靶向p53-MDM2的抗肿瘤小分子抑制剂的研究进展

p53能够调控细胞周期、诱导细胞凋亡和DNA修复,被称为“抑癌蛋白”。p53的功能失调通常会引起遗传不稳定性,促进肿瘤发生。MDM2是p53最重要的负反馈调节因子之一,能够抑制p53的转录活性和稳定性,从而抑制p53的抗癌作用。因此,p53-MDM2是肿瘤治疗的关键靶标,而靶向p53-MDM2的小分子抑制剂是一种极具前景的抗肿瘤药物。本文介绍了p53和MDM2在肿瘤发生发展中的作用以及p53与MDM2的结合位点特征,并对靶向p53-MDM2小分子抑制剂的研究进行了综述。

P38 MAPK抑制剂对急性肺损伤大鼠细胞间黏附分子-1表达的影响

目的观察P38 MAPK抑制剂预处理对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,探讨P38 MAPK抑制剂干预ALI的理论基础。方法腹腔内注射+气管内给LPS复制大鼠ALI模型,用免疫组化方法测定肺组织ICAM-1的表达。结果模型组和预处理组的ICAM-1表达显著高于对照组(P<0.01,P<0.05),且模型组高于预处理组(P<0.05)。结论P38MAPK抑制剂预处理可下调大鼠细胞黏附分子ICAM-1的表达,减轻肺组织的病理损害,能起到防治ALI的作用。

COX-2抑制剂在大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤中对P选择素和细胞间粘附分子-1的影响

目的探讨特异性环氧合酶-2抑制剂(cyclooxygenase-2 inhibitor,COX-2 inhibitor)NS398能否抑制大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤中P选择素(P-selectin,Ps)及细胞间粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达。方法采用单纯随机抽样的方法将75只SD大鼠分为3组:假手术组(15只)、移植组(15对)、移植+NS398组(15对)。各组均于术后1、3、6 h取血测定血清淀粉酶含量,光镜下观察胰腺病理改变,免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测胰腺组织中ICAM-1及Ps的表达情况和基因水平的变化。结果假手术组各时间点胰腺组织损伤不明显,血淀粉酶不升高(P>0.05);随再灌注时间的延长,移植组胰腺组织损伤加重,血淀粉酶较同时点假手术组明显升高(P<0.05);但与移植组比较,移植+NS398组胰腺组织损伤及血淀粉酶升高均较轻(P<0.05)。假手术组各时点Ps和ICAM-1均不表达;移植组、移植+NS398组各时点Ps和ICAM-1均有表达,但移植+NS398组Ps和ICAM-1的表达均明显低于移植组(P<0.05)。结论 NS398能抑制胰十二指肠移植缺血再灌注损伤大鼠的Ps及ICAM-1表达,对大鼠胰十二指肠移植缺血再灌注损伤有保护作用。

PI3K/Akt通路与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂产生耐药性的关系研究进展

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epithelial growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)是近年来备受关注的一类肿瘤靶向治疗药物,具有很强的作用效果,能够明显提高某些癌症患者的生存质量,但最终几乎所有患者都会产生耐药性导致肿瘤进展。PI3K/Akt信号通路能够调节肿瘤细胞的增殖和存活,与肿瘤的侵袭转移行为密切相关。最近研究发现PI3K/Akt信号通路在EGFR-TKIs产生耐药性中也发挥重要作用。该文对该通路与EGFR-TKIs产生耐药性的关系的研究进展作一综述。

细胞周期抑制剂p27^(kipl)与肿瘤

细胞周期有严格的顺序,由4个期即G_1→S→G_2→M构成。通过细胞周期,细胞实现DNA的复制和姐妹染色单体的平均分配。这些过程受到信号传导途径和反馈径路的精确调控,其正常与否和细胞以及个体的生长、分化、衰老、癌变密切相关。细胞周期中G_1→S和G_2→M是两个重要的转换时相。目前认为Rb蛋白的磷酸化可促使DNA合成,使细胞从G_1期进入S期。而Rb蛋白的磷酸化,受活性细胞周期索依赖性激酶家族(CDKS)所催化。CDKS有正反两种调控因子。

P450_(17α)抑制剂──17位取代甾体化合物的三维定量构效关系

目的 建立P45 0 1 7α的 17位取代甾体抑制剂的三维定量构效关系 ,为设计新的、更有效的抑制剂提供理论依据。方法和结果 利用比较分子力场方法 ,建立了P45 0 1 7α抑制剂的三维定量构效关系模型。交叉验证回归系数R2CV、非交叉验证回归系数R2 和标准偏差SEE分别为 0 5 38,0 799和 0 2 5 7。说明该系列化合物分子周围立体场和静电场的分布与生物活性间有良好的相关性。用该模型对本室合成的 3个化合物进行活性预测 ,结果与实测值相符。结论 所得模型支持了假设的抑制剂作用机理和作用模型。所得CoMFA模型有一定的预测能力 ,可用来指导设计新的P45 0 1

前列腺癌PI3K／p110β靶向治疗研究现状

晚期前列腺癌特别是去势治疗后复发的去势抵抗性前列腺癌目前临床无法治愈,迫切需要合适的新型治疗药物。磷脂酰肌醇3-激酶家族(PI3K)是一组细胞内重要信号分子,其活性增强是肿瘤发生与发展的关键因素之一,其中IA类PI3K激酶在大多数癌症组织有异常表达与激活。临床与基础研究已经证实IA类p110β在前列腺癌细胞的表达明显增高,并参与了雄激素受体调控的基因表达,参与去势治疗后病情复发与恶性演变,是治疗晚期前列腺癌的新靶点。目前文献已经有多种p110β特异性抑制剂的报道,其中两个抑制剂(GSK2636771和AZD8186)已进入临床试验。本文对PI3K/p110β在前列腺癌中的表达及其靶向药物的应用进行综述。

Nutlin-3a对p53-MDM2复合物稳定性影响

p53蛋白是一种与细胞周期停滞和细胞凋亡有关的蛋白质.在受到细胞压力或环境扰动后,p53促进下游多个靶基因的转录,介导肿瘤抑制.MDM2是主要的E3泛素连接酶,也是p53的负调控因子.MDM2可促进p53的泛素化和核输出,抑制p53的抑癌活性.因此MDM2对p53的负调控始终是肿瘤治疗中急切需要解决的问题.Nutlin-3a是被证明可以有效抑制p53-MDM2相互作用的小分子抑制剂.本文使用全原子分子动力学模拟,研究Nutlin-3a对p53-MDM2复合物的稳定性的影响.结果表明,通过引起p53和MDM2间Phe19-Gln72的氢键和Glu17-Lys94的盐桥发生的断裂,Nutlin-3a可以削弱p53和MDM2间的相互作用.我们的工作对Nutlin-3a小分子抑制剂的作用机制进行了说明,揭示了抗癌药物Nutlin-3a介导的p53-MDM2复合物亲和力降低的分子机制,并为针对p53蛋白的有效抗癌治疗提供了理论基础.

p110δ/α小分子抑制剂在小鼠心脏移植急性排斥反应中作用机制

目的研究p110α/δ小分子抑制剂A66/CAL^-101对小鼠心脏移植模型急性排斥反应的影响及作用机制。方法建立小鼠心脏移植模型,随机分为同系移植组、急性排斥组、p110α抑制剂干预组(A66组)、p110δ抑制剂干预组(CAL^-101组)。A66组、CAL^-101组建模后腹腔注射1 mg·kg^-1A66、CAL^-101,同系移植组、急性排斥组腹腔注射1 mL·kg^-1二甲基亚砜(DMSO),每天1次。取6只小鼠连续给药7 d后,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测外周血干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-10(IL^-10)、白细胞介素-17(IL^-17)、白细胞介素-21(IL-21)含量。结果 A66组,CAL^-101干预组,急性排斥组INF-γ分别为(182.45±25.66),(256.84±36.65),(415.68±58.94)pg·mL^-1,IL^-17分别为(11.62±1.58),(13.64±1.74),(18.69±2.64)pg·mL^-1,IL-21分别为(28.64±3.53),(36.54±4.11),(54.68±6.55)pg·mL^-1,IL^-10分别为(410.52±45.52),(320.51±38.69),(223.54±45.36)pg·mL^-1,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 p110α/δ小分子抑制剂A66/CAL^-101能延长移植心脏存活时间,改善心肌细胞水肿、炎性细胞浸润等现象。

P21活化激酶在肝脏疾病中的研究进展

p21活化激酶(PAK)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与人体一系列细胞功能存在密切的联系,如细胞的生长、生存、迁移、周期等生物学过程。近年来,多项研究显示,PAK能通过不同的细胞信号通路在肝炎、肝缺血-再灌注损伤、肝纤维化,以及肝癌的发生、发展中扮演重要角色。本文从PAK在肝脏相关疾病中的作用和发病机制等方面进行综述,并进一步探讨PKA抑制剂在肝脏疾病中的作用,旨在为肝脏相关疾病的临床治疗和药物研究提供更多理论依据。

人类细胞色素P450与免疫:对药物代谢、疾病的影响

人类细胞色素Ｐ４５０有三十多种，肝脏中富含ＣＹＰ１，２，３家族的成员，主要参与外源性物质的代谢，ＣＹＰ１７、ＣＹＰ２１等及分布于血管内皮的ＣＹＰ２Ｊ２则参与内源性物质的合成和代谢。除物质代谢外，近年来研究发现人类细胞色素Ｐ４５０还与免疫有关：细胞因子可抑制或诱导 ＣＹＰ的表达和 ＣＹＰ的代谢活性，已在淋巴细胞上发现有ＣＹＰ表达；ＣＹＰ可影响细胞黏附分子的作用、参与自身免疫性疾病的免疫损伤等。本文就人类细胞色素Ｐ４５０与细胞因子、黏附分子及自身免疫反应的关系，对药物代谢、疾病的影响及免疫抑制剂的开发进展作一介绍。

干扰p53-MDM2蛋白相互作用的小分子抑制剂的研究进展

p53-MDM2蛋白相互作用是抗肿瘤药物研究的重要作用靶点,抑制p53-MDM2结合是激活p53的有效途径。大量的药物筛选方法和手段已经用于寻找p53-MDM2相互作用的新型抑制剂,其中小分子抑制剂是最具前景的研究领域之一。该文总结了近年来国内外p53-MDM2蛋白结合小分子抑制剂的研究进展。

喹啉酮类小分子p53-MDM2结合抑制剂3D-QSAR研究

目的设计、合成高活性的小分子p53-MDM2结合抑制剂,建立具有预测能力的3D-QSAR模型。方法采用分子模拟软件Sybyl,利用比较分子场方法(CoMFA)、比较分子相似性指数法(CoMSIA),选择已报道的具有p53-MDM2结合抑制活性的一类有相同母核的21个异喹啉酮衍生物作为训练集,7个作为预测集进行3D-QSAR模型的建立和验证。结果模型具有较高q2(q2CoMFA=0.545,q2CoMSIA=0.528)和r2(r2CoMFA=0.984,r2CoMSIA=0.972)值,表明2组模型具有较高的拟和能力及预测能力。结论该模型具有较高的预测能力,为设计、合成高活性的小分子p53-MDM2结合抑制剂提供了理论依据。

大黄素通过抑制核转录因子-κB信号途径对脂多糖诱导的ARDS小鼠发挥肺保护作用

目的探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠肺保护作用的可能机制.方法选择72只健康雄性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为对照组、模型组和大黄素高、中、低剂量组及p65信号通路上游分子核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂激酶β(IKKβ)活化抑制剂BAY65-1942(BAY)组,每组12只.采用经气道雾化吸入LPS 40μL的方法复制ARDS小鼠模型;对照组雾化吸入等量磷酸盐缓冲液(PBS).大黄素低、中、高剂量组于制模前1 h通过腹腔注射5、10、20 mg/kg大黄素预处理;BAY组腹腔注射BAY 5 mg/kg预处理;对照组与模型组给予等量生理盐水.制模后48 h处死动物,取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,光镜下观察各组小鼠肺组织病理学改变,用蛋白质免疫印迹试验检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-8、IL-1β)、p65及p65/磷酸化p65(p-p65)、IKKβ、磷酸化IKKβ(p-IKKβ)的蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中髓过氧化物酶(MPO)水平及NF-κBp65与DNA的结合力,流式细胞术检测BALF中表面分子CD11b+Gr-1+中性粒细胞(PMN)的比例.结果与对照组比较,模型组肺泡结构破坏明显、肺泡间隔明显增宽、炎症细胞浸润明显增多;肺损伤评分明显升高;BALF中MPO水平、CD11b+Gr-1+PMN比例均明显升高;同时组肺组织IL-8、TNF-α、IL-1β、p65、p-p65、IKKβ以及p-IKKβ的蛋白表达水平均明显增加,NF-κBp65与DNA的结合力也明显增强.与模型组比较,不同剂量大黄素组小鼠肺泡结构破坏减少,肺泡间隔增宽程度减轻,肺组织炎症细胞浸润减少,肺损伤评分明显下降;BALF中MPO水平、CD11b+Gr-1+PMN比例明显降低,NF-κBp65与DNA的结合力也明显减弱;肺组织TNF-α、IL-8、IL-1β、p65、p-p65、IKKβ与p-IKKβ的蛋白表达水平下降,且以大黄素高剂量组的作用比低、中剂量组更明显〔肺损伤评分(分):2.10±0.48比3.03±0.49、2.83±0.53,MPO(ng/L):486.04±35.74比683.07±79.12、585.06±87.35,CD11b+Gr-1+PMN百分比:(6.61±1.52)%比(20.68±4.17)%、(11.54±2.39)%,NF-κB p65与DNA的结合力(A值):1.64±0.23比2.41±0.16、2.10±0.12,TNF-α/GAPDH:0.81±0.09比1.07±0.11、0.83±0.16,IL-8/GAPDH:0.64±0.05比1.17±0.03、0.98±0.02,IL-1β/GAPDH:0.73±0.06比1.07±0.09、0.89±0.08,p65/GAPDH:0.82±0.11比0.97±0.06、0.86±0.05,p-p65/GAPDH:0.50±0.06比0.61±0.03、0.53±0.04,IKKβ/GAPDH:0.69±0.10比0.95±0.05、0.76±0.06,p-IKKβ/GAPDH:0.63±0.07比1.00±0.03、0.77±0.08;均P<0.05〕.BAY组的作用与大黄素高剂量组相当.结论大黄素能剂量依赖性抑制LPS诱导的ARDS小鼠肺组织炎症,减轻肺损伤,该作用机制可能与抑制NF-κB的信号通路活化有关.

黄芩苷通过调控c-Myc介导的细胞周期抑制胆管癌细胞增殖

目的探究黄芩苷(BC)对人胆管癌(CCA)细胞QBC939和RBE增殖的影响及其潜在机制。方法取对数生长期QBC939和RBE细胞,不同浓度的BC处理细胞24 h后,采用CCK-8法分别检测BC对CCA细胞增殖及敲低原癌基因蛋白质(c-Myc)后对BC引起细胞增殖活性改变的影响;高倍显微镜观察BC对细胞生长状态的影响;流式细胞术检测BC对CCA细胞周期的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)实验分别检测BC及小干扰RNA(siRNA)敲低CCA细胞中c-Myc后对周期相关蛋白周期素依赖激酶抑制剂(p27)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及c-Myc表达的影响。结果与0μmol/L组相比,BC明显抑制QBC939和RBE细胞的增殖活性(P<0.01),且高倍显微镜下观察到细胞生长减缓;BC可将QBC939细胞周期阻滞于S期(P<0.05);随着BC浓度的增加,p27的蛋白水平明显上调,而Cyclin D1则显著降低(P<0.01);BC可下调c-Myc的蛋白表达,且敲低c-Myc后p27和Cyclin D1蛋白表达的变化趋势与BC处理时一致(P<0.05);单独敲低c-Myc后可明显抑制QBC939和RBE细胞的存活率(P<0.01),并能进一步增强BC的抑制作用。结论BC通过抑制c-Myc信号通路阻滞细胞周期,进而抑制CCA细胞的增殖。

Prima1MET细胞毒性效应对p53突变的慢性淋巴细胞白血病细胞p53蛋白表达的影响研究

在慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia,CLL)患者中,TP53基因缺陷CLL患者预后最差,这与治疗的不良反应和生存率的降低[1]始终相关。随着B细胞受体信号转导蛋白和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)小分子抑制剂的使用,CCL的治疗取得了前所未有的进展。依布替尼(一种布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂)或维奈托克(一种BH3模拟结合Bcl-2)这类药物一定程度上在初治和复发/难治性CLL患者[2]中是有效的。

CBP/P300溴结构域联芳基类抑制剂三维定量构效关系研究

CREB结合蛋白(CBP)和与其高度同源的P300蛋白是组蛋白乙酰化酶的两个亚型,两者通过它们的溴结构域(bromodomain,BRD)与染色质结合,目前,CBP/P300已经成为人类在肿瘤靶点领域中的研究热点。本研究基于CBP/P300溴结构域联芳基类抑制剂建立三维定量构效关系,采用比较分子力场分析法(Co MFA)和比较分子相似性指数分析法(Co MSIA)分别建立35个已知活性抑制剂的3D-QSAR模型,以确定CBP/P300溴结构域联芳基类抑制剂分子结构与生物活性之间的定量关系。Co MFA和Co MSIA模型活性数据p IC50的预测值与实验值基本一致,说明这两个模型具有较高的预测能力和统计学意义。根据Co MFA和Co MSIA模型所提供的立体场、静电场、疏水场、氢键给体场、氢键供体场等信息提出了改善此类抑制剂活性的药物设计思路,为指导设计具有更高活性的新分子和预测更加有效的CBP/P300溴结构域抑制剂提供理论依据。

联苯酰胺类p38αMAPK抑制剂三维定量构效关系研究

p38α丝裂原活化蛋白激酶(p38αmitogen-activated protein kinase,p38αMAPK)是治疗类风湿关节炎的最有效的靶点之一,联苯酰胺是最近新发现的一类强效、高选择性的p38αMAPK抑制剂,本文运用比较分子力场分析(CoMFA)研究21个联苯酰胺类p38αMAPK抑制剂三维定量构效关系。建立CoMFA模型的交叉验证系数q^2=0.542,非交叉验证相关系数r^2=0.935,统计方差比F=43.136。预测训练集和测试集化合物活性,其值和实验值非常接近,表明模型的预测能力很好。模型显示立体场和静电场对生物活性的贡献分别为78.8%和21.2%。CoMFA模型的三维等值图可为化合物的结构改造提供理论依据。

MDM4小分子抑制剂的研究进展

MDM4是肿瘤抑制蛋白P53最重要的负性调控因子之一,研究发现MDM4在多种肿瘤中异常扩增或过度表达,如乳腺癌、视网膜母细胞瘤等。肿瘤组织内异常扩增的MDM4通过直接抑制P53的转录功能和(或)降低P53的稳定性抑制P53蛋白的抗肿瘤活性,进而促进肿瘤细胞的增殖。近年来MDM4作为一种潜在的抗肿瘤治疗靶点受到广泛关注,同时靶向MDM4的小分子抑制剂进展迅速。本文就MDM4的生物学特征及MDM4小分子抑制剂的研究进展进行综述,为针对MDM4的肿瘤治疗药物的研究与开发提供一些参考。

抑制p53-HDM2结合为靶点的候选药物研究进展

目的介绍以p53与人双微基因2(HDM2)结合为靶点的小分子抑制剂作为抗肿瘤候选药物的研究进展。方法查阅国内外有关文献,总结、归纳已报道的小分子抑制剂的作用特点及化学特征。结果与结论小分子抑制剂作用特点:可以模拟p53与HDM2结合,或抑制p53-HDM2复合物泛素化,或抑制HDM2的异常表达,将p53从HDM2的控制中释放出来,激活p53通路,达到抑制肿瘤细胞生长和诱导其凋亡的作用;按结构主要分为:Nutlin系列;螺环羟吲哚类;苯并二氮类;查尔酮类;降莰烷类;磺胺类;异吲哚酮类;羟基喹啉类;RITA;5-去氮杂黄素类;藤黄酸;姜黄素;模拟p53多肽类等。