大黄素抑制背根神经节压迫小鼠模型STAT3、VEGFA、p-ERK蛋白表达及其镇痛作用研究

目的 研究大黄素(Emodin,ED)对背根节压迫小鼠模型的镇痛作用以及对STAT3/VEGFA/p-ERK信号通路的影响。方法 建立背根神经节慢性压迫(chronic compression damage,CCD)小鼠疼痛模型,随机分为空白组、模型组、普瑞巴林组及ED低、中、高剂量组。通过检测动物机械痛敏和热辐射痛敏阈值、醋酸扭体实验评价镇痛效果;ELISA检测小鼠L4-L5节段脊髓组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和CD18等炎症因子含量;Western blot和免疫荧光检测脊髓组织信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinases 1/2,p-ERK1/2)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组的机械痛敏、热辐射痛敏阈值显著降低(P<0.05),脊髓背角炎症因子表达显著增高(P<0.05),脊髓中VEGFA、STAT3、p-ERK的表达显著上调(P<0.05)。与模型组比,ED低、中、高剂量组CCD小鼠模型的机械痛敏、热辐射痛敏阈值升高(P<0.05);脊髓背角炎症因子表达降低(P<0.05);脊髓背角小胶质细胞STAT3、VEGFA、p-ERK的表达降低(P<0.05),醋酸诱导的小鼠急性疼痛中扭体次数减少(P<0.05)。结论 ED对背根节压迫小鼠模型有良好的镇痛作用,其机制可能与抑制脊髓背角炎症因子表达和STAT3/VEGFA/p-ERK介导的脊髓小胶质细胞活化有关。

舒肌汤对L-DOPA诱发的帕金森病肌僵直大鼠的作用及其脑组织TH、DA含量和FosB、p-ERK蛋白的影响

目的:观察舒肌汤对左旋多巴(Levodopa,L-DOPA)诱发的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)肌僵直模型大鼠的影响,并探讨其作用机制。方法:L-DOPA诱导建立PD肌僵直大鼠模型,随机分为模型组(等体积生理盐水),舒肌汤低、中、高剂量组(10、20、40 g/kg),同时设假手术组(等体积生理盐水)作为对照,每组6只大鼠,每天灌胃给药1次,连续给药28 d。给药完成后通过旋转次数实验、翻正反射实验、肌电图检测行为学表现。免疫组化检测脑组织酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达水平。ELISA检测脑纹状体组织多巴胺(dopamine,DA)和TH的含量。Western blot检测脑纹状体组织FBJ鼠科骨肉瘤病毒癌基因同源物B(FBJ Murine Osteosarcoma Viral Oncogene Homolog B,FosB)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylation-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠旋转次数、翻正反射时间与评分、肌肉动作电位波幅和潜伏期显著升高或延长(P<0.01),MCV显著降低(P<0.01);与模型组相比,舒肌汤组大鼠旋转次数、翻正反射时间与评分、肌肉动作电位波幅和潜伏期显著降低或缩短(P<0.05),MCV显著升高(P<0.01)。免疫组化结果显示舒肌汤可上调脑组织TH表达水平;ELISA结果显示舒肌汤可上调DA和TH含量。Western blot结果显示舒肌汤可下调FosB、p-ERK蛋白表达水平。结论:舒肌汤对帕金森病模型大鼠肌僵直有显著疗效,其作用机制可能与上调DA和TH含量、下调FosB、p-ERK蛋白表达有关。

HPV感染与ERK信号通路关键因子在宫颈癌中的交互效应及临床意义

目的:探讨HPV感染与ERK信号通路关键因子在宫颈癌中的交互效应及意义。方法:选取2020年10月至2022年10月我院收治的宫颈癌患者90例,作为研究组,另纳入宫颈上皮内瘤变患者90例,作为对照组。统计两组HPV感染状况、ERK信号通路关键因子[核不均一核糖核蛋白E1(HnRNP E1)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、磷酸化非受体酪氨酸激酶(p-Src)]表达,比较研究组不同临床病理特征患者ERK信号通路关键因子表达,Spearman分析两者间相关性,Logi.0stic回归方程分析HPV感染与ERK信号通路关键因子在宫颈癌中的交互效应。结果:研究组HPV感染率及HnRNP E1、p-ERK1/2、p-Src蛋白阳性率均高于对照组CINⅠ~Ⅱ、Ⅲ级(P<0.05);宫颈癌患者FIGO分期、HPV感染、分化程度与HnRNP E1、p-ERK1/2、p-Src蛋白呈正相关(P<0.05);HnRNP E1、p-ERK1/2、p-Src蛋白及三者交互作用是宫颈癌患者HPV感染高危因素(P<0.05)。结论:HPV感染及ERK信号通路关键因子阳性表达均可增加宫颈癌发病风险,两者存在正向交互作用,可为宫颈癌鉴别诊治提供有利参考信息。

硫化氢对正常及自发性高血压大鼠主动脉平滑肌细胞PCNA和P-ERK蛋白表达的影响

目的研究硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）对正常大鼠及自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）主动脉平滑肌细胞（aoric smooth muscle cell，ASMC）增殖的影响。方法分别将正常大鼠及SHR主动脉平滑肌细胞分为实验组和对照组，实验组中分别加入浓度为（10^-5～10^-3）mol·L^-1 H2S供体的硫氢化钠（sodium hydrosuifide，NaHS）或浓度为（2～10）mmol·L^-1胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂的炔丙基甘氨酸（DL-propargylglycine，PPG），对照组加入等体积的生理盐水，分别以蛋白质印迹法观察6、12、18和24h时间点的平滑肌细胞中细胞增殖核抗原（PCNA）和磷酸化的细胞外信号调节激酶（p-ERK）蛋白表达情况。结果NaHS对正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达无影响。PPG显著促进正常大鼠ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。NaHS显著抑制SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。PPG显著促进SHR的ASMC增殖及p-ERK蛋白表达。结论内源性H2S下调可促进正常大鼠及SHR的ASMC增殖，而外源性补充H2S可抑制SHR的ASMC异常增殖，ERK信号途径可能介导H2S抑制ASMC增殖的分子机制。

雌激素及雌激素受体拮抗剂对乳腺癌信号传导通路中MEK-2和p-ERK病理形态的影响

目的:探讨乳腺癌中雌激素受体与细胞信号传导通路MAPK上游激酶MEK-2和下游激酶p-ERK的作用机制。方法:应用雌激素(雌二醇)与雌激素受体拮抗剂(三苯氧胺)诱导BCML-TA299小鼠原位移植乳腺癌组织,通过病理形态学、免疫组织化学法检测ERβ、MEK-2和p-ERK的表达。结果:雌二醇(E2)促进细胞增殖,核分裂多见,肿瘤有丰富的血管,第20天时肺组织中血管腔及心腔内可见大量瘤栓。E2可激活MEK-2,p-ERK明显上调,ERβ与其基因有协同作用;而三苯氧胺(TAM)抑制细胞增殖,癌细胞明显受到损伤,核碎裂、凋亡小体多见,可见多灶性变性坏死区。同时出现ERβ、MEK-2和p-ERK下调,亦有协同作用。三苯氧胺与环磷酰胺联合应用效应优于单药的应用(F=211.88,F=179.08,F=156.44;P<0.05)。结论:ERβ与MAPK信号途径中上游激酶MEK-2和下游激酶p-ERK关系密切,并有协同作用,是乳腺癌发展中重要的调节信号。

p-ERK、p-CREB、c-fos在姜黄素抗大鼠神经病理性痛中的作用

目的:观察姜黄素对神经病理性痛大鼠痛行为及背根神经节的p-ERK、p-CREB表达的影响。方法:采用大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型。雄性SD大鼠108只,随机分为实验对照组(Con)、假手术组(Sham)、溶剂对照组(SC)、小、中、大剂量姜黄素组(Cur30、Cur100、Cur300)。姜黄素组行CCI术,每组每天分别腹腔注射姜黄素30mg/kg、100mg·kg-1、300mg·kg-1,持续14d。各组于术前2d和术后1、3、5、7、10、14d测定机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL)。在术后3、7、14d处死大鼠(n=6),分别制备大鼠L4-5背根神经节的石蜡标本,用免疫组织化学方法测定背根神经节p-ERK、p-CREB、c-fos表达的动态变化。结果:Con组大鼠MWT和TWL呈进行性下降,在术后3d降至最低(MWT为15.3±3g,TWL为4.6±1.0s),术侧背根神经节p-ERK、p-CREB阳性神经元明显增多;Cur组大鼠在术后MWT和TWL亦进行性下降,在术后3d降至最低(Cur100组的MWT为22.6±4g,TWL为5.6±1.1s),与Con组相比,每组每个时间点的MWT、TWL均明显升高(P<0.01);术侧的背根神经节的p-ERK、p-CREB、c-fos阳性神经元的表达下降,每组每个时间点表达均低于Con组(P<0.01)。结论:姜黄素能减轻神经病理性痛,其机制可能与降低背根神经节的p-ERK、p-CREB、c-fos阳性神经元的表达有关。

肝胃百合汤对慢性应激与幽门螺杆菌双重损伤因素模型小鼠胃黏膜组织TFF1、p-ERK蛋白表达的影响

目的观察肝胃百合汤对慢性应激与幽门螺杆菌(Hp)双重损伤因素模型小鼠胃黏膜组织三叶因子1(TFF1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达的影响,探讨其治疗慢性应激性胃溃疡合并Hp感染的相关机制。方法将60只BALB/c雄性小鼠随机分为空白组、应激组、单纯Hp组、双重因素组、肝胃百合汤组、雷尼替丁组,每组10只,选取10种不可预知刺激因素制备慢性应激小鼠模型,造模第7日给予单纯Hp组、双重因素组、肝胃百合汤组、雷尼替丁组灌胃Hp菌液;肝胃百合汤组给予肝胃百合汤灌胃,雷尼替丁组给予雷尼替丁灌胃,其余各组给予蒸馏水灌胃。采用免疫组化检测小鼠胃黏膜组织TFF1、p-ERK蛋白表达。结果双重因素组溃疡指数与TFF1、p-ERK蛋白表达明显高于空白组(P<0.01);与双重因素组比较,肝胃百合汤组和雷尼替丁组溃疡指数显著降低(P<0.01),且肝胃百合汤组明显低于雷尼替丁组(P<0.01);肝胃百合汤组和雷尼替丁组TFF1、p-ERK蛋白表达明显高于双重因素组(P<0.05,P<0.01),且肝胃百合汤组明显高于雷尼替丁组(P<0.01)。结论慢性应激与Hp可协同致胃黏膜损伤,肝胃百合汤可促进TFF1、p-ERK的表达及胃黏膜的修复,达到促进溃疡愈合的目的。

p-Bad112/136、p-Akt、p-Erk在乳腺癌癌变过程中的表达及意义

目的:研究p-Bad112/136、p-Erk、p-Akt在乳腺癌癌变过程中,即乳腺正常组织、普通导管增生、轻中度不典型导管增生、重度不典型增生及导管原位癌、乳腺浸润性导管癌中的表达及意义。方法:用免疫组织化学S-P法检测131例乳腺石蜡包埋组织、WesternBlotting法检测27例乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中p-Bad112/136、p-Akt、p-Erk的表达情况。用χ2和t检验等方法分析四种蛋白在乳腺癌组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系。结果:免疫组化结果显示在乳腺癌癌变过程中这四种蛋白表达阳性率呈递增趋势,其中四种蛋白在乳腺普通导管增生和重度不典型增生及原位癌间阳性表达率差异有统计学意义(P值分别为0.034、0.023、0.001、0.001);p-Bad112/136蛋白在重度不典型增生及原位癌组与浸润性导管癌组间差异有明显统计学意义(P=0.002,0.004)。统计分析显示在乳腺浸润性导管癌中这四种蛋白与患者的年龄、临床分期、肿瘤大小无明显关系,但均与组织学分级相关(P值分别为0.039、0.026、0.038、0.026)。同时p-Erk、p-Akt蛋白的表达与腋窝淋巴结转移有关(P值分别为0.041、0.016)。WesternBlotting结果显示四种蛋白含量在乳腺癌与癌旁乳腺组织的差异有明显的统计学意义(P值分别为0.002,0.001,0.002,0.003)。在乳腺癌组织中p-Bad112与p-Erk及p-Bad136与p-Akt蛋白表达量呈正相关性(P值分别为0.034、0.020)。结论:这四种蛋白表达水平在一定程度上提示了乳腺导管非典型增生向乳腺癌的转化潜能,并且提示MAPK/Erk及PI3-K/Akt传导路径在乳腺癌癌变过程中具有重要作用。

P21Ras和P-ERK在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨P21Ras和细胞外信号调节激酶(P-ERK)在子宫内膜癌中的表达及其介导的丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,Ras-Raf-MEK-ERK)途径与子宫内膜癌发生发展之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法对49例子宫内膜癌和20例子宫内膜非典型增生,12例增生期内膜组织中P21Ras和P-ERK的表达进行检测,分析两者的表达与子宫内膜癌患者临床病理特征之间的关系。结果P21Ras和P-ERK在子宫内膜癌中的表达率分别为75.51%(37/49)、71.43%(35/49),明显高于非典型增生内膜35.00%(7/20)、40.00%(8/20)及增生期子宫内膜0(0/12)、8.33%(1/12)(P<0.05)。P21ras和P-ERK在高中分化子宫内膜癌中的表达率63.64%(21/33)、60.61%(20/33),显著低于低分化子宫内膜癌100%(16/16)、93.75%(15/16)(P<0.05)。P-ERK在手术病理分期中Ⅲ的表达率为100%,明显高于Ⅰ期58.62%(17/29)、Ⅱ期85.71%(12/14)。此外,P-ERK的表达与肌层浸润深度有关,在<1/2肌层深度中的表达53.85%(14/26)明显小于≥1/2肌层深度的表达91.30%(21/23)(P<0.05)。P21Ras和P-ERK的表达呈正相关(rs=0.480,P<0.01)。结论P21Ras和P-ERK与子宫内膜癌的发生和发展有关,且两者存在协同作用;②Ras-MAPK途径的异常活化与子宫内膜癌的发生密切相关。

P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的研究磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)和细胞核转录因子κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况,探讨EGFR/ERK/NF-κB信号通路在中耳胆脂瘤发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学SP法及Western blot(WB)免疫印迹法检测30例中耳胆脂瘤标本及15例正常外耳道皮肤组织中P-EGFR、P-ERK和NF-κB蛋白的表达。结果(1)P-EGFR蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞膜,在胆脂瘤组的阳性表达率为63%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);P-ERK蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为70%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);NF-κB蛋白阳性表达主要定位于细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为60%,明显高于正常耳道皮肤组的13.3%(P<0.05)。在30例中耳胆脂瘤组织中,P-EGFR、P-ERK和NF-κB两两之间呈正相关关系(P<0.05)。(2)Western blot免疫印迹法检测结果显示:中耳胆脂瘤组中P-EGFR、P-ERK和NF-κB的表达量明显高于正常外耳道皮肤组的表达量。结论 P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中表达增强,EGFR/ERK/NF-κB信号通路可能在中耳胆脂瘤组织的形成和发展过程中起重要作用。

结直肠癌PTEN基因表达及与p-ERK相关性研究

目的研究结直肠癌中的PTEN、p-ERK蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在结直肠癌的发生发展中的生物学意义。方法应用免疫组织化学染色快捷法,检测40例结直肠癌组织、18例结直肠腺瘤、13例结直肠正常黏膜中PTEN蛋白、和p-ERK蛋白的表达情况,比较PTEN蛋白表达与临床病理指标的关系,及其与p-ERK蛋白表达的相关性。结果 1.结直肠癌癌组织PTEN蛋白表达的阳性率(57.5%)明显弱于腺瘤(72.2%)及正常组织(100%),组间比较差异有显著性(P<0.05),其表达水平与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期有关,与患者的性别、年龄,肿瘤大小及位置无关(P>0.05)2.结直肠癌组织p-ERK蛋白表达的阳性率(72.5%)明显高于正常结直肠黏膜组(0.00%)及腺瘤组(66.6%),组间比较差异有显著性(P<0.01),其表达随结直肠癌侵润深度增加、淋巴结转移、Duke分期的进展而增高。3.PTEN蛋白表达强度与p-ERK蛋白表达强度之间呈负相关(r=-0.452,P<0.05)。结论提示抑癌基因PTEN的表达与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能由于PTEN蛋白的低表达或失表达不能有效抑制ERK磷酸化,使细胞发生癌变,并促进癌变细胞的浸润、转移。

宫颈鳞癌PTEN和P-ERK的表达及其临床意义

目的:探讨PTEN和P-ERK子宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法观察114例宫颈鳞癌组织和50例宫颈正常组织石蜡标本中PTEN蛋白和P-ERK蛋白的表达情况。结果:宫颈鳞癌组织中PTEN蛋白阳性表达率(61.4%)明显低于正常宫颈组织(100%)(P<0.05);P-ERK蛋白在子宫颈鳞癌中的阳性表达率(84.2%)明显高于正常宫颈组织(16.0%)(P<0.05);子宫颈鳞癌中PTEN和P-ERK蛋白表达之间呈明显的负相关(P<0.01)。结论:PTEN蛋白的低表达或失表达,不能有效抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的异常激活,使细胞恶性转化和增殖。

莱菔硫烷对人肝癌HepG-2细胞ERK信号通路的影响

研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对ERK、p-ERK蛋白表达的影响,探讨其诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制.采用Western Blot方法检测人肝癌HepG-2细胞内ERK及p-ERK蛋白的表达.结果表明,10、20、40μmol/L的SFN作用人肝癌HepG-2细胞48 h可显著下调HepG-2细胞内p-ERK蛋白的表达,而对ERK的表达无明显影响.提示SFN可抑制ERK信号通路,这可能是其诱导HepG-2细胞的凋亡的机制之一.

生长激素释放肽对心衰大鼠心肌细胞中ERK^(-P)表达的影响

目的研究大鼠慢性心衰时细胞外信号调节激酶(ERK-P)含量的变化以及生长激素释放肽(GHRP)对其的影响。方法 Wistar成年大鼠45只随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组15只。采用结扎左冠状动脉前降支建立大鼠慢性心衰模型,假手术组只挤出心脏,不结扎冠状动脉;治疗组造模后给予GHRP尾静脉注射4 w,通过HE染色观察心衰大鼠心肌组织形态学变化、Western印迹法检测各组大鼠心肌细胞中ERK-P蛋白表达水平。结果模型组与假手术组相比,左室峰压、左室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)明显降低,心肌组织中ERK-P明显升高(P<0.01);治疗组与模型组相比,左室峰压、左室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)明显增高,心肌组织中ERK-P较模型组明显降低(P<0.01),与假手术组相比ERK-P升高(P<0.05)。结论 ERK-P在慢性心衰发生过程中起重要作用,GHRP可降低慢性心衰大鼠心肌细胞ERK-P含量,有保护和改善心衰大鼠心功能的作用。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后P-erk表达及神经元凋亡的变化

目的研究磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-excelluar signal-regulated kinase,P-erk)在局灶性脑缺血再灌注中的作用。方法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型;HE染色观察脑组织形态病理学变化;免疫组化法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间磷酸化ERK的表达;TUNEL染色检测神经元凋亡。结果在脑缺血再灌注大鼠检测到磷酸化ERK在梗死中心灶和缺血半暗带都存在阳性表达,于再灌注6h达到峰值,12h后逐渐下降;而凋亡细胞于再灌注24h开始有明显的阳性细胞增加,48h细胞凋亡达到高峰(P<0.01)。结论局灶性脑缺血再灌注后磷酸化ERK表达增加,提示缺血再灌注损伤可能导致ERK活性上调,参与缺血后神经细胞凋亡和非程序性死亡过程。

SASH1和p-ERK在胃腺癌中的表达及意义

目的观察候选抑癌基因SASH1与磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)在胃腺癌中的表达、意义及二者的相互关系。方法免疫组织化学法检测152例胃腺癌组织及30例癌旁组织SASH1和p-ERK的表达。分析SASH1、p-ERK与胃癌临床病理学特征的关系及SASH1与p-ERK蛋白表达的相关性。结果 SASH1在胃癌组织中的阳性率显著低于癌旁组织(P<0.01),在胃低分化腺癌中的阳性率显著低于胃高、中分化腺癌(P<0.01)。SASH1阳性率在Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者、有淋巴结转移患者及有远端转移患者分别显著低于Ⅰ-Ⅱ期患者、无淋巴结转移患者及无远端转移患者(P<0.05,P<0.01;P<0.05)。p-ERK1/2在胃癌组织中的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.01),在胃低分化腺癌中的阳性率显著高于胃高、中分化腺癌(P<0.01)。p-ERK1/2阳性率在Ⅲ-Ⅳ期胃癌患者、有淋巴结转移患者及有远端转移患者分别显著高于Ⅰ-Ⅱ期患者、无淋巴结转移患者及无远端转移患者(P值分别为P<0.05;P<0.05;P<0.01)。SASH1与p-ERK在胃腺癌中的表达呈显著负相关(P<0.05)。结论SASH1蛋白可能通过调控ERK1/2信号通路抑制胃癌进展。

p-ERK p-CREB在姜黄素抗大鼠神经病理性痛中的作用

目的:观察姜黄素对神经病理性痛大鼠痛行为及脊髓背角的p-ERK、p-CREB表达的影响。方法:采用大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型。雄性SD大鼠108只,随机分为实验对照(Con)组、假手术(Sham组)、溶剂对照(SC)组、姜黄素(Cur30、Cur100、Cur300)组。姜黄素组行CCI术,每组每天分别腹腔注射姜黄素30、100、300mg/kg,持续14天。各组于术前2天和术后1、3、5、7、10、14天测定机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL)。在术后3、7、14天处死大鼠(n=6),分别制备大鼠L4-5脊髓的石蜡标本,用免疫组织化学方法测定p-ERK、p-CREB在脊髓背角神经元的动态变化。结果:Con组大鼠MWT和TWL呈进行性下降,在术后3天降至最低(MWT为15.3±3,TWL为4.6±1.0),术侧脊髓背角浅层p-ERK、p-CREB阳性神经元明显增多;Cur组大鼠在术后MWT和TWL亦进行性下降,在术后3天降至最低(Cur100组的MWT为22.6±4,TWL为5.6±1.1),与Con组相比,每组每个时间点的MWL、TWL均明显升高(P<0.01);术侧的脊髓背角浅层p-ERK、p-CREB阳性神经元的表达下降,每组每个时间点表达均低于Con组(P<0.01)。结论:在本实验中,姜黄素能减轻神经病理性痛,其机制可能与降低p-ERK、p-CREB阳性神经元的表达有关。

人卵巢癌中细胞外调节激酶p-ERK蛋白表达的研究及意义

目的:研究细胞外信号调节激酶ERK(extracellular signal-regulated kinase,ERK)与卵巢癌临床病理特征、化疗反应以及生存预后之间的关系。方法:收集卵巢癌患者的临床资料,制备组织芯片,应用免疫组化法(Envision)测定正常卵巢/输卵管组织、交界性卵巢肿瘤组织和卵巢上皮性癌组织中,p-ERK(ERK磷酸化形式)表达情况,应用Kaplan-Meier法进行生存分析,用χ2检验检测p-ERK在卵巢癌组织中的表达情况。结果:58例有完整随访信息的卵巢癌患者生存分析结果示,p-ERK有表达的卵巢癌患者生存时间短,无表达者生存时间长。p-ERK表达与临床病理之间的关系分析结果示,p-ERK在卵巢癌组织中的表达高于交界性卵巢肿瘤组织和正常卵巢组织(P<0.05)。p-ERK在不同卵巢癌组织学类型中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。p-ERK蛋白在Ⅲ-Ⅳ期卵巢上皮癌组织中的表达高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05)。术前CA125值和p-ERK表达呈正相关,p-ERK有表达的患者术前CA125值高(P<0.05)。p-ERK有表达化疗有反应的患者生存时间长,化疗无反应的患者生存时间短(P<0.05)。结论:p-ERK蛋白在卵巢癌中的表达,是影响卵巢癌患者生存预后及化疗反应的一个重要因素。

清肝活血方及其拆方对酒精性肝病大鼠肝组织P-ERK NF-κB表达的调控

目的:通过研究清肝活血方及其拆方对酒精性肝病大鼠肝组织P-ERK、NF-κB蛋白表达的影响,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝病的作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为空白组、CCl4组、造模组,造模组采用复合因素复制酒精性肝病模型。4周后将造模组随机分为模型组、清肝方组、活血方组、清肝活血方组。各中药组予相应中药灌胃2周。观察肝功能、肝脏病理学变化、Western blot法检测肝组织P-ERK、NF-κB蛋白表达。结果:清肝活血方及其拆方均可明显改善模型大鼠肝脏脂肪变性及炎症程度,清肝活血方优于拆方。清肝活血方能显著降低模型大鼠血清ALT水平,拆方无明显作用;清肝活血方及其拆方均可显著降低模型大鼠血清AST水平及肝组织P-ERK、NF-κB蛋白表达。结论:清肝活血方及其拆方可通过抑制肝组织P-ERK、NF-κB表达发挥对酒精性肝病的防治作用,清肝活血方的作用优于拆方。

二烯丙基二硫化物对膀胱癌细胞p-ERK表达的影响研究

目的观察大蒜提取物二烯丙基二硫化物对人膀胱癌T24细胞株p-ERK表达的影响,以探讨二烯丙基二硫化物抗膀胱癌的作用,为应用于临床肿瘤的治疗提供部分理论基础。方法用培养的人膀胱癌T24细胞株与二烯丙基二硫化物共孵育培养48 h后,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测二烯丙基二硫化物对人膀胱癌T24细胞株p-ERK基因转录的影响;并裂解人膀胱癌T24细胞株提取细胞总蛋白,蛋白免疫印迹检测p-ERK蛋白的表达情况。结果人膀胱癌T24细胞株与二烯丙基二硫化物共孵育后,p-ERK基因表达mRNA的水平明显降低(P<0.05),而对照组表达水平无明显变化(P>0.05);人膀胱癌T24细胞株与二烯丙基二硫化物共孵育后即可检测出p-ERK蛋白的表达减少(P<0.05),而对照组表达水平无明显变化(P>0.05)。结论二烯丙基二硫化物可下调人膀胱癌T24细胞株p-ERK基因的转录与p-ERK蛋白的表达,这可能是二烯丙基二硫化物抗癌的机制之一。