PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白在结直肠癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系

目的探究PI3K/Akt/mTOR信号通路中PTEN、p-Akt和p-mTOR在结直肠癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法选取2016年1月—2017年12月中国人民武装警察部队海警总队医院52例结直肠癌活检标本。采用免疫组织化学SP法检测PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白在结肠癌标本及癌旁正常组织标本中的表达;Logistic回归模型分析PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析PI3K-Akt-mTOR信号通路相关蛋白表达与预后的关系。结果结肠癌组织中PTEN阳性率低于癌旁正常组织(P<0.05),而p-Akt、p-mTOR阳性率均高于癌旁正常组织(P<0.05);淋巴结转移患者的p-Akt和p-mTOR阳性率均高于无淋巴结转移患者(P<0.05);肿瘤浸润达到浆膜层患者的p-Akt阳性率高于未达浆膜层患者(P<0.05);肿瘤低分化患者的p-Akt阳性率高于高、中分化患者(P<0.05)。临床分期Ⅲ、Ⅳ期患者的p-Akt和p-mTOR阳性率均高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05)。结直肠癌患者临床分期Ⅲ、Ⅳ期[OR=4.098(95%CI:2.337,7.134)]是p-Akt阳性表达的影响因素(P<0.05)。PTEN阳性患者的4年生存率为59.62%,高于阴性患者的21.15%(P<0.05);p-Akt阴性患者4年生存率为65.38%,高于阳性患者的19.23%(P<0.05);p-mTOR阴性患者4年生存率为61.54%,高于阳性患者的21.15%(P<0.05)。结论PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达与结直肠癌的发展、预后密切相关,p-Akt、p-mTOR有望成为新的结直肠癌治疗靶点和临床指标。

1,25(OH)2D3对高糖诱导的人肾小球系膜细胞株增殖能力、周期分布影响及其机制

目的观察1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对高糖诱导的人肾小球系膜细胞株增殖能力、周期分布影响,并探讨其机制。方法取对数生长期人肾小球系膜细胞并分为6组,干预组加入30 mmol/L的D-葡萄糖和10^-8 mol/L的1,25(OH)2D3,1,25(OH)2D3组加入10^-8 mol/L的1,25(OH)2D3,高糖组加入30 mmol/L的D-葡萄糖,高渗组加入25 mmol/L的甘露醇,LY294002组加入2μg/mL的PI3K特异性抑制剂(LY294002),正常对照组未加任何刺激物,各组培育48 h。采用CCK-8法检测细胞450 nm波长处吸光度值(A450),并计算细胞增殖抑制率;采用流式细胞术检测细胞周期分布,并计算系膜细胞增殖指数(Mc增殖指数);采用Western blotting法检测细胞Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白,并计算p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量比值。结果与正常对照组比较,1,25(OH)2D3组、LY294002组细胞A450值降低,高糖组细胞A450值升高(P均<0.05);与高糖组比较,干预组细胞A450值降低(P均<0.05)。与正常对照组比较,1,25(OH)2D3组和LY294002组S期、G2/M期细胞数及高糖组G1期细胞数增多,1,25(OH)2D3组和LY294002组G1期细胞数及高糖组S期、G2/M期细胞数减少(P均<0.05);与高糖组比较,干预组G1期细胞数减少,而S期、G2/M期细胞数增多(P均<0.05)。与正常对照组比较,1,25(OH)2D3组和LY294002组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量比值降低,高糖组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量比值升高(P均<0.05);与高糖组比较,干预组p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量比值降低(P均<0.05)。结论1,25(OH)2D3可抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞的增殖能力,并将细胞阻滞于G1/S期,作用机制可能与其下调PI3K/Akt/mTOR通路有关。

自噬相关蛋白在肾透明细胞癌与癌旁组织中表达状况的比较研究

目的 检测自噬表达水平在正常组织和肾透明细胞癌组织中的差异. 方法 2011年1-4月采用免疫组化方法检测69例肾透明细胞癌患者的正常组织和肿瘤组织中自噬相关蛋白（p-mTOR、P62、LC3、Beclin 1、ULK1、ATG5、ATG7）表达的差异,并对其表达差异及各蛋白间表达量变化的相关性进行统计学分析.2011年8月采用透射电镜对4例肾癌患者的正常组织和肿瘤组织进行细胞超微结构的分析. 结果 与正常组织相比,p-mTOR（P=0.004）、P62（P=0.000）和ULK1（P=0.000）在肿瘤组织中的表达上调,而Beclin 1（P=0.000）、LC3（P=0.000）和ATG7（P=0.000）的表达下调,差异均有统计学意义.ATG5表达量无明显变化（P=0.349）.形态分析结果显示肿瘤细胞内的自噬体数量少于正常组织.p-mTOR与P62（P=0.026）、LC3（P=0.027）和ATG7（P=0.049）的表达水平变化之间具有相关性,而与Beclin 1不相关. 结论 自噬的表达水平在肾透明细胞癌中下调,其下调受mTOR等多种自噬相关蛋白的协同影响.