柑橘黄龙病菌外膜蛋白的诱导表达

柑橘黄龙病病菌的外膜蛋白(omp)极易被宿主免疫系统识别为外来物质,所以其被用制备抗体来检测柑橘黄龙病菌.本实验中截取了omp基因上的一段长为1 071 bp的片段,将其连接到p GEX6P1载体中制成了重组质粒omps-6p1进行原核诱导表达.结果表明,重组质粒可成功诱导出目的蛋白.

布鲁菌17KD膜蛋白的原核表达与初步鉴定

以马耳他布鲁菌基因组为模板,设计引物,扩增17KD膜蛋白基因全长,获得422bp长的片段。将该片段直接克隆于原核表达载体PGEX-4T-2,成功构建阳性重组表达载体。IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测,在大肠杆菌中成功表达大小为43KD的蛋白,并且该蛋白与布鲁菌病临床阳性动物血清产生特异性结合反应。通过17KD蛋白的成功表达,试图评价该蛋白在布鲁菌病诊断用抗原及基因工程疫苗研制过程中应用的可行性。

鼠伤寒患者血清中鼠伤寒杆菌外膜蛋白抗体的分析

本文对鼠伤寒患者抗鼠伤寒杆菌外膜蛋白（ＯＭＰ）的体液免疫应答进行了分析，发现恢复期患者血清中存在高效价的ＯＭＰ抗体，而且以ＩｇＧ型抗体为主（＞１：５１２０）。免疫印迹试验（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）分析恢复期血清识别的主要是３６ＫＤ蛋白带，即微孔蛋白（Ｐｏｒｉｎ）。提示ＯＭＰ有可能用于诊断鼠伤寒杆菌感染及作为保护性抗原制备亚单位疫苗。