P-S6K1在肺癌的表达及其意义

目的检测磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(phosphorylation of p70 S6 kinase,P-S6K1)在肺癌中的表达状况,探讨影响P-S6K1表达的相关病理特征及临床意义。方法使用免疫组化En Vision法检测100例肺癌组织P-S6K1的表达,20例正常肺组织为对照。统计分析P-S6K1的表达与临床病理特征的关系。结果17/21例(81.0%)小细胞肺癌P-S6K1表达阳性,45/79例(57.0%)非小细胞肺癌P-S6K1表达阳性。3/20例(15%)正常肺组织P-S6K1表达为阳性。P-S6K1的表达与肺癌的病理分型、组织分化程度有关(P<0.05),与性别、肿瘤的解剖部位、淋巴结转移状态、肿瘤的大小、肿瘤TNM分期无关(P>0.05)。结论P-S6K1在肺癌中高表达,其中小细胞肺癌表达较非小细胞肺癌高。P-S6K1可作为鉴别肺癌与肺部良性疾病的一个新指标。

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在结直肠腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在结直肠腺癌发生、发展过程中可能的作用及临床意义。方法应用免疫组化检测60例结直肠腺癌组织及40例癌旁正常组织中p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的表达情况,比较各组差异,分析其与相关临床病理特征的关系,阳性率间相关性分析采用Spearman相关分析检验,检验水准α=0.05。结果p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在结直肠腺癌组织中表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。p-mTOR的表达与患者的淋巴结转移、TNM分期及分化程度有关(P<0.05)。p-S6K1的表达与患者的TNM分期及分化程度有关(P<0.05)。p-mTOR与p-4EBP1在结直肠腺癌组织中的表达有一定的正相关性(P<0.05)。p-mTOR与p-S6K1在结直肠腺癌组织中的表达有明显的正相关性(P<0.05)。结论p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在结直肠腺癌粘膜组织中过度表达可能是结直肠腺癌发生的重要机制之一,此三种磷酸化蛋白与结直肠腺癌的发生发展存在某种内在关联。

乳腺癌p-Akt、p-S6K1和ER表达对雷帕霉素治疗敏感性的预测

目的:研究对mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素敏感的乳腺癌的临床病理特征。方法:免疫组织化学方法检测乳腺癌60例石蜡包埋组织中p-Akt、p-S6K1和雌激素受体的表达。以p-Akt或p-S6K1表达预测对雷帕霉素敏感,并探讨这部分病例的临床病理特征。结果:乳腺癌60例中,p-Akt阳性表达25例(41.7%),p-S6K1阳性表达21例(35.0%)。预测乳腺癌32例(53.3%)对雷帕霉素治疗敏感。具有雷帕霉素敏感表达特征的乳腺癌常常同时表达雌激素受体。结论:约半数乳腺癌病例可能对雷帕霉素敏感,且是雌激素受体表达阳性病例。

p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义

目的研究p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在甲状腺乳头状癌及癌旁(肿瘤边缘2 cm)组织中的表达;分析它们的表达情况,探讨它们在甲状腺乳头状癌发生、发展过程中可能的作用及临床意义。方法收集2017年12月—2019年6月包头市肿瘤医院60例甲状腺乳头状癌组织为观察组,40例癌旁(肿瘤边缘2 cm)组织为对照组,应用免疫组化的实验方法检测两组研究对象中的p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1的表达情况。结果p-mTOR阳性率:观察组76.7%;对照组47.5%;(χ^2=8.970,P<0.05)。p-4EBP1阳性率:观察组38.3%;对照组15.0%(χ^2=6.350,P<0.05)。p-S6K1阳性率:观察组48.3%;对照组20.0%(χ^2=8.270,P<0.05)。p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在甲状腺乳头状癌组织中表达水平均高于癌旁组织(P<0.05)。结论p-mTOR、p-4EBP1及p-S6K1在甲状腺乳头状癌组织中过度表达可能是甲状腺乳头状癌发生发展的重要机制之一,此3种磷酸化蛋白可能与甲状腺乳头状癌的发生发展存在某种内在关联。

基于mTOR/p-S6K1探讨加味附子理中汤干预UC大鼠肠黏膜炎症反应的效应机制

目的:探讨加味附子理中汤治疗溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠的疗效及相关作用机制。方法:选用72只雄性SD大鼠,分为正常组,模型组,柳氮磺胺嘧啶组(0.5 g·kg^-1),加味附子理中汤高、中、低剂量组(23.62,11.81,5.91 g·kg^-1)。运用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇复合造模法复制UC大鼠模型,连续灌胃治疗2周,观察各组大鼠一般情况,大鼠麻醉后腹主动脉采血,取结肠组织。运用结肠黏膜损伤指数(CMDI)半定量评分,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠结肠组织病理学改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素(IL)-4,IL-6,IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫组化和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测结肠黏膜组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及磷酸化核糖体蛋白S6激酶1(p-S6K1)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠CMDI评分显著升高(P<0.01),血清IL-4,IL-10含量显著下降,IL-6,TNF-α含量显著上升(P<0.01),结肠黏膜组织mTOR,p-S6K1蛋白表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,加味附子理中汤高剂量组大鼠CMDI评分明显下降(P<0.05),高、中剂量组大鼠血清促炎因子IL-6,TNF-α显著降低(P<0.01),抗炎因子IL-4,IL-10明显升高(P<0.05,P<0.01);加味附子理中汤高剂量大鼠mTOR,p-S6K1的蛋白表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论:加味附子理中汤高剂量组可显著减轻UC结肠黏膜充血水肿、炎性细胞浸润、腺体扭曲、排列紊乱等病理表现,其机制可能与其下调mTOR/p-S6K1信号、调控炎症因子的分泌有关。

mTOR/p-4EBn,p-p70S6k信号通路对绒癌细胞株JEG-3的作用

目的:运用雷帕霉素对mTOR的特异性抑制作用,探讨mTOR信号通路对人绒癌细胞株JEG-3的作用的分子机制。方法:运用RTPCR检测雷帕霉素对其靶点mTOR的mRNA表达量的影响;用western-blot检测雷帕霉素处理后mTOR及调控的下游蛋白p-4EBP1和p-P70S6K的蛋白表达量的变化。结果:绒癌细胞JEG-3中mTOR/p-4EBP1,p-P70S6k信号通路对绒癌细胞的增殖起着重要作用。

磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的定位表达研究

目的研究磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞中的表达部位。方法随机选取于2005年3月—2009年9月就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院的285例乳腺癌患者,挑选乳腺癌组织及癌旁组织蜡块,重新切片,使用免疫组化方法检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在细胞中的表达部位。结果在285例癌组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1的染色阳性例数分别为279例、161例和226例;在285例癌旁组织切片中,p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1的染色阳性例数分别为239例、81例和136例。p-mTOR在癌组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有270例,核浆共表达有8例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有0例,细胞浆有234例,核浆共表达有5例,癌组织与癌旁组织差异未见明显统计学意义(P=0.554);p-4EBP1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有45例,核浆共表达有113例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有1例,细胞浆有6例,核浆共表达有74例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义(P=0.001);pS6K1在癌组织中表达定位于细胞核有3例,细胞浆有28例,核浆共表达有195例,在癌旁组织中表达定位于细胞核有6例,细胞浆有0例,核浆共表达有130例,癌组织与癌旁组织差异有统计学意义(P=0.000)。结论mTOR信号通路中磷酸化4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌细胞浆中表达增高与乳腺癌相关。

新疆维族与汉族乳腺癌组织mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1表达差异研究

目的:探讨新疆维吾尔族和汉族乳腺癌组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)及其下游分子4EBP1和S6K1的表达差异。方法:选取2005-03-01-2009-09-30新疆医科大学附属肿瘤医院的维吾尔族和汉族女性浸润性乳腺癌患者285例,使用免疫组化方法检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的表达状况;分别选取2012-01-01-2012-06-30新疆医科大学附属肿瘤医院63例维、汉新鲜乳腺癌和癌旁组织样本,使用荧光定量RT-PCR法检测mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的mRNA表达状况。结果:免疫组化结果显示,维吾尔族和汉族p-mTOR在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为77.1%和67.4%(P=0.067),在癌旁组织中的阳性表达率分别为57.6%和61.7%(P=0.485);p-4EBP1在癌组织中的阳性表达率分别为31.9%和20.0%(P=0.020),在乳腺癌旁组织中的阳性表达率分别是4.9%和12.1%(P=0.029);p-S6K1在癌组织中的阳性表达率分别为41.0%和43.3%(P=0.695),在乳腺癌旁组织中的阳性表达率分别为14.0%和22.7%,P=0.054;荧光定量RT-PCR结果显示,维、汉乳腺癌组织中mTOR mRNA相对定量结果差异有统计学意义,P=0.045;4EBP1和S6K1mRNA相对定量结果差异无统计学意义,P值分别为0.128和0.404。结论:mTOR信号通路中p-4EBP1的表达水平存在维、汉民族的差异,为研究维、汉不同民族之间乳腺癌差异及个体化治疗提供了进一步研究方向。mTOR及其下游分子mRNA表达水平与磷酸化蛋白的表达并不完全一致,提示蛋白表达的调控位点可能位于转录后水平。

双氢青蒿素抑制肝癌细胞生长机制的初步研究

目的初步探究双氢青蒿素对肝癌细胞Huh7和Huh6生长的影响及可能存在的机制。方法培养肝癌细胞Huh7和Huh6,使用CCK-8法和结晶紫染色检测双氢青蒿素对肝癌细胞Huh7和Huh6生长抑制情况。Western Blot检测药物作用于细胞48 h后,AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,双氢青蒿素(12.5μM、25μM、50μM)可以下调AKT/mTOR信号通路p-AKT、p-S6K、p-S6蛋白的表达水平,从而影响肝癌细胞的生长。结论双氢青蒿素通过抑制AKT/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞生长。

鞘内注射胶质细胞源性神经营养因子对大鼠糖尿病神经病理性疼痛的影响

目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(glail cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对糖尿病神经病理性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)大鼠行为学的影响及机制。方法将雄性SD大鼠50只随机分为对照组(N组,10只)、模型组(40只),造模后的模型组再随机分成DNP组(DC组,10只,仅给予10μl PBS缓冲液)、GDNF治疗组(DG组,10只,注射2μg GDNF+10μl PBS缓冲液)。各组大鼠均测造模前,造模后第3、21天,首次给药或PBS缓冲液后第1、3、7、14天的压尾机械阈值(TFT)与热痛缩爪潜伏期(PWL);处死大鼠后,取L_(4-6)脊髓组织,采用Western blot法测定脊髓背角磷酸化PI3K、p-AKT、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)以及磷酸化核糖体S6蛋白激酶(p-S6K)蛋白表达水平。结果造模后第21天,与N组比较,模型组的血糖明显升高(P<0.01),且TFT与PWL也均明显缩短(P<0.01);给药后第14天,与DC组相比较,DG组TFT和PWL均明显升高(P<0.01),且磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达均明显降低(P<0.01);给药后第14天,与N组相比较,DC组TFT和PWL均明显降低(P<0.01),且磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达均明显升高(P<0.01);给药后第14天,DG组与N组相比较,在TFT、PWL以及磷酸化PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-S6K表达等方面的差异均无统计学意义。结论鞘内注射GDNF能够减轻大鼠DNP,其机制可能与GDNF通过调控PI3K-AKT信号通路,降低p-AKT表达水平,从而抑制p-mTOR和p-S6K的表达有关。

mTOR信号通路在难治性癫痫中的作用机制

目的 明确难治性癫痫致痫灶脑组织中p-mTOR、p-S6K1、p-4EBP1的表达变化,探讨mTOR信号转导通路在难治性癫痫中的作用.方法 收集2010年3月-2011年7月期间于吉林大学第一医院癫痫中心住院并行手术治疗的24例难治性癫痫患者的脑组织作为试验组,收集同期因脑外伤而行急诊手术治疗的6例无癫痫病史患者的颞叶或者额叶脑组织作为对照组,应用免疫组织化学方法,观察两组脑组织p-mTOR、p-S6K1、p-4EBP1的表达,并进行统计学分析.结果 ①试验组和对照组神经元细胞及神经胶质细胞均有p-mTOR、p-S6K1、p-4EBP1的表达,试验组表达高于对照组(P<0.01).②试验组患者致痫灶脑组织病理及超微结构变化:光镜下可见神经元不均及不成熟神经元;细胞核空泡状,胞质少,深染,可见嗜酸小体,神经元变性呈三角形;胶质细胞及小血管增生;还可见嗜神经细胞现象;电镜下可见神经细胞变性坏死,核固缩变形,核仁偏位,核膜断裂甚至溶解;星形胶质细胞肿胀,染色质边集,细胞膜水肿;可见线粒体肿胀透明,部分线粒体空泡化及嵴异常.③试验组致痫灶脑组织血管部位均有p-mTOR、p-S6K1、p-4EBP1的高表达.结论 难治性癫痫致痫脑组织p-mTOR、p-S6K1、p-4EBP1表达增加,mTOR信号通路可能与血管形成及血管增殖相关.