葡萄糖氧化酶和植物乳杆菌抑菌性能的研究

采用牛津杯法研究葡萄糖氧化酶(GOD)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)对鸡源、猪源大肠杆菌(Escherichia coli)和沙门氏菌(Salmonella)的抑菌作用。结果表明,牛津杯法检测到GOD对不同来源致病菌均具有抑菌性,且在一定浓度范围内随浓度增加抑菌性能增强,在GOD酶活10 U/mL时仍具有抑菌作用,抑菌圈直径均≥9.25 mm。GOD酶在37~75℃干热处理10 min后仍具有较好的抑菌活性,65℃时对猪源大肠杆菌K88和37℃时对沙门氏菌0533抑菌作用最强,抑菌圈直径分别为10.75 mm和12.25 mm。植物乳杆菌BLCC2-0126对被试病原菌抑菌圈直径最大,对猪源大肠杆菌K99和沙门氏菌0533抑菌圈直径为13.75 mm。总之,GOD和BLCC2-0126均具有抑菌作用,且可共用于实际生产中。

响应面法优化姜黄素凝胶剂及其稳定性评价

凝胶剂是皮肤科常用的一种外用半固体制剂,具有易吸收组织液、可调性强、稳定性好、安全性高等特点.本研究以外观、涂展性、耐寒耐热和离心稳定性等作为感官评分指标,通过单因素实验以及响应面优化实验来探讨姜黄素凝胶剂的制备工艺,并通过牛津杯法检验姜黄素的抑菌性能.结果表明:在本实验条件下,凝胶基质的最优配方为0.5%卡波姆940,0.5%甘油,1.0%三乙醇胺,姜黄素的载药量范围在0.5~2.0 mg/g.该凝胶呈亮黄色,成形性及涂展性良好,其耐寒耐热和离心等稳定性指标均符合《中国药典》2020年版对凝胶剂的质量要求.

迷迭香粗提物提取工艺优化及其抑菌活性

迷迭香具有抑菌、抗氧化等生物活性,为获得有效抑菌成分,该研究通过单因素试验结合响应面试验优化迷迭香粗提物提取工艺;利用牛津杯法和滤纸圆片法对迷迭香粗提物抑菌作用进行研究,并确定其最低抑菌浓度。研究结果表明:迷迭香粗提物提取最优工艺条件为液料比7∶1(mL/g)、提取温度78℃、提取时间62 min、乙醇浓度60%、提取次数3次,在此条件下,迷迭香粗提物得率为(32.40±0.52)%。抑菌试验结果表明,迷迭香粗提物对食品中常见致病菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、蜡样芽孢杆菌)均具有较好的抑制作用,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、蜡样芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为15.12、22.15、23.22、9.58 mm,最低抑菌浓度分别为50.0、12.5、25.0、25.0 mg/mL。

喙尾琵琶甲防御液季节性变化及抗菌活性比较

喙尾琵琶甲Blaps rynchopetera Fairmaire是云南彝族长期广泛使用的昆虫药物,其虫体和防御液均具有很高的药用价值。为明确药用昆虫喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性的季节性变化,本研究通过常规饲养喙尾琵琶甲成虫,每月初对该昆虫尾部采用直接刺激法收集防御液,观察其状态特征,应用GC-MS分析其组成及组分含量变化,并选择具有季节特征月份的防御液测定其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,防御液月采集率为0.06%~0.40%,年均采集率0.22%,月间分泌量差异较大。不同月份采集的防御液的状态及抑菌效果亦有所差异,在气温较低月份采集的防御液不分层,颜色为红棕色,采集的量相对偏低,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色假丝酵母菌的MIC等于或大于512μg/mL;气温较高的月份所得防御液,分层情况良好,液体呈现黄棕色,采集的量相对偏高,对金黄色葡萄球菌的MIC为64μg/mL,大肠埃希菌的MIC为256μg/mL,白色假丝酵母菌的MIC为512μg/mL。通过GC-MS分析鉴定出喙尾琵琶甲防御液中的6个主要组分:对苯醌,2-甲基-1,4-苯醌,2-乙基-1,4-苯醌,1-十三烯、2-甲基-1,4-苯二酚和4-乙基-1,3-苯二酚,比较发现1-12月间采集防御液的主要成分及各组分相对含量差异较大。综上所述,喙尾琵琶甲刺激性防御液的组成、组分含量及抗菌活性会呈现出季节性的差异,其抗菌活性的差异与醌类、酚类组分相对含量的变化有关。

50种清热类中药对金黄色葡萄球菌抑菌作用的聚类分析

目的:测定50种清热类中药对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,对比不同类型的清热药物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果及差异,旨在为治疗感染性疾病提供新的治疗思路。方法:通过牛津杯法测定药物抑菌圈直径与吸光值两个指标,对中药的抑菌能力进行评价。结果与结论:聚类分析表明,50种不同类型的清热药对金黄色葡萄球菌的抑菌效果、清热作用和药用部位分类并不完全一致。50种清热类中药中,秦皮、黄芩、紫花地丁、连翘、马齿苋、黄连、板蓝根、半枝莲、苦参、金银花、青蒿、赤芍等清热类中药对金黄色葡萄球菌的抑菌效果明显,可作为防治金黄色葡萄球菌引起的感染类疾病的一种新型治疗手段。

食品包装用箬叶提取物抑菌活性及稳定性研究

目的:以牛津杯法研究箬叶提取物的抑菌活性和稳定性。方法:用水超声法提取箬叶提取物,以枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌为指示菌,总抑菌圈为考察指标,进行抑菌试验;用正交试验分析料液比、提取时间和提取次数3个因素不同水平对箬叶提取物抑菌效果的影响,优化提取工艺,测试提取物的最小抑菌浓度(MIC)和稳定性。结果:研究表明,在工艺参数料液比1∶14、超声4次和每次50 min条件下获得的提取物对4种指示菌的抑菌效果最显著,提取物对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为0.025、0.05、0.025、0.05g/mL,并且在pH=4和100℃条件下抑菌效果稳定。结论:箬叶水提取物对枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌具有显著的抑菌效果,且热稳定性和酸稳定性良好。

关于去屑功效检测评价扩散法的筛选

通过抑制糠秕马拉色菌的体外测试方法,对日用化妆品进行去屑功效方法探究。选用常规去屑香波作为试验对象,对引起头皮屑的糠秕马拉色菌进行活化培养,通过牛津杯法、打孔法、滤纸片法,三种扩散法进行实验筛选;结果表明,牛津杯法的准确性和重复性更好,实验结果更符合实际意义,可以作为一种新的可行性较高的去屑功效评价手段。

3种香辛料提取物抑菌及挥发性成分的研究

选取常见的辛辣调味料花椒、八角、辣椒为材料,以乙醇为提取剂,采用普通蒸馏法进行提取,以3种常见细菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌为供试菌,采用牛津杯法测定八角、辣椒、花椒提取液的抑菌效果。实验结果表明,八角提取液对3种菌株均有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用较好;辣椒提取液对金黄色葡萄球菌有一定的抑制作用;花椒提取液对3种供试菌均无明显的抑制作用。采用气相色谱-质谱法分析提取物中主要挥发性化学成分,分析结果表明:八角、花椒提取液中的主要挥发性有机成分各有27种,八角提取物的成分中存在多种同分异构体,有机成分中茴香脑相对含量为59.4568%,占一半以上;花椒提取物中茴香脑的相对含量为4.1965%,有机成分中大多以低分子量的烷烯为主;辣椒提取液中的挥发性主要有机成分有30种,含量最高的也是茴香脑,其相对含量为22.7613%,活性成分辣椒素的相对含量为12.5766%。

丁香提取物抑菌作用及稳定性研究

采用牛津杯法研究丁香提取物的抑菌作用,对提取工艺进行优化,并探讨提取物的最小抑菌浓度和抑菌稳定性影响因素。结果表明,用体积分数85%的乙醇提取,料液比为1∶10,提取温度80℃,超声波提取80 min时,获得的丁香提取物对常见细菌均具有较好的抑菌效果。其中丁香提取物对表皮葡萄球菌的抑菌效果最好,最小抑菌浓度为0.0531 g/mL,对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑菌浓度为0.1063 g/mL。丁香提取物对紫外线有很强的稳定性,对热稳定性较好,大多数金属离子对其抑菌效果也无明显作用,在弱酸性及中性环境下的抑菌稳定性很好,但是对强酸和碱敏感。因此,丁香提取物可运用于食品的防腐保鲜,并且适应多种加工条件。

两种大蒜汁抑菌效果检测技术比较及评价

抑菌能力是评价食品防腐效果的一项重要指标,不同的抑菌试验方法对食品防腐剂抗菌能力的评价有较大影响,因此,选用枯草芽孢杆菌和啤酒酵母为受试菌株分别采用牛津杯法和滤纸片法,分别对鲜榨蒜汁和4℃存贮7 d蒜汁抑菌效果进行评价,对大蒜汁抑菌特性进行研究,为大蒜汁的生物抑菌、防腐提供理论基础和工艺参数,同时为抑菌效果的评价做出科学、合理的判断。

防治奶牛乳房炎中药组方的筛选及其抑菌杀菌作用研究

试验根据中兽医治疗奶牛乳房炎的辨证施治原则,筛选出抑制引起奶牛乳房炎主要病原菌(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌)的最佳中药组方,为其临床防治提供新的途径与方法。选用蒲公英、马齿苋、金银花、紫花地丁、赤芍、白芍、菊花、黄芩、漏芦、红花10味中药,通过L_(12)(2^(11))正交试验初步筛选抗菌中药组方中的最佳优选因素,再通过L_(16)(4~5)正交试验进一步筛选药物组方配比;采用牛津杯法测定中药组方对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌效果;采用二倍稀释法和平板计数法分别测定中药组方对奶牛乳房炎主要致病菌最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,通过L_(12)(2^(11))正交试验初步筛选出了抗菌中药组方最佳优选因素:赤芍、黄芩、红花、菊花和白芍;L_(16)(4~5)正交试验进一步筛选药物组方最佳配比为黄芩∶赤芍∶菊花∶白芍∶红花=3∶3∶3∶1∶2;新药组方对大肠杆菌的抑菌直径为17.39mm,MIC和MBC分别为62.50、125.00mg/mL,对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为25.44mm,MIC和MBC均为31.25mg/mL。本研究成功筛选出了一种对奶牛乳房炎主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用的中药新配比组方。

石榴皮多酚对痤疮丙酸杆菌体外抑菌活性的研究

目的研究石榴皮多酚对痤疮主要致病菌——痤疮丙酸杆菌的抑制作用。方法首先用生长抑制试验(牛津杯法)确定石榴皮多酚醇提物对痤疮丙酸杆菌是否存在抑制作用,然后通过药基琼脂稀释法观察它对痤疮丙酸杆菌的MIC来评价该药物对所测细菌的抑制作用。结果石榴皮多酚醇提物500、300、100 mg/m L对痤疮丙酸杆菌ATCC11827具有较强的抑菌活性,其对痤疮丙酸杆菌的MIC为20 mg/m L。结论石榴皮多酚醇提物在体外具有明确的抑制痤疮丙酸杆菌活性的作用。

6种高等真菌醇提物对植物病原菌的抗菌活性研究

[目的]研究海绵胶煤炱菌、条纹炭角菌、瑞克纤孔菌、木蹄层孔菌、红缘拟层孔菌和高木蹄层孔菌的乙醇提取物对植物病原菌的抗菌活性。[方法]采用牛津杯法测试6种高等真菌乙醇提取物对姜瘟病菌、水稻白叶枯病菌、白菜软腐菌及柑橘溃疡病菌的抗细菌活性;采用生长速率法测试6种高等真菌乙醇提取物对油菜菌核病菌、小麦赤霉病菌、苹果腐烂病菌、葡萄黑痘病菌、苹果斑点落叶病菌、棉花枯萎病菌和番茄棉腐病菌的抗真菌活性。[结果]6种高等真菌的乙醇提取物对植物病原细菌具有较好的抑制活性;除海绵胶煤炱菌外,其他5种高等真菌的乙醇提取物均对植物病原真菌具有较好的抑制活性。[结论]6种高等真菌对植物病原菌具有较好的活性,可进一步用于抗菌活性成分分离和生物农药开发研究。

韭菜提取液体外抑菌活性的均匀实验优化

采用均匀实验优化韭菜提取液对一些常见致病菌的体外抑制作用,并考察了不同影响因素(浓度、温度、pH)对这些致病菌体外抑制作用的影响。采用牛津杯法进行抑菌实验,以抑菌圈大小作为实验指标。研究发现韭菜提取液浓度与抑菌活性呈正相关,即浓度越大,抑菌圈直径越大,抑菌活性越强。100℃以下的韭菜提取液对3种供试菌均有一定的抑制作用,且80℃时抑制效果最好。在酸性条件下,韭菜提取液的体外抑菌作用相差不大;而在碱性范围内,抑菌圈直径则随着pH的增大而明显减小,抑菌活性逐渐减弱。均匀实验结果表明,浓度0.5g/mL,温度80℃,pH为4的条件下的韭菜提取液,体外抑菌活性最强,对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达到了22.4mm。

花椒籽提取物对副溶血弧菌抑菌作用的研究

目的研究花椒籽提取物对副溶血弧菌的抑制效果。方法采用无水乙醇提取花椒籽,采用牛津杯法,比较不同提取条件下花椒籽提取物对副溶血弧菌的抑制作用。结果 100%的花椒籽提取物抑制副溶血弧菌效果最好;最小抑菌浓度和最小杀菌浓度均为12.50 mg/m L。温度升高不利于花椒籽提取物抑菌效果的发挥,适宜温度范围为20~40℃;酸性及中性环境中抑菌效果明显,p H为7.0时,花椒籽提取物抑菌作用最强;紫外照射可使花椒籽提取物菌能力减弱。结论花椒籽提取物对副溶血弧菌有明显抑制效果,抑菌效果随提取条件的改变而改变。

芦笋皮乙醇提取物的抑菌活性研究

研究芦笋皮乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌和青霉、毛霉、黑曲霉的抑制作用,采用牛津杯法对不同质量浓度的芦笋皮乙醇提取物进行抑菌实验。结果表明:芦笋皮乙醇提取物对细菌和霉菌均有抑制作用,抑制细菌的能力明显强于霉菌;对金黄色葡萄球菌最低抑制质量浓度为1g/100mL,其余4种细菌均为5g/100mL,且随着质量浓度的增大抑菌作用增强;对青霉、毛霉、黑曲霉的最低抑制质量浓度分别为10、30、40g/100mL。

新、陈大蒜提取物抑菌活性的研究

以新鲜、陈2种大蒜为材料,95%乙醇为提取剂,浸提大蒜研磨液,以3种常见细菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌为供试菌,用牛津杯法比较大蒜提取液对3种常见细菌的抑菌活性。结果表明:2种大蒜提取液对3种菌的生长均有较好的抑制作用,但抑制作用不同,2种浸提液抑制效果依次是:金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>枯草芽孢杆菌,新鲜大蒜提取物的抑菌效果更佳。采用气相色谱-质谱分析大蒜提取物的挥发性主要化学成分,分析结果表明新鲜大蒜提取液中的主要挥发性有机成分有46种;陈大蒜提取液中的主要挥发性有机成分有54种。其中2种大蒜提取物的主要抑菌活性成分,含硫的化合物二烯丙基二硫醚、二烯丙基三硫醚的相对含量,在新大蒜中分别为5.336%,0.541%,在陈大蒜中分别为4.126%,0.791%。

猪源乳酸菌抑制致病性大肠埃希菌研究

为筛选能够抑制猪源致病性大肠埃希菌的优势乳酸菌,采集不同日龄的健康仔猪新鲜粪便,分离纯化得到35株疑似乳酸菌。应用牛津杯法对3株致病大肠埃希菌抑制作用进行研究,筛选出2株有抑菌作用的疑似乳酸菌(11号和14号)。利用生化鉴定和16SrDNA序列同源性分析,该两株菌被鉴定为乳杆菌属唾液乳杆菌;综合牛津杯法和生长曲线、pH的测定结果,筛选出产酸性能和抑菌效果好的14号菌株,为研制仔猪用微生态制剂奠定了基础。

不同来源乳酸菌对2种致病菌的抑菌活性比较及抑菌性质研究

天然抗生素已经成为现代生物科学和食品科学关注的热点,筛选出含有抑菌物质的天然抗生素菌株,已经成为食品、生物研究的新趋势。选用9株不同来源的乳酸菌对2种致病菌进行体外抑菌试验,采用牛津杯法对乳酸菌的上清液、上清液(p H=6.5)、超声波裂解液、活菌体的抑菌性能进行研究。试验结果表明,当致病菌为金黄色葡萄球菌时:上清液抑菌最好的菌株是H9,直径为2.56 cm;上清液(p H=6.5)抑菌最好的是L12,直径为1.26 cm;活菌体抑菌最好的菌株H8,直径为1.63 cm;超声波裂解液抑菌最好的是L2,直径是1.27 cm。当致病菌为沙门氏菌时:上清液抑菌最好的菌株是L16,直径为2.54 cm;上清液(p H=6.5)抑菌最好的是L17,直径为1.47 cm;活菌体抑菌最好的菌株L17,直径为1.27 cm;超声波裂解液抑菌最好的是L16,直径是2.04 cm。

产广谱细菌素乳酸菌CW3的筛选和初步鉴定

[目的]对CW3菌株进行筛选,并且进行初步鉴定。[方法]首先采用牛津杯双层平板法进行产广谱细菌素菌株的初筛,再将初筛得到的菌株进行排除酸和过氧化氢干扰,并检测抑菌物质的蛋白质性质,最终对复筛得到的菌株进行鉴定。[结果]试验得出,排除有机酸、过氧化氢等干扰因素后,发酵液仍有抑菌作用;用胰蛋白酶和胃蛋白酶处理后,发酵液抑菌活性急剧下降,确定产生的抑菌物质具有蛋白质性质,是一类细菌素。经过生理生化试验初步鉴定菌株CW3为植物乳杆菌。[结论]菌株CW3是一种能产广谱细菌素的植物乳杆菌。