原发性骨肉瘤中γ-synuclein的表达

目的:检测γ-synuclein在原发性骨肉瘤组织中的表达水平,探讨γ-synuclein对原发性骨肉瘤的诊断价值。方法:选取我院骨科2004年1月至2005年12月收治的31例原发性骨肉瘤患者及10例良性骨肿瘤患者的病理组织,用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测γ-synuclein的表达水平。结果:全部31例原发性骨肉瘤病例仅有1例女性患者无γ-synuclein的表达,其余患者均有γ-synuclein的表达或高表达,阳性率为96．8％;10例良性骨肿瘤组织中均未见γ-synuclein表达。γ-Synucle- in表达的阳性率与年龄、性别无关。结论:γ-Synuclein可能是原发性骨肉瘤的肿瘤标志物,在原发性骨肉瘤的诊断、分型和预后中有积极的临床指导意义。

p53基因在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨p53基因在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化方法(S-P法)测定p53蛋白在36例骨肉瘤和17例骨软骨瘤组织中的表达,并随访骨肉瘤患者生存时间。36例骨肉瘤中男19例,女17例,年龄平均19.9岁。Ennek ing分期Ⅱa3例,Ⅱb27例,Ⅲb6例,并发病理性骨折7例。结果:36例骨肉瘤随访时间平均3年6个月,其中存活3年及以上者13例,存活3年以下者23例,死亡病例均因骨肉瘤远处转移全身衰竭致死。36例骨肉瘤p53蛋白阳性表达率为52.8%,显著高于骨软骨瘤组,有显著性差异(P<0.01)。p53蛋白表达在不同Ennek ing外科分期组间无显著性差异(P>0.05),在生存时间3年以上组及3年以下组间有显著性差异(P<0.01)。结论:p53基因突变对骨肉瘤的发病可能产生影响,对患者预后评估具有一定价值。

TP/PD-ECGF与VEGF在骨肉瘤中的表达与肺转移的关系

目的:探讨TP/PD-ECGF与VEGF在骨肉瘤组织中的表达与骨肉瘤病理分级、肺转移的关系。方法:采用免疫组织化学SP法,检测50例骨肉瘤标本中TP/PD-ECGF与VEGF的表达,并分析TP/PD-ECGF、VEGF表达与病理分级及肺转移的关系。结果:TP/PD-ECGF和VEGF在骨肉瘤中的阳性表达呈正相关;TP/PD-ECGF和VEGF在骨肉瘤中的表达与病理分级无统计学意义,但与肺转移显著相关。结论:TP/PD-ECGF与VEGF在骨肉瘤中有不同程度的高表达,并与骨肉瘤肺转移密切相关,可联合作为评价骨肉瘤患者预后的一项客观指标。

骨肉瘤中胸苷磷酸化酶的表达与血管生成的关系

目的:研究胸苷磷酸化酶/血小板衍化内皮细胞生长因子(TP/PD-ECGF)在骨肉瘤组织中的表达与微血管密度(MVD)的关系及其临床病理意义。方法:应用免疫组织化学SP法,检测54例骨肉瘤组织中TP/PD-ECGF的表达,CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞计数骨肉瘤MVD。结果:骨肉瘤TP/PD-ECGF表达程度与MVD呈正相关,骨肉瘤TP/PD-ECGF低表达组、中表达组、高表达组的MVD计数有统计学差异;骨肉瘤TP/PD-ECGF表达与骨肉瘤临床病理因素无统计学关联,但与是否肺转移显著相关。结论:TP/PD-ECGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子,在骨肉瘤肺转移中起一定作用。

lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用及其机制

目的:探讨lncRNA-MIAT对肿瘤相关巨噬细胞M2型极化的作用,并阐明其可能的作用机制。方法:体外培养THP-1细胞,将过表达(LV-MIAT)与下调lncRNA-MIAT表达(LVshMIAT)的慢病毒颗粒及空载体(LV-Vector)转染入THP-1细胞中,将THP-1细胞诱导活化为巨噬细胞,并采用Transwell共培养体系将活化后的巨噬细胞与骨肉瘤(OS)MG63细胞共培养,将上述共培养体系分为MG63+LV-Vector组(阳性对照组)、MG63+LV-shMIAT组、MG63+LVMIAT组和IL-4+LV-Vector组。检测各组THP-1细胞中lncRNA-MIAT表达水平,流式细胞术检测各组细胞中M2型巨噬细胞百分率,ELISA法检测各组THP-1细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素4(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平,检测各组HUVEC中血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)、Notch1和δ样蛋白4(DLL4)表达水平。取各培养体系中的巨噬细胞与人脐静脉内皮血管细胞(HUVEC)共培养,EDU染色法检测各组HUVEC增殖活力,成管实验检测HUVEC血管形成数。Western blotting法检测各组THP1中Janus激酶1(JAK1)、信号传导及转录激活蛋白6(STAT6)和磷酸化STAT6(p-STAT6)蛋白表达水平,并计算p-STAT6/STAT6比值。构建OS荷瘤小鼠模型,并将36只荷瘤小鼠分为LV-Vector组、LV-shMIAT组和LV-MIAT组(n=12)。检测干扰lncRNA-MIAT表达后各组小鼠肿瘤体积和质量及肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率。结果:采用慢病毒感染成功建立稳定过表达或下调lncRNA-MIAT的THP-1细胞。与LVVector组比较,LV-shMIAT组细胞中lncRNA-MIAT表达水平明显降低(P<0.05),LV-MIAT组细胞中lncRNA-MIAT表达水平明显升高(P<0.05)。与MG63+LV-Vector组比较,MG63+LVshMIAT组THP-1细胞中VEGF、IL-10和TGF-β1水平明显降低(P<0.05),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平明显降低(P<0.05),MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组THP-1细胞中VEGF、IL-10和TGF-β1水平明显升高(P<0.05或P<0.01),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平明显升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分率、THP-1细胞中p-STAT6/STAT6比值和JAK1蛋白表达水平升高(P<0.05);与MG63+sh-MIAT组比较,MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组THP-1细胞中VEGF水平明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β1水平明显升高(P<0.05),HUVEC中VEGFR2、Notch1和DLL4蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与MG63+LV-Vector组比较,MG63+LV-shMIAT组HUVEC的增殖活力与血管形成数均明显降低(P<0.05),MG63+LV-MIAT组和IL-4+LV-Vector组HUVEC的增殖活力与血管形成数均明显升高(P<0.05)。裸鼠体内成瘤实验,与LV-Vector组比较,LV-MIAT组小鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05),肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率明显升高(P<0.05);LVshMIAT组小鼠移植瘤体积和质量、肿瘤组织中CD163和CD31阳性表达率均明显降低(P<0.05)。与LV-shMIAT组比较,LV-MIAT组小鼠移植瘤体积和质量明显升高(P<0.05),肿瘤组织中CD163与CD31阳性表达率明显升高(P<0.05)。结论:lncRNA MIAT可能通过促进巨噬细胞的M2极化和上调肿瘤组织血管生成,参与调控OS进展。

MR扩散成像ADC值在骨肉瘤化疗评估中的作用

目的探讨MR扩散成像ADC值的测量在骨肉瘤化疗疗效评估中的作用。方法选取35例确诊为骨肉瘤患者化疗前后和11例正常患者的MR图像,分析扩散成像ADC值进行比较。结果肿瘤化疗前后最大径依次为(5.84±1.85)cm和(5.77±1.45)cm,差异无统计学意义(P>0.5),正常组织、化疗前后的骨肿瘤和软组织肿块表观弥散系数ADC值依次为(0.498±0.212)、(0.466±0.311)、差异有统计学意义(P<0.01)。肿瘤化疗前后ADC值分别为(1.170±0.182)和(1.847±0.198),差异有统计学意义(P<0.05)。骨外软组织肿块ADC值化疗前后分别为(1.110±0.123)和(1.762±0.122),差异有统计学意义(P<0.01)。正常组骨髓和软组织的ADC值为(0.498±0.212)和(0.466±0.311),其与肿瘤化疗前肿瘤组织和软组织肿块之间均有统计学意义(P<0.05)。按照疗效评估标准,TVNR>90%,占82.89%(29/35)。结论 MR扩散成像ADC值的测量可对骨肉瘤治疗效果进行评价。