90表达水平无明显关系。

蛇床子素对口腔癌KB细胞周期进程及凋亡的影响

目的研究蛇床子素对口腔癌KB细胞周期进程、凋亡的影响。方法CCK-8法检测KB细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期进程及凋亡率,RT-qPCR法检测细胞c-myc、cyclin A、cyclin D1 mRNA表达,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,ELISA法检测细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性,Western blot法检测细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果与对照组比较,40、80、160μg/mL蛇床子素作用24、48、72 h后,KB细胞增殖抑制率均升高(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,40、80、160μg/mL蛇床子素组作用48 h后,G_(0)/G_(1)细胞比例、细胞凋亡率、caspase-3、caspase-8、caspase-9活性均升高(P<0.05,P<0.01),细胞核染色质浓缩现象明显,而c-myc、cyclin A、cyclin D1 mRNA表达和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论蛇床子素可以抑制口腔癌KB细胞的增殖,该作用与抑制JAK2/STAT3信号通路活化,促进细胞周期进程阻滞及凋亡有关。

蛇床子素调控LncRNA SNHG5对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 探讨蛇床子素对高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、炎症反应的影响及其对长链非编码RNA(LncRNA)SNHG5的调控作用。方法 采用高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2建立细胞损伤模型,用不同浓度的蛇床子素处理HK-2细胞;pcDNA、pcDNA-SNHG5转染HK-2细胞后加入30 mmol/L葡萄糖处理细胞;si-NC、si-SNHG5分别转染HK-2细胞后加入100 nmol/L蛇床子素与30 mmol/L葡萄糖的处理细胞;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG5的表达量;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞活力、凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的水平。结果 蛇床子素处理高糖诱导的HK-2细胞后可明显提高SNHG5的表达水平,明显增强细胞活力,而明显降低凋亡率、TNF-α、IL-6的水平(P<0.05);高糖诱导的HK-2细胞中转染pcDNA-SNHG5后细胞活力明显升高,而凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05);转染si-SNHG5与蛇床子素联合处理高糖诱导的HK-2细胞后细胞活力明显降低,而凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显升高(P<0.05)。结论 蛇床子素可通过促进SNHG5的表达增强细胞增殖能力而抑制细胞凋亡及炎症反应从而减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。

秦皮乙素/蛇床子素的晶体结构研究

报道了香豆素类药物秦皮乙素的两种同质异晶和蛇床子素的晶体结构,这三种晶体结构(同质异晶1-2和蛇床子素3)同属单斜晶系,其中,同质异晶1和蛇床子素3属C2/c空间群,而同质异晶2则属P21/c空间群.同质异晶1-2中的秦皮乙素分子分别以不同类型的传统O—H…O强氢键构建出沿不同方向延伸的一维链状结构,而蛇床子素3则主要靠C—H…O弱氢键与范德华力结合形成稳定的晶体结构.

氨基寡糖素与嘧菌酯和蛇床子素联用在马铃薯黑痣病和晚疫病防治中的应用效果评价

通过盆栽试验评价了氨基寡糖素与嘧菌酯和蛇床子素联用对马铃薯(Solanum tuberosum)黑痣病和晚疫病的防效,并对表现突出的施药配方进行了田间防效评价。结果表明,氨基寡糖素对马铃薯黑痣病和晚疫病表现出一定的防效,但是在200μg/mL的浓度范围内防效表现较差,盆栽防效均低于40%,氨基寡糖素浓度为200μg/mL时田间对晚疫病防效为20.01%。此外,氨基寡糖素使用后延迟接菌时间有助于提高防效。试验结果还表明,氨基寡糖素与嘧菌酯或蛇床子素混用均能够提升对黑痣病和晚疫病的盆栽防效,其中,氨基寡糖素与嘧菌酯2∶1和4∶1(浓度比)混用对晚疫病的防效具有明显的增效作用,防效分别为68.49%和78.08%;氨基寡糖素与嘧菌酯或蛇床子素间隔使用也能够提升对黑痣病和晚疫病的盆栽防效,其中,氨基寡糖素与嘧菌酯2∶1和4∶1间隔使用对晚疫病的防效分别为73.68%和85.53%,防效显著优于混用防效。田间防效结果表明,氨基寡糖素与嘧菌酯混用和间隔使用防效与嘧菌酯推荐剂量防效相当,分别为78.44%、82.37%和82.19%。从经济和人力成本考虑,氨基寡糖素与嘧菌酯混用可能是一种更有效的防治措施。