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Application of extracellular vesicles from mesenchymal stem cells promotes hair growth by regulating human dermal cells and follicles
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作者 Ramya Lakshmi Rajendran Prakash Gangadaran +5 位作者 Mi Hee Kwack Ji Min Oh Chae Moon Hong Young KwanSung Jaetae Lee Byeong-Cheol Ahn 《World Journal of Stem Cells》 SCIE 2022年第7期527-538,共12页
BACKGROUND Dermal papillae(DP)and outer root sheath(ORS)cells play important roles in hair growth and regeneration by regulating the activity of hair follicle(HF)cells.AIM To investigate the effects of human mesenchym... BACKGROUND Dermal papillae(DP)and outer root sheath(ORS)cells play important roles in hair growth and regeneration by regulating the activity of hair follicle(HF)cells.AIM To investigate the effects of human mesenchymal stem cell-derived extracellular vesicles(hMSC-EVs)on DP and ORS cells as well as HFs.EVs are known to regulate various cellular functions.However,the effects of hMSC-EVs on hair growth,particularly on human-derived HF cells(DP and ORS cells),and the possible mechanisms underlying these effects are unknown.METHODS hMSC-EVs were isolated and characterized using transmission electron microscopy,nanoparticle tracking analysis,western blotting,and flow cytometry.The activation of DP and ORS cells was analyzed using cellular proliferation,migration,western blotting,and real-time polymerase chain reaction.HF growth was evaluated ex vivo using human HFs.RESULTS Wnt3a is present in a class of hMSC-EVs and associated with the EV membrane.hMSC-EVs promote the proliferation of DP and ORS cells.Moreover,they translocateβ-catenin into the nucleus of DP cells by increasing the expression ofβ-catenin target transcription factors(Axin2,EP2 and LEF1)in DP cells.Treatment with hMSC-EVs also promoted the migration of ORS cells and enhanced the expression of keratin(K)differentiation markers(K6,K16,K17,and K75)in ORS cells.Furthermore,treatment with hMSC-EVs increases hair shaft elongation in cultured human HFs.CONCLUSION These findings suggest that hMSC-EVs are potential candidates for further preclinical and clinical studies on hair loss treatment. 展开更多
关键词 Mesenchymal stem cells Extracellular vesicles hair growth Dermal papillae outer root sheath cells
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人毛囊外根鞘细胞的分离及培养 被引量:11
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作者 张群 杨光辉 +4 位作者 丛笑倩 崔磊 张文杰 刘伟 曹谊林 《组织工程与重建外科杂志》 2006年第2期79-82,共3页
目的建立毛囊外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊,采用组织块法和消化法进行细胞培养,倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,培养各代细胞做生长曲线,RT-PCR检测干细胞相对特异性标识分子K15和细胞分... 目的建立毛囊外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊,采用组织块法和消化法进行细胞培养,倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,培养各代细胞做生长曲线,RT-PCR检测干细胞相对特异性标识分子K15和细胞分化标识分子外皮蛋白的mRNA表达情况。结果组织块法和消化法均能培养出毛囊外根鞘细胞,并可传代培养,组织块法细胞生长慢,不易汇合,消化法细胞增殖快。各代细胞中K15和外皮蛋白mRNA均有表达。结论消化法适合毛囊外根鞘细胞的体外培养,该方法的建立为进一步分离纯化培养毛囊干细胞奠定了基础。 展开更多
关键词 人毛囊 外根鞘细胞 细胞培养 hair follicle 组织块法 消化法 透射电镜观察 毛囊干细胞 培养方法 蛋白 相对特异性 倒置显微镜 细胞增殖 细胞形态 细胞生长 细胞分化 体外培养 生长曲线 分子 纯化培养
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人头皮毛囊外根鞘无色素黑素细胞的分离和纯化培养进一步研究 被引量:7
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作者 马慧军 朱文元 +1 位作者 王大光 张汝芝 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期76-79,共4页
目的从人头皮毛囊外根鞘分离纯化培养无色素黑素细胞。方法采用两步酶法0.50%分离酶和0.50%胶原酶Ⅴ获得游离的毛囊,高浓度0.50%胰酶30min消化游离的毛囊外根鞘细胞,并以优化的培养基进行细胞培养。用HMB-45和NKI/beteb单克隆抗体免疫... 目的从人头皮毛囊外根鞘分离纯化培养无色素黑素细胞。方法采用两步酶法0.50%分离酶和0.50%胶原酶Ⅴ获得游离的毛囊,高浓度0.50%胰酶30min消化游离的毛囊外根鞘细胞,并以优化的培养基进行细胞培养。用HMB-45和NKI/beteb单克隆抗体免疫组化染色、透射电镜对培养物进行鉴定。结果培养物中初始贴壁细胞大多数为无色素黑素细胞,仅有少量的角质形成细胞,无成纤维细胞污染。经二次传代差别胰酶处理很容易去除角质形成细胞。取培养3周的细胞经免疫组化和透射电镜鉴定证实为无色素黑素细胞。传3代后细胞得到完全纯化。结论两步酶法结合高浓度的胰蛋白酶处理细胞可彻底清除成纤维细胞,获得无色素黑素细胞的纯培养。 展开更多
关键词 无色素黑素细胞 细胞培养 成纤维细胞 毛囊外根鞘
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人毛囊细胞来源双层皮肤替代物的构建和组织学特征 被引量:5
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作者 朱堂友 郝飞 +3 位作者 伍津津 毕建军 吴国选 杨涛 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1187-1189,共3页
目的探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征。方法用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物,分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征。结果毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧... 目的探索人毛囊细胞构建的双层皮肤替代物的组织学特征。方法用毛乳头细胞、真皮鞘细胞分别与外根鞘细胞构建复合壳多糖双层皮肤替代物,分析其体外和移植至大白鼠后的组织学特征。结果毛囊来源细胞构建的皮肤替代物中表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团形成。结论毛囊细胞是构建皮肤替代物的良好细胞来源。 展开更多
关键词 毛囊 毛乳头细胞 真皮鞘细胞 外根鞘细胞 皮肤组织工程
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VEGF对体外培养绒山羊次级毛囊外根鞘细胞的影响 被引量:7
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作者 张婧婧 王德光 +4 位作者 周小兵 高晔 何晓琳 陈玉林 张恩平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1124-1133,共10页
本研究旨在探讨陕北白绒山羊毛囊外根鞘细胞的培养和VEGF对次级毛囊外根鞘细胞增殖、分化及细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、角蛋白10(K10)和成纤维细胞生长因子5(FGF5)mRNA表达量的影响。采集绒山羊体侧部皮肤,并利用消化等方法分离次级... 本研究旨在探讨陕北白绒山羊毛囊外根鞘细胞的培养和VEGF对次级毛囊外根鞘细胞增殖、分化及细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、角蛋白10(K10)和成纤维细胞生长因子5(FGF5)mRNA表达量的影响。采集绒山羊体侧部皮肤,并利用消化等方法分离次级毛囊外根鞘细胞,置于37℃、5%CO_2、饱和湿度条件下培养;选用第5代次级毛囊外根鞘细胞,添加不同质量浓度血管内皮生长因子(VEGF),分别处理24、48h,噻唑兰比色法(MTT)检测细胞活力,EdU核酸标记技术检测细胞增殖;实时荧光定量PCR技术检测PCNA、K 10、FGF5mRNA的表达情况。结果显示:1)成功培养出次级毛囊外根鞘细胞,CK17和CK15细胞免疫组化呈阳性。2)VEGF可以促进绒山羊次级毛囊外根鞘细胞的增殖。相同浓度VEGF处理48h组的细胞活力极显著高于处理24h组(P<0.01);在48h处理组中,100ng·mL^(-1)组的细胞活力极显著高于对照组、1ng·mL^(-1)组、10ng·mL^(-1)组(P<0.01),并显著高于50ng·mL^(-1)组(P<0.05),50ng·mL^(-1)组的细胞活力显著高于对照组(P<0.05);100ng·mL^(-1)组和50ng·mL^(-1)组增殖细胞比例均极显著高于对照组、1ng·mL^(-1)组、10ng·mL^(-1)组(P<0.01),100ng·mL^(-1)组显著高于50ng·mL^(-1)组(P<0.05)。3)PCNA、K10、FGF5mRNA在次级毛囊外根鞘细胞中均有表达。在VEGF处理48h时,PCNA mRNA的表达量100ng·mL^(-1)组最高,极显著高于对照组(P<0.01),显著高于10ng·mL^(-1)组(P<0.05);K10mRNA的表达量对照组最高,极显著高于10ng·mL^(-1)组与100ng·mL^(-1)组(P<0.01);FGF5mRNA的表达量对照组最高,极显著高于100ng·mL^(-1)组(P<0.01)。综上表明,本研究成功分离培养了陕北白绒山羊次级毛囊外根鞘细胞;VEGF能够促进次级毛囊外根鞘细胞的增殖,抑制细胞的分化;VEGF可能通过抑制次级毛囊外根鞘细胞中FGF5基因的表达而促进毛囊生长。 展开更多
关键词 绒山羊 血管内皮生长因子 次级毛囊外根鞘细胞 增殖 成纤维细胞生长因子5 MRNA表达
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外毛根鞘无色素性黑素细胞的免疫组化研究 被引量:6
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作者 谭城 朱文元 鲁严 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第2期65-67,共3页
目的初步探讨外毛根鞘处于静息状态的无色素性黑素细胞(AMMC)生物学特性。方法取正常人头皮,采用NK I/beteb,HMB-45和TYR(酪氨酸酶),TRP1(酪氨酸酶相关蛋白1),TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2)抗体特异染色黑素细胞后,研究AMMC分布、形态和NK I/... 目的初步探讨外毛根鞘处于静息状态的无色素性黑素细胞(AMMC)生物学特性。方法取正常人头皮,采用NK I/beteb,HMB-45和TYR(酪氨酸酶),TRP1(酪氨酸酶相关蛋白1),TRP2(酪氨酸酶相关蛋白2)抗体特异染色黑素细胞后,研究AMMC分布、形态和NK I/beteb,HMB-45,TYR,TRP1和TRP2等黑素细胞分化标记分子的表达情况。结果外毛根鞘HMB-45,TYR,TRP1,TRP2四种抗体呈阴性;NK I/beteb阳性染色的细胞位于生长期毛囊外毛根鞘的中段,通常平皮脂腺水平或在其之下,这些NK I/beteb阳性细胞就是AMMC,AMMC数目较少,常成群集中分布,外观胞体偏圆,树突不明显,形态类似于周边的毛皮质细胞。结论AMMC位于外毛根鞘的中下段,形态和功能上均不成熟。 展开更多
关键词 外毛根鞘 无色素性黑素细胞 毛囊
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人毛囊外根鞘隆起、真皮鞘和毛乳头细胞高效同步分离培养的方法 被引量:3
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作者 周洪军 胡志奇 +1 位作者 谭挺 孙锡金 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期193-195,共3页
目的寻求一种快速高效同步分离培养人头皮毛囊外根鞘隆起(Bulge)细胞、真皮鞘细胞和毛乳头细胞的方法。方法将人头皮标本剪成小块,中性蛋白酶中37℃孵育2h后镜下将带外根鞘的毛干从真皮鞘中拔出,组织块法培养外根鞘隆起(Bulge)细胞... 目的寻求一种快速高效同步分离培养人头皮毛囊外根鞘隆起(Bulge)细胞、真皮鞘细胞和毛乳头细胞的方法。方法将人头皮标本剪成小块,中性蛋白酶中37℃孵育2h后镜下将带外根鞘的毛干从真皮鞘中拔出,组织块法培养外根鞘隆起(Bulge)细胞;从真皮-皮下组织交界处横断头皮,拔出含毛乳头的真皮鞘,胶原酶D37℃孵育6-8h,多次低速离心,毛乳头沉淀重悬后培养,收集的真皮鞘细胞上清液经高速离心后重悬培养;培养的细胞分别用K19或α-平滑肌动蛋白组化鉴定。结果同一标本可获得纯化的外根鞘Bulge细胞,真皮鞘细胞和毛乳头细胞。结论将现有的分离方法改进和综合运用,可以从同一毛囊标本同步高效获取3种成分细胞。 展开更多
关键词 外根鞘隆起 毛乳头 真皮鞘 细胞培养 毛囊
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人毛囊外根鞘及毛乳头细胞的迁移和生长观察 被引量:3
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作者 程赛 张汝芝 +4 位作者 朱静 徐春兴 金慧玲 柳琦 刘小明 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期32-35,共4页
目的连续观察成人头皮毛囊外根鞘(ORS)和毛乳头(DP)细胞的生长及形态学变化。方法利用两步酶消化获得正常人头皮毛囊的ORS和DP,采用添加HKGS和HMGS的K-SFM进行体外培养,倒置显微镜下连续观察毛囊ORS和DP的迁移和生长。结果将单个毛囊置... 目的连续观察成人头皮毛囊外根鞘(ORS)和毛乳头(DP)细胞的生长及形态学变化。方法利用两步酶消化获得正常人头皮毛囊的ORS和DP,采用添加HKGS和HMGS的K-SFM进行体外培养,倒置显微镜下连续观察毛囊ORS和DP的迁移和生长。结果将单个毛囊置于预先涂布血清的培养板2h,然后添加少量培养基,毛囊黏附于培养板的几率增加,数小时后,即可见细胞从ORS及DP处迁移生长,以角质形成细胞(KCs)、成纤维细胞(FBs)为主,黑素细胞(MCs)较少。并且,ORS和DP的迁出和生长有明显不同。如果培养基过多,则多数毛囊悬浮,无细胞迁出,最终死亡。结论预先涂布血清和开始仅添加少量培养基,有利于毛囊黏附,随后细胞迁移生长。 展开更多
关键词 毛囊 外根鞘 毛乳头 培养
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毛囊混合细胞诱导毛囊重建的研究 被引量:3
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作者 陈欣玥 何黎 +4 位作者 刘玲 顾华 李坤杰 杨汝斌 邓利丽 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第1期15-17,共3页
目的分离培养人毛囊外根鞘细胞株(ORSC)和人毛囊毛乳头(DPC),在体内和体外诱导毛囊形成。方法利用酶消化法和组织块法获得第三代DPC和ORSC,将上述两种细胞混合后接种于海藻酸钠3D细胞支架,构建毛囊的体外三维模型,同时将该三维模型移植... 目的分离培养人毛囊外根鞘细胞株(ORSC)和人毛囊毛乳头(DPC),在体内和体外诱导毛囊形成。方法利用酶消化法和组织块法获得第三代DPC和ORSC,将上述两种细胞混合后接种于海藻酸钠3D细胞支架,构建毛囊的体外三维模型,同时将该三维模型移植入SD大鼠皮下,8周后移植部位取材,行HE染色、免疫组化和电镜观察毛囊形成情况。结果 SD大鼠移植部位取材,HE染色可见细胞聚集成团状的毛囊样结构,CK14,CK15和波形蛋白染色阳性,电镜下可见支架中有散在细胞分布。结论 SD大鼠体内三维模型培养,证明在该模型中诱导出了具有向毛囊分化倾向的毛囊样结构,为以后成功重建毛囊做出了有益探索。 展开更多
关键词 外根鞘细胞 毛乳头细胞 毛囊 组织工程
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尿激酶型纤溶酶原激活物在毛囊中的表达 被引量:2
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作者 崔志鸿 杨恬 +1 位作者 连小华 余瑾 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第10期956-957,共2页
目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (urokinase typeplasminogenactivator,uPA)在毛囊发育过程中的原位表达及在体外培养的毛囊细胞中的表达。方法 用免疫细胞化学 (immunocytochemistry ,ICC)和原位杂交 (insituhybridization ,ISH)... 目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物 (urokinase typeplasminogenactivator,uPA)在毛囊发育过程中的原位表达及在体外培养的毛囊细胞中的表达。方法 用免疫细胞化学 (immunocytochemistry ,ICC)和原位杂交 (insituhybridization ,ISH)技术研究了人及小鼠在毛囊生长周期的不同时期uPA的表达 ;体外培养小鼠毛囊外根鞘 (outerrootsheath ,ORS)细胞并用ICC方法研究了ORS细胞uPA的表达。结果 在毛囊生长期的早期 (即毛囊形成期 ) ,毛囊角质形成细胞 (keratinocyte,Kc)表达uPA ,而其它时期均不表达 ;体外培养的ORS有uPA表达。结论 uPA与Kc的快速增殖和迁移相关 ,在毛囊的发育中起重要作用。 展开更多
关键词 尿激酶型纤溶酶原激活物 毛囊 外根鞘 原位表达 免疫细胞化学 原位杂交技术 小鼠
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在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的初步研究 被引量:2
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作者 朱堂友 郝飞 +2 位作者 伍津津 毕建军 杨涛 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第10期932-934,共3页
目的探索人毛乳头细胞和外根鞘细胞在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的可能性。方法用毛乳头细胞和与外根鞘细胞构建复方壳多糖双层皮肤替代物,观察其体外和大白鼠移植后的组织学特征。结果体外毛乳头细胞和外根鞘细胞构建的皮肤替代物... 目的探索人毛乳头细胞和外根鞘细胞在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成的可能性。方法用毛乳头细胞和与外根鞘细胞构建复方壳多糖双层皮肤替代物,观察其体外和大白鼠移植后的组织学特征。结果体外毛乳头细胞和外根鞘细胞构建的皮肤替代物表皮细胞排列更紧密、角化突出,真皮内可见与表皮相连的上皮细胞柱及球形膨大细胞团。但移植后未见肯定的毛囊样结构形成。结论目前的细胞培养技术尚不能在双层皮肤替代物中诱导毛囊形成。 展开更多
关键词 毛囊 毛乳头细胞 外根鞘细胞 皮肤组织工程
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c-Myc在小鼠同步化毛囊周期中的表达 被引量:2
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作者 王宁 杨恬 +3 位作者 李进 雷明星 石家仲 连小华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期439-441,共3页
目的探明转录因子c-Myc在同步化之后的小鼠毛囊周期中表达的规律及可能意义。方法通过经典的松蜡合剂脱毛法使小鼠背皮毛囊周期同步化,分别采用免疫组织化学、RT-PCR、Western blot检测c-Myc在毛囊周期不同时相点(拔毛后5、10、16、20、... 目的探明转录因子c-Myc在同步化之后的小鼠毛囊周期中表达的规律及可能意义。方法通过经典的松蜡合剂脱毛法使小鼠背皮毛囊周期同步化,分别采用免疫组织化学、RT-PCR、Western blot检测c-Myc在毛囊周期不同时相点(拔毛后5、10、16、20、25d)表达的强弱变化及分布规律。结果在所有5个时相点的皮肤中c-Myc都存在不同强度的表达,RT-PCR与Western blot检测结果呈现出一致的规律,即生长期中期(10d)、晚期(16d)和退化期(20d)表达较强,生长期早期(5d)和静止期(25d)表达较弱。免疫组织化学结果显示:c-Myc表达在生长期主要分布于毛囊内根鞘与毛母质,在退化期主要分布于残存的内根鞘,在静止期毛囊中没有表达。结论c-Myc的表达存在于生长期的内根鞘、毛母质和退化期残留的内根鞘。c-Myc可能在毛囊角质形成细胞的终末分化过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 原癌基因蛋白质c—myc 毛囊 周期性 同步化 内根鞘 毛母质 小鼠
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308 nm激光联合胡椒碱对毛囊外根鞘无色素黑素细胞黏附、移行及酪氨酸酶相关蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 吴一菲 曹萍 +4 位作者 王晓川 朱振东 陈伟 刘畅 薛琴 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期634-639,共6页
目的:研究308 nm准分子激光(EL)联合胡椒碱对毛囊外根鞘无色素黑素细胞(AMMC)黏附、移行及酪氨酸酶相关蛋白(TRP-1及TRP-2)表达的影响,初步探讨其对AMMC黑素合成影响的作用机制。方法:体外培养的AMMC分别予308nm EL(激光组)、胡椒碱(胡... 目的:研究308 nm准分子激光(EL)联合胡椒碱对毛囊外根鞘无色素黑素细胞(AMMC)黏附、移行及酪氨酸酶相关蛋白(TRP-1及TRP-2)表达的影响,初步探讨其对AMMC黑素合成影响的作用机制。方法:体外培养的AMMC分别予308nm EL(激光组)、胡椒碱(胡椒碱组)及二者联合(联合干预组)作用72 h、120 h及168 h,同时设阳性对照组及空白对照组。激光共聚焦显微镜观察AMMC黏附及移行情况,并定量分析荧光染色后AMMC细胞内TRP-1及TRP-2表达。结果:与空白对照组比较,其余4组均能不同程度地促进AMMC的黏附及移行。联合干预组、激光组及阳性对照组TRP-1及TRP-2表达均上调,其中联合干预组促进作用最强。胡椒碱作用72 h可促进AMMC细胞内TRP-1表达,且呈浓度依赖性;而对TRP-2的表达无影响。结论:308 nm EL联合胡椒碱具有促进AMMC黏附、移行及提高细胞内TRP-1及TRP-2表达的作用。 展开更多
关键词 308 nm准分子激光 胡椒碱 黑素细胞 无色素 毛囊外根鞘 黏附 移行
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天疱疮患者头发毛囊直接免疫荧光检测及其临床意义探讨 被引量:1
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作者 来学民 赵玉铭 王雅坤 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1134-1136,共3页
目的评价天疱疮患者头发毛囊直接免疫荧光检测的临床意义。方法每例患者头发约20根,采取直接染色方法进行直接免疫荧光检查。结果天疱疮患者毛囊直接免疫荧光示FITC标记的羊抗人IgG抗体在毛囊表皮下的外毛根鞘呈网状沉积,其荧光强度与... 目的评价天疱疮患者头发毛囊直接免疫荧光检测的临床意义。方法每例患者头发约20根,采取直接染色方法进行直接免疫荧光检查。结果天疱疮患者毛囊直接免疫荧光示FITC标记的羊抗人IgG抗体在毛囊表皮下的外毛根鞘呈网状沉积,其荧光强度与天疱疮患者病情严重程度呈正相关(r=0.505,P<0.05)。随访也发现,病情波动,毛囊DIF强度也随之变化,二者呈正相关。结论天疱疮患者毛囊直接免疫荧光强度在一定程度上反映与病情严重程度的相关性,推断对其强度的监测可用于评价疾病的严重程度并指导临床治疗。 展开更多
关键词 天疱疮 抗体 毛囊 外毛根鞘 免疫荧光
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小鼠触须毛囊外根鞘细胞的体外培养及uPA和uPAR表达研究 被引量:1
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作者 高强国 符刚 杨恬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第16期1452-1454,共3页
目的 建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法 建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果 外根鞘细胞在此滋养层上... 目的 建立小鼠毛囊外根鞘细胞的体外培养方法及研究尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体 (uPA uPAR)的表达。方法 建立以毛囊真皮鞘细胞为滋养层 ,培养外根鞘细胞并对uPA uPAR的表达进行免疫细胞化学鉴定。结果 外根鞘细胞在此滋养层上生长较好 ,并有uPA uPAR的表达。结论 毛囊真皮鞘细胞是外根鞘细胞较好的滋养层 。 展开更多
关键词 毛囊 外根鞘细胞 真皮鞘细胞 UPA/UPAR
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血管生成素对人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 周乃慧 范卫新 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期328-331,共4页
目的:探讨血管生成素对体外培养的人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖的影响。方法:采用两步酶消化法分离和培养人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,将与绿色荧光蛋白基因共表达的血管生成素真核表达质粒pEGFP-ANG转染人毛囊外毛根鞘角质形成细胞... 目的:探讨血管生成素对体外培养的人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖的影响。方法:采用两步酶消化法分离和培养人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,将与绿色荧光蛋白基因共表达的血管生成素真核表达质粒pEGFP-ANG转染人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,同时设立转染空质粒的pEGFP-C2组和只加转染液的阴性对照组,48 h后利用ELISA法检测细胞上清液中血管生成素的表达,同时四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。另外,将不同浓度的重组人血管生成素(0~200μg/L)加入人毛囊外毛根鞘角质形成细胞中,培养48 h后MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果:成功分离与培养了人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,转染人血管生成素的细胞上清液中血管生成素的浓度明显高于转染pEGFP-C2组和阴性对照组(P<0.001),且其能够明显促进人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖(P<0.001)。另外,3.125~200.000μg/L重组人血管生成素能够明显促进人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖(P<0.001),其中以12.500μg/L浓度组作用最为显著。流式细胞仪检测结果表明12.500~200.000μg/L重组人血管生成素能够显著增加细胞增殖指数(P<0.05)。结论:内源性和外源性血管生成素均能明显促进体外培养的人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖,提示血管生成素可能通过促进毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖而促进毛发生长。 展开更多
关键词 血管生成素 外毛根鞘角质形成细胞 毛囊
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BMP-4对人毛囊外根鞘细胞增殖和迁移的影响 被引量:3
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作者 顾华 李坤杰 +2 位作者 凃颖 刘玲 何黎 《皮肤病与性病》 2012年第4期187-189,共3页
目的观察BMP-4对体外培养的人毛囊外根鞘细胞增殖和迁移的影响。方法用含不同浓度BMP-4的MSCM培养基培养毛囊外根鞘细胞48小时后行MTT检测毛乳头细胞的增殖情况;将铺满90%培养皿底的毛囊外根鞘细胞划痕后以含不同浓度BMP-4的MSCM培养基... 目的观察BMP-4对体外培养的人毛囊外根鞘细胞增殖和迁移的影响。方法用含不同浓度BMP-4的MSCM培养基培养毛囊外根鞘细胞48小时后行MTT检测毛乳头细胞的增殖情况;将铺满90%培养皿底的毛囊外根鞘细胞划痕后以含不同浓度BMP-4的MSCM培养基培养,分别于0h,8h,24h和48h测量毛囊外根鞘细胞爬行的距离。结果与其他浓度相比,10μg/mlBMP-4明显促进毛囊外根鞘细胞的增殖(P<0.05),不同浓度BMP-4均促进毛囊外根鞘细胞的迁移,48小时10μg/ml浓度BMP-4的创面愈合指数达到100%(P<0.05)。结论 BMP-4对于毛囊形成及发育具有重要意义。 展开更多
关键词 毛囊外根鞘细胞 BMP-4 增殖 迁移
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尿激酶型纤溶酶原激活物的表达与毛囊细胞增殖关系的研究
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作者 崔志鸿 杨恬 曾益军 《细胞生物学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期376-378,共3页
为了研究毛囊外根鞘(outer root sheath,ORS)细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasmino-gen activator,uPA)的表达与其细胞周期的关系,并探讨uPA对毛囊生长的调控作用,本文应用流式细胞仪对不同代龄的ORS细胞的细胞周期进行了 检... 为了研究毛囊外根鞘(outer root sheath,ORS)细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasmino-gen activator,uPA)的表达与其细胞周期的关系,并探讨uPA对毛囊生长的调控作用,本文应用流式细胞仪对不同代龄的ORS细胞的细胞周期进行了 检测,并用免疫细胞化学和RT-PCR手段对相应代龄ORS细胞的uPA mRNA及蛋白质的表达进行了检测。结果显示,原代ORS细胞增殖旺盛,而3代ORS细胞增殖水平显著下降,增殖旺盛的ORS细胞uPA mRNA及蛋白表达较强,而增殖缓慢的ORS细胞uPA mRNA及蛋白的表达明显下降或不表达。说明ORS细胞的增殖水平与其uPA mRNA及蛋白的表达密切相关,uPA在毛囊生长早期的表达可以促进毛囊细胞增殖,利于毛囊发育。 展开更多
关键词 尿激酶型纤溶酶原激活物 表达 毛囊细胞增殖 关系 皮肤 创伤愈合 角质形成细胞
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毛囊外根鞘细胞的分离培养及鉴定 被引量:1
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作者 王新宇 许爱娥 +3 位作者 傅丽芳 钱国培 陈俊帆 严后友 《中国现代医生》 2013年第6期1-3,6,F0003,共5页
目的建立毛囊隆突处外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊,采用胰酶消化法进行细胞培养,倒置6显微镜观察细胞形态,绘制细胞生长增殖曲线,免疫荧光检测干细胞相对特异性标识分子角蛋白19(K19)和β1整合素表... 目的建立毛囊隆突处外根鞘细胞的分离和培养方法。方法利用中性蛋白酶分离得到单个毛囊,采用胰酶消化法进行细胞培养,倒置6显微镜观察细胞形态,绘制细胞生长增殖曲线,免疫荧光检测干细胞相对特异性标识分子角蛋白19(K19)和β1整合素表达情况,分别用分离培养的角质形成细胞(Keratinocytes,KCs)做对照。结果免疫荧光检测显示90%左右的毛囊外根鞘细胞胞浆中均有K19和β1整合素的阳性表达。结论应用中性蛋白酶和胰酶消化法体外培养毛囊隆突处外根鞘细胞简单、可行。 展开更多
关键词 毛囊 外根鞘细胞 毛囊干细胞 角质形成细胞 分离 培养
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mTOR复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位 被引量:1
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作者 陈梦婷 谢红付 +3 位作者 刘芳芬 徐伞 李吉 邓智利 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期725-730,共6页
目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位及其意义。方法:通过增殖标志物Ki-67的免疫荧光染色确定所用出生后不同时间的小鼠背部皮肤与所报道的毛... 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)复合物组分Raptor和Rictor在小鼠毛囊周期中的表达与定位及其意义。方法:通过增殖标志物Ki-67的免疫荧光染色确定所用出生后不同时间的小鼠背部皮肤与所报道的毛囊周期阶段是否准确对应。采用real-time PCR技术检测Raptor和Rictor mRNA在出生后43 d(P43,静止期早期)、56 d(P56,静止期中期)、69 d(P69,静止期末期)、74 d(P74,生长期早期)中的表达情况;采用免疫荧光共染技术进一步检测Raptor和Rictor蛋白在上述各个时期中的表达与定位。结果:Ki-67免疫荧光结果表明所选取的小鼠皮肤与其所处毛囊周期阶段准确对应。Real-time PCR和免疫荧光检测结果表明:Raptor和Rictor mRNA在毛囊周期各时期的毛囊中表达差异无统计学意义(P>0.05);Raptor特异表达于毛囊隆突部的毛囊干细胞中,而Rictor主要表达在毛囊内根鞘中。结论:Raptor和Rictor的表达水平在毛囊周期各时期并未见明显差异,但Raptor会特异表达于毛囊干细胞中,而Rictor特异表达在内根鞘中,提示Raptor可能是毛囊干细胞的分子标志物之一,Rictor可能参与内根鞘的维持及毛干的形成。 展开更多
关键词 毛囊周期 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 RAPTOR RICTOR 毛囊干细胞 内根鞘
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