多囊卵巢综合征不孕患者血清CTRP9、睾酮水平与药物诱导排卵反应的关系

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)、睾酮(T)水平与药物诱导排卵反应的关系。方法:选取2019年1月-2021年5月本院治疗的PCOS不孕患者123例临床资料,药物诱导排卵治疗后监测排卵情况,依据是否排卵分为排卵组75例、未排组48例。比较两组、基础血清CTRP9、T水平并分析与药物诱导排卵反应关系;受试者工作特征曲线(ROC)分析CTRP9、T预测患者药物诱导排卵治疗后不排卵价值。结果:未排组血清CTRP9(174.36±26.25 ng/ml)低于排卵组(235.28±29.56 ng/ml),T(58.19±12.35 ng/dl)高于排卵组(49.86±11.43 ng/dl)(P<0.05)。多因素分析,低CTRP9及高T水平均为药物诱导排卵失败的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析,当基础血清CTRP9水平<198.43 ng/ml时,预测药物诱导排卵失败的曲线下面积(AUC)为0.805,敏感性83.3%、特异性69.3%;T>56.66 ng/dl时,预测药物诱导排卵失败的AUC为0.824,敏感性87.5%、特异性68.0%;二者联合预测药物诱导排卵失败的AUC为0.881,特异性84.0%;结论:基础血清CTRP9水平降低、总T水平升高为PCOS不孕患者药物诱导排卵失败的危险因素,二项指标对药物诱导排卵效果有一定价值。

双峰驼诱导排卵机理的研究.Ⅱ.双峰驼诱导排卵因子的靶器官及代谢动力学

应用同位素示踪技术 ,将公驼精清内的诱导排卵活性蛋白 (OIP)经12 5I标记后输入母驼阴道。示踪结果证明 ,OIP经阴道前端主动吸收 ,很快进入血液循环 ,其代谢动力学属于一级吸收二室开放模型 ,吸收速度常数 (ka)为 0 .0 6 7·min-1,吸收半衰期 10 .2 4min ,于 2 3min达峰浓度 (Cmax) 5 .15 μg·ml-1,清除半衰期 (t1/2 k)较长为 72 .6h ;从DEAE DE52 柱上洗脱的活性蛋白吸收后 ,不经过脊髓和卵巢反馈通路 ,而是经血液循环直达脑髅内的靶器官垂体 ,从而引起母驼释放促黄体素 (LH) ,至峰值出现 。

双峰驼精清及其活性组分凝集素寡糖的初步研究

应用植物血凝素与寡糖结构相同或相似的糖复合物专一凝集的原理与方法，结合小鼠排卵试验，间接观察了公驼精清及其经ＤＥ－５２离子交换层析和高效液相层析提取分离的活性组分的蛋白组成。结果表明，公驼精清内糖蛋白含有２种以上的寡糖。

双峰驼诱导排卵机理的研究Ⅲ——双峰驼诱导排卵因子分布与代谢途径的研究

从公驼精清内经 DEAE-DE52 柱上分离的诱导排卵活性蛋白 (Ovulation-inducingbioactive protein,OIP)应用 12 5I标记后输入母驼阴道 ,通过血液循环到达垂体。经测定 ,OIP遍布母驼体内各脏器 ,其中以垂体、肝脏、心脏、舌肌等浓度较高 ,而在眼角膜、耳尖部以及被毛中含量很少。消除半衰期长达 72 .6 h,其代谢主要经肝胆系统排泄 ,也有部分活性蛋白通过泌尿。

双峰驼精清诱导排卵活性因子的HPLC分离纯化及生物活性测定

利用C8 柱经HPLC对QHyperD柱分离的驼精清活性组分F3和F5进行分离纯化 ,大鼠垂体组织培养 ,RIA测定培养液中LH和FSH的浓度。实验结果表明 ,F3和F5经过HPLC纯化后 ,各得到 4个组分 ,分别以F3-1～F3- 4和F5 - 1～F5 - 4表示。其中F3- 3和F5 - 3可引起体外培养的大鼠垂体LH的释放显著增加 ,但均未引起FSH发生明显变化。用C18柱经HPLC或毛细管电泳对F3- 3进一步纯化 ,无论在HPLC或毛细管电泳仪中 ,F3- 3均呈现两个波峰 ,而且间隔非常靠近 ,说明F3-

双峰驼诱导排卵因子活性位序列测定与肽链结构研究

应用高效液相色谱仪、蛋白顺序仪和傅里叶变换离子回旋共振质谱仪等仪器 ,纯化并测试了公驼诱导排卵因子(OIF)的部分活性序列和降解过程。结果表明 ,公驼OIF是单链多肽 ,分为活性序列和相对稳定固定序列两部分 ,N 端的活性位序仅为 6个残基 :赖氨酸 缬氨酸 丙氨酸 苯丙氨酸 丝氨酸 苏氨酸。该因子的氧化降解过程在冰冻条件下是由氨基酸侧链基团的氧化和肽链的断裂共同引发的。

家兔性行为形成机制研究进展

诱发性排卵动物家兔具有旺盛的繁殖能力。传统的生殖激素,如雌二醇,孕激素(受体)与其性行为的发生密切相关。生殖激素促使家兔产生躯体感觉信号作用于中枢神经系统,使下丘脑产生促性腺激素释放激素,继而垂体于排卵前产生黄体生成素峰,诱发家兔排卵。研究发现,新的生物学分子,如卵巢肾素-血管紧张素系统、排卵诱发因子等与家兔诱发性排卵的关系密不可分。家兔的特征性性行为包括引体向上,脊柱前弯症等。这些不同性行为的产生受不同神经中枢调节。甚少有国内研究关注到家兔性行为的神经定位。论文将对家兔性行为与生殖激素、诱发排卵、中枢定位之间的相关关系做一综述,为研究者更好的理解家兔性行为形成机制进行动物医学及人类生殖医学模型载体奠定基础。

双峰驼精清诱导排卵活性成分的DEAE-纤维素柱层析分离及其生物活性

选用 DEAE-纤维素离子交换柱对双峰驼精清进行分离 ,各层析组分用于大鼠垂体组织体外培养 ,并给母驼肌注有活性的组分 ,以 RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中 LH及 FSH的浓度。结果表明 ,驼精清经 DEAE-纤维素柱分离后可得到 5个蛋白组分 ( L1～ L5) ,其中 L3在大鼠垂体培养时引起 LH的释放明显增加 ( P<0 .0 5) ,FSH则无明显变化。给卵巢上无大卵泡发育的母驼肌注有活性的组分 L3 ,可引起血浆中LH明显升高 ,FSH也无变化。由此表明 ,L3在体内外试验中均具有引起 LH释放的生物活性 ,它可能是诱导排卵的活性因子或其成分之一。

双峰驼精清诱导排卵活性因子的阴离子交换柱Q Hyper D层析分离及生物活性鉴定

利用阴离子交换柱QHyperD对双峰驼精清进行分离 ,大鼠垂体组织培养及母驼肌注活性组分 ,RIA法测定垂体组织培养液和母驼血浆中LH及FSH的浓度。实验结果表明 ,驼精清经QHyperD柱层析后 ,共得到 6个组分 (F1～F6 ) ,其中F3和F5在大鼠垂体组织培养实验中具有生物活性 ,可引起LH的明显释放 (P <0 .0 5 )。在体实验时给卵巢上有成熟卵泡的母驼分别肌注F3或F5 ,肌注后 5～ 7h ,LH的释放也明显增加 (P <0 .0 5 )。F3可引起母驼发生排卵 ,F5则不能 ,说明F3可能就是驼精清中的诱导排卵活性因子或其成分之一。另外 ,无论是F3或是F5 。

碘标双峰驼诱导排卵因子的生物分布及代谢动力学

目的 :研究碘 12 5标记的双峰驼诱导排卵因子在母驼体内的生物分布特性及药代动力学模型 .方法 :采用高效碘标法 (NBS法 )进行12 5I OIF的标记 ,并于标记后不同时间测定其标记率以观察标记物的稳定性 .将12 5I OIF经母驼阴道输入给药 ,给药后不同时间采血 ,测定其放射性计数 ,用3P97药代动力学软件求取药代动力学参数 ;给药后处死骆驼 ,分别取主要脏器 ,经物理衰变校正后计算每克组织的放射性百分注射量 (%ID·g-1) .结果 :12 5I OIF的标记率 80 % ,放化纯度 95 % .将标记物室温下放置 96h ,测得其标记率为70 % ;12 5I OIF在母驼体内的生物学分布在肝中的浓集较高(肝脏代谢 ) ,在脑组织中以垂体的放射性浓聚最高 ;12 5I OIF的药代动力学参数分别为T1/ 2 (ka) 11.8h ,T1/ 2 (ke) 2 6 .4h ,AUC 11.0 6 1× 10 12 Bq·L-1.结论 :采用NBS法碘标的标记率高 ,稳定性好 ,操作简便 .12 5I OIF的药代动力学最佳数学模型符合一级吸收二室开放模型 。

精液中促排卵因子对母畜繁殖的影响

哺乳动物排卵的过程包括:脑下垂体前叶分泌LH到体循环后,下丘脑脉冲性释放GnRH到垂体门脉系统,而LH峰介导了卵泡成熟、卵泡破裂和排出。哺乳动物根据引起下丘脑分泌GnRH方式的不同分为自发性排卵(人、羊、牛、马和猪等)和诱发性排卵(兔、貂、猫和骆驼等)动物,这其中自发性排卵动物具有一定的发情周期。早期研究发现交配过程能促发羊驼和驼马的排卵,最新研究发现精液中存在一种促排卵因子(OIF),这有助于了解自发性和诱发性排卵动物排卵的机制。OIF能刺激LH分泌、排卵和黄体腺的发育,并且通过体循环而非局部通路发挥作用。OIF是一种能耐热和抗蛋白酶K消化的蛋白质分子(分子团为14kDa),它可能是一种蛋白复合体或者激素原的一部分。OIF发挥作用是和剂量相关的。OIF已被证实存在于骆驼、牛、马、猪和袋熊等动物中。OIF在自发性排卵动物中能介导初情期小鼠促排、能改变母牛卵泡波的动态变化、能提升LH的释放(体外培养大鼠、小鼠、豚鼠、兔、驼马和牛的脑下垂体细胞)。

卵巢低氧微环境调节哺乳动物排卵的分子机制

哺乳动物排卵过程复杂,包括卵泡发育、卵泡成熟破裂后的排卵以及黄体形成和退化等过程。目前研究表明,排卵过程受低氧微环境和响应低氧条件的因子—低氧诱导因子(Hypoxic inducible factor,HIF)的影响。低氧调控HIF并影响许多生理过程,如血管生成、炎症反应等。尽管排卵的具体过程早已阐明,但低氧参与调控排卵过程的分子机制并不十分清楚。本文主要综述了哺乳动物在排卵过程中低氧环境如何产生以及HIF如何调控该过程的分子机制,旨在进一步理解排卵机制和卵巢的综合性功能,为相关的卵巢疾病提供一定的理论依据。

缺氧诱导因子-1调控卵泡发育的研究进展

缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一类介导缺氧适应性反应的转录因子,参与调节多种缺氧反应相关基因及其作用通路。卵泡发育的不同阶段及排卵过程通常处于缺氧的状态,HIF-1通过血管内皮细胞生长因子、促红细胞生成素、葡萄糖转运蛋白和糖酵解酶等靶基因,参与卵泡的发育调节。本文就HIF-1在卵泡发育以及排卵过程中的表达、作用机制等进行综述。

HIF-1α对卵泡发育及排卵生物学作用的研究进展

低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)作为缺氧感应因子,通过调控卵泡的发育和排出影响女性的生殖功能。HIF-1α促进卵母细胞发育,调控其分泌相关血管生成因子,诱导颗粒细胞进行糖酵解、自噬,提高卵泡成熟率。此外,HIF-1α推动卵泡囊黄体化进程,维持黄体功能,最终通过累积氧化应激完成生理性黄体萎缩。若HIF-1α调控功能异常,则会引起血管新生障碍、能量代谢失常、过度氧化应激和异常自噬-凋亡等一系列病理反应,导致排卵障碍性不孕的发生。本文通过对近期关于HIF-1α调控卵泡发育、排出,以及黄体功能维持和结构萎缩的研究进行总结,阐述相关药物或有效成分通过HIF-1α对卵泡发育不良和卵子排出障碍的有效干预机制,以期为解决排卵障碍性不孕提供更系统、深入的研究思路。

自然排卵、促排卵和超促排卵状态下小鼠卵巢组织中生长分化因子-9(GDF-9)的表达

目的:观察自然周期排卵、促排卵与控制性超促排卵(COH)状态下小鼠卵巢生长分化因子-9(growth differentiation factor,GDF-9)表达水平的变化情况。方法:成年雌性小鼠随机分为3组每组10只,分别为自然排卵组(对照组)、孕马血清(PMSG)促排卵组(PMSG组)、控制性超促排卵组(COH组),各组小鼠取排卵期卵巢组织,采用免疫组织化学方法检测GDF-9的表达与定位,并分别采用Western blottting和实时荧光定量PCR法,定量检测GDF-9蛋白与mRNA的含量。结果:各组小鼠卵母细胞与颗粒细胞中均检测到GDF-9的表达,PMSG组与COH组GDF-9蛋白与mRNA的表达水平均显著高于对照组(P<0.05),PMSG组的表达也明显弱于COH组(P<0.05)。结论:促排卵可促进小鼠卵巢GDF-9的表达,但COH降低促排卵小鼠卵巢GDF-9的表达。

基于因子分析诱导排卵失败不孕症的证型分布规律

目的:探讨尿促性腺激素(HMG)诱导排卵失败不孕症的中医证型分布规律。方法:采集250例接受HMG诱导排卵治疗的不孕症患者的症状、舌象、脉象等四诊信息,本项课题研究只针对其中180例诱导失败患者的四诊信息进行因子分析。结果:诱导排卵失败患者的中医证型多为阴虚内热型、热盛津伤型和肝郁化热型,其中阴虚内热型对失败组的贡献率最大,而热盛津伤型的发生频率最高。结论:通过对诱导排卵失败组中医证型分布规律的研究,为诱导排卵失败后选择最佳的中医后续治疗方案提供证候学依据和辨证思路。

补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡排卵率及PR-A/HIF-1α表达的影响

目的:探讨补肾调经方、逍遥丸诱发排卵的作用机制与调控孕激素受体A(PR-A)及其下游乏氧诱导因子1α(HIF-1α)的关系。方法:144只12日龄雌性昆明乳鼠,机械法分离窦前卵泡,随机分为空白组(不加血清)、正常组(加正常大鼠血清)、补肾组(序贯加入补肾调经Ⅱ、Ⅲ号方高剂量大鼠含药血清)、疏肝组(序贯加入逍遥丸高、低剂量大鼠含药血清),体外培养12d,第12天时加入人绒毛膜促性腺激素(hCG)后16h,观察卵泡成活率、窦腔形成率和卵母细胞逸出率。RT-PCR法、细胞免疫荧光染色法检测培养第12天时加入hCG后0、8、12、16h,卵泡和卵丘-卵母细胞复合体(COCs)中PR-A、HIF-1αmRNA及其蛋白的表达。结果:卵泡生长过程中卵泡直径不断增长,见窦腔形成、COCs排出、卵母细胞逸出。补肾组和疏肝组卵泡成活率、窦腔形成率及卵母细胞逸出率较正常组和空白组均升高(P<0.05),补肾组优于疏肝组(P<0.05);加入hCG后,补肾组与疏肝组卵泡和COCs中PR-A、HIF-1αmRNA及蛋白8h、12h、16h表达较正常组和空白组升高(P<0.05),8h疏肝组高于补肾组(P<0.05),12h补肾组高于疏肝组(P<0.05)。补肾组PR-A、HIF-1αmRNA及蛋白的表达高峰高于疏肝组。结论:补肾调经方、逍遥丸诱发排卵的机制与上调PR-A及其下游的HIF-1α的表达,从而有效调节排卵乏氧微环境有关,补肾法优于疏肝法。