P12耐热钢蠕变微观组织演化研究及寿命预测分析

为探究P12耐热钢蠕变断裂机理,对P12耐热钢在630℃、70 MPa应力条件下进行了一系列不同加载时间的蠕变试验,然后对蠕变后的试样进行金相显微组织检测和扫描电镜分析,以获得其高温蠕变过程中微观组织的演化情况,同时结合计算机图像处理技术对P12耐热钢在蠕变条件下的碳化物析出和珠光体球化程度进行了定量分析。分析结果表明:蠕变时间的延长会加剧P12耐热钢碳化物析出程度,一方面碳化物的数量不断增多,另一方面碳化物的尺寸也随之增大;而珠光体球化级别也随蠕变时间的累积而加剧,蠕变时间为360 h时,珠光体球化级别即高达3级;此外,珠光体组织中的渗碳体数量和尺寸随蠕变的加剧而急剧减小。蠕变过程中,P12耐热钢微观组织的劣化或将是其蠕变断裂的重要因素。文章还对P12高温蒸汽管道进行寿命预测以及高温持久试验,确定了P12耐热钢的Manson-Haferd参数P_(MH)(σ)与应力σ之间的关系,并基于Manson-Haferd参数法预测出应力σ为43.15 MPa、服役温度为520℃的P12高温蒸汽管道的服役寿命为19.98万h。

高压锅炉管用钢P12的洁净度分析

通过对EAF-LF-VD-MC工艺生产P12各工艺环节系统取样,采用多种分析方法分析夹杂物的形貌、尺寸、数量及组成,系统研究了P12生产过程中洁净度演变规律。研究结果表明,在精炼环节,钢中T[O]和显微夹杂分别下降51.2%、50.8%;VD处理后到锻材中,钢液增氮率为54.2%,钢液二次氧化较为显著;锻材中T[O]、显微夹杂和大型夹杂数量平均值分别为20×10-6、6.19个/mm2、0.35 mg/kg,达到了较高水平。

伴有t(2;21;8)(p12;q22;q22)急性髓系白血病M2的MICM特征与诊断的探讨

本研究应用形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学(M ICM)分型技术联合检测伴有复杂变异核型t(2;21;8)(p12;q22;q22)的急性髓系白血病(AML-M2),并探讨其特征及诊断意义。取患者骨髓涂片行瑞氏-姬姆萨染色和细胞化学染色进行骨髓细胞形态学FAB分型;流式细胞术(FCM)检测白血病细胞免疫表型;新鲜骨髓细胞短期培养法常规制备染色体标本,RHG显带技术进行核型分析,采用双色双融合AML/ETO探针及全染色体涂染(CP)探针检测有丝分裂中期荧光原位杂交(FISH)信号,并与常规R显带细胞遗传学检测结果进行比较分析,巢式RT-PCR检测AML1-ETO融合转录本。结果表明:病例1原始粒细胞伴嗜酸粒细胞及单核细胞比例增高;病例2符合以异常中幼粒细胞增高为主的AML-M2b;染色体核型分析结合FISH检测证实两例患者均存在t(2;21;8)(p12;q22;q22)复杂核型;AML1/ETO融合基因转录本阳性,免疫表型显示CD34和HLA-DR共表达,伴CD19和CD56表达。结论:应用WHO提出的细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学技术(M ICM)联合检测的实验室诊断方法对准确诊断复杂变异核型t(2;21;8)(p12;q22;q22)AML的分型具有重要意义。

口蹄疫病毒P12X3C3D多基因编码蛋白在昆虫细胞中的表达与检测

利用杆状病毒表达系统构建了包含有口蹄疫病毒(FMDV)P12X3C3D多基因片段的重组杆状病毒。将该病毒感染Sf9细胞后,利用SDS-PAGE及夹心ELISA方法检测目的蛋白的表达。结果表明,重组杆状病毒能够表达FMDV目的蛋白,该表达产物能被FMDV阳性血清识别,具有一定的反应原性。

融合表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因的DNA疫苗的构建及其免疫应答

用小鼠模型评价融合表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因的DNA疫苗和不同免疫策略的免疫应答。用PCR方法扩增牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因,分别克隆到pMD18-T载体并测序验证正确后将其克隆到质粒pcDNA的相应位点获得质粒pcDNA-VP22-P12A3C。然后将BALB/c小鼠分成7组进行免疫。结果表明,DNA疫苗pcDNA-VP22-P12A3C诱导的细胞免疫水平超过了灭活疫苗,DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫组体液免疫水平接近灭活疫苗组而细胞免疫水平远高于灭活疫苗组,为进一步研究VP22和P12A3C融合表达的基因工程疫苗奠定了基础。

鱼类DNA聚合酶δP12亚基cDNA克隆与序列分析

从斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)白细胞cDNA文库随机挑选克隆,测定表达序列标签(ESTs),利用BLASTX程序与GenBank中的序列进行比较,得到了1个cDNA,其编码蛋白质与人类DNA聚合酶δ(polδ)的P12亚基有47.7%的同源性,推测它为斜带石斑鱼polδ的12 kD小亚基的cDNA,所编码的蛋白质命名为P12。该cDNA全长619 bp,含1个330 bp的开放阅读框,编码109个氨基酸残基的蛋白质。序列对比表明,斜带石斑鱼的氨基酸序列与人、大鼠、小鼠、拟南芥和裂殖酵母的polδ小亚基有同源性,同时与斑马鱼EST CK680540的编码序列有66.6%的同源性。用RT-PCR检测该基因在石斑鱼各组织的表达情况,发现在腮、肝、脾、全血、胃和后肾有表达,而在肠、心脏、脑和头肾未检测到。

口腔鳞癌中p12蛋白的表达

目的:探讨p12蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其与口腔鳞癌发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,对40例口腔鳞癌组织,4例重度异常增生,8例口腔粘膜溃疡,6例口腔正常粘膜组织中p12蛋白的表达情况进行检测。结果:口腔鳞癌及重度异常增生组织中p12蛋白的表达明显低于炎性病变及正常粘膜组织。结论:p12蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的表达常为缺失,说明其作为一种候选抑癌基因在口腔鳞癌的发生中可能起一定作用,且不存在组织部位特异性。

P12钢厚壁高压管焊接接头的组织和性能

采用光学显微境、扫描电镜、显微硬度仪等试验手段对P12钢厚壁高压管焊接接头各区的显微组织及力学性能进行了研究。试验结果表明:采用钨极氩弧焊打底、焊条电弧焊填充、埋弧焊盖面的焊接工艺,可以获得良好的焊接接头;接头抗拉强度与母材的相当,弯曲性能良好,并具有很高的冲击韧性;焊缝区组织为粒状贝氏体+铁素体,粗晶热影响区组织为粒状贝氏体+少量板条马氏体,热影响区的晶粒大小不一,组织不均匀;焊缝和热影响区的硬度均高于母材,但总体硬度分布相对平缓。

牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达

从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供前期基础。

SA335-P12大规格管坯分层原因分析

本文介绍了大规格管坯在穿孔过程中产生的分层原因,从低倍、金相组织及电镜扫描等方面进行了分析,并针对性进行了工艺改进,取得了较好效果。

miRNA-320对氧糖剥夺P12细胞的影响及机制

目的探讨miRNA-320对氧糖剥夺后P12细胞影响及机制.方法将P12细胞分为4组,正常对照组,模型组,miRNA-320拟似物组以及miRNA-320抑制剂组,氧糖剥夺4 h后,P12细胞恢复到正常氧糖环境中,24 h后收集细胞.采用MTT测定细胞增殖存活率,TUNEL检测细胞凋亡qRT-PCR检测miRNA-320、IGF-1 mRNA水平,WB测定IGF-1蛋白表达水平.结果与对照组比较,模型组细胞增殖力减弱、细胞凋亡增加(P<0.01)、miRNA-320表达上调(P<0.01),IGF-1 mRNA及IGF-1蛋白表达下降(P<0.01).与模型组比较,miRNA-320拟似物组细胞增殖显著下降、细胞凋亡增加、miRNA-320表达上调、IGF-1 mRNA及IGF-1蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),而抑制剂组与之相反.结论miRNA-320通过作用于IGF-1发挥其促凋亡、抗增殖作用.

高温蠕变下P12管道断裂力学参数变化的数值模拟研究

金属材料在高温、低应力环境下长时间服役时容易发生蠕变断裂,具有极大的危害性。某石化企业P12蒸汽管道在远低于设计寿命的情况下发生了蠕变断裂失效。为研究该P12蒸汽管道在高温蠕变情况下其裂纹尖端应力强度因子的变化情况,采用ANSYS有限元软件建立该P12蒸汽管道的有限元计算模型并得到了其裂纹尖端应力强度因子的分布情况。研究结果表明,随着蠕变情况加剧,该P12蒸汽管道裂纹发生断裂破坏的风险不断升高。

PPARγ2基因P12A多态性与上海地区汉族人群2型糖尿病肾病

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因Pro12Ala(P12A)多态性与上海地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)肾病的相关性。方法上海地区汉族人群中无血缘关系的2型糖尿病患者259例,根据24 h尿白蛋白排泄率(AER)分为糖尿病无肾病组(DN-0组,n=94)和糖尿病肾病组(DN组,n=165)。DN组进一步分为微量蛋白尿肾病组(DN-1组,n=95)和显性蛋白尿肾病组(DN-2组,n=70)。应用PCR直接测序法,检测各组PPARγ2基因外显子B的P12A多态性基因型,比较组间基因型、等位基因频率及临床变量间的差异。结果检测到P12P12和P12A12二种基因型,未检测到A12A12。T2DM各亚组PPARγ2基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。与DN-0组相比,DN-1组和DN-2组P12A12基因型及A12等位基因频率均呈下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。DN组P12A12基因型及A12等位基因频率均显著低于DN-0组,其中基因型为9.1%vs18.1%(P=0.034,OR=0.453),等位基因为4.5%vs9.0%(P=0.041,OR=0.479)。结论研究结果提示PPARγ2基因P12A多态性与上海地区汉族人群T2DM肾病发病相关,A12等位基因可能有防止T2DM肾病进展的作用。

46,XY,inv,ins(9)(p12;q12)染色体异常1例

病例报告 患儿，男，10天，住院号35267，因咳嗽2天于1992年5月7日入院．患儿于入院前二天起有咳嗽、流涕，呈阵咳，无发热，于入院当天食欲明显减退，口吐白沫，有呛奶，无呕吐，稍气急，二便尚可，无抽痉，无紫绀来院就诊被收住．

表达非洲猪瘟病毒CD2v与P12蛋白的重组伪狂犬病毒的构建

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)与伪狂犬病(pseudorabies,PR)分别由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)与伪狂犬病毒感染(Pseudorabies virus,PRV)引起的猪(或部分猪)高致死、传染性疾病。目前非洲猪瘟无商业化疫苗,两种疾病均给养猪业造成了巨大的经济损失。本研究以PRV-Fa经典毒株为载体通过CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/Cas9)基因编辑技术将ASFV(Pig/HLJ/18)CD2v(EP402R)与p12(O61R)基因分别插入PRV-Fa株TK(UL23)及gI(US7)基因位点中,成功构建TK及gI缺失且重组表达ASFV CD2v与P12的重组弱毒株PRV-∆gI(P12)-∆TK(CD2v)。通过基因测序、蛋白质免疫印迹(Western blot)与免疫荧光表明重组毒株遗传性状稳定且CD2v与P12在Vero细胞中稳定表达。通过一步生长曲线、噬斑生长测定、小鼠毒力测试及小鼠病理学评估表明与野生型毒株PRV-Fa相比重组毒株毒力明显减弱,对小鼠不具致死能力,该重组毒株为研究预防PR及ASF的新型疫苗提供了新的选择。

GST-P12融合蛋白的抗体制备、鉴定及免疫组化分析

目的:为了进一步研究p12DOC-1基因及其蛋白在口腔癌发生中的作用与调控机制,将已表达纯化好的GST-p12融合蛋白进行多克隆抗体的制备及鉴定。方法:将构建好的融合表达载体pGEX-4T-1-DOC-1转化BL21(DE3)型大肠杆菌,用IPTG诱导表达,得到GST-p12融合蛋白,经亲和层析柱纯化后电泳,再割胶研磨作为抗原直接免疫家兔,经Western blot及ELISA检测抗体效价及特异性并做免疫组化分析。结果:得到较高纯度的GST-p12融合蛋白,获得了兔来源的抗p12DOC-1血清,经蛋白免疫印迹杂交反应及免疫组化分析证实所得的抗体具有较高的特异性和效价。结论:成功制备了兔抗人的p12DOC-1抗血清,为进一步研究p12DOC-1在口腔癌中发生缺失的机理打下基础。

牛病毒性腹泻病毒长春分离株P125基因的克隆与序列测定

以MDBK细胞培养致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)NCD毒株 ,采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,并根据BVDVNADL参考株序列设计合成的 1对引物 (W 1与W 2 ) ,进行反转录PCR (RT PCR) ,扩增出P12 5基因区约40 0bp的片段。经 pGEM T载体连接后克隆、测序 ,并与已发表的NADL、Osloss、SD 1、184、D、H、Yak等BVDV毒株序列进行比较。结果表明 :NCD株P12 5基因区无插入或缺失变异 ,但存在着核苷酸的替换 ;经聚类分析初步认为NCD株属于Ⅰa型。NCD株与长春 184、H株核苷酸序列差异较大 ,而亲缘关系较近 。

P12-LOX和uPA在人乳腺癌中的表达及其相关性

目的:探讨血小板型12脂氧合酶(P12-LOX)和尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)在人乳腺癌中的表达及与乳腺癌侵袭、转移的关系。方法:应用免疫组化方法检测24例三阴性乳腺癌、58例非三阴性乳腺癌和20例乳腺良性疾病组织标本中P12-LOX和u PA的表达情况,并分析其相关性及与临床病理特征进行比较。运用RT-PCR的方法检测三种不同侵袭能力乳腺癌细胞株中P12-LOX和u PA的mRNA表达情况并分析其与乳腺癌侵袭转移的关系。结果:u PA和P12-LOX蛋白在三种乳腺癌组织中的阳性表达率皆呈现出随着肿瘤恶性程度增高而逐渐增高的趋势,统计结果显示具有显著统计学意义(P<0.01);在乳腺癌组织中u PA、P12-LOX蛋白表达之间存在显著正相关(r=0.512,P<0.01)。u PA、P12-LOX表达与临床分期、淋巴结转移显著相关(P<0.01)。与患者的年龄、肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。在MDA-MB-231细胞系、MCF-7细胞系、HBL-100细胞系中P12-LOX和u PA的mRNA的表达随细胞侵袭能力的增强表达增高,各组间有显著统计学差异(P<0.01)。结论:乳腺癌组织中存在u PA和P12-LOX的高表达,且与乳腺癌的侵袭转移相关,提示两者可作为乳腺癌预后不良的指标之一。

双分子荧光互补载体pBiFC-VN173-p12和pBiFC-VC173-Nbp的构建及鉴定

目的:应用双分子荧光互补技术,构建和鉴定真核表达载体pBiFC-VN173-p12,pBiFC-VC173-Nbp,为进一步研究p12CDK2-AP1蛋白和Nbp蛋白在活细胞内的相互作用奠定实验基础。方法:以原核载体pGEX-4T-1-p12,pGEX-4T-1-Nbp为模板扩增出p12CDK2-AP1蛋白和Nbp蛋白的目的基因序列,分别定向克隆到Venus双分子荧光互补载体pBiFC-VN173和pBiFC-VC173上,重新构建成真核表达载体pBiFC-VN173-p12和pBiFC-VC173-Nbp,双酶切及测序鉴定。结果:重新构建的真核表达载体pBiFC-VN173-p12和pBiFC-VC173-Nbp经双酶切及测序结果均正确。结论:成功构建了真核表达载体pBiFC-VN173-p12和pBiFC-VC173-Nbp,为进一步观察p12CDK2-AP1蛋白和Nbp蛋白在活细胞内的相互作用提供了实验基础。

伴有t(4;16)(q11;p12)非朗格汉细胞组织细胞增多症1例报道并文献复习

Erdheim-Chester病(Erdheim-Chester disease,ECD)是一种罕见的、累及多系统的非朗格汉细胞组织细胞增多症[1]。此病最初在1930年由Jakob Erd-heim和William Chester两位科学家发现报道,并因此命名。其主要特征是CD68+和CD1a-的组织细胞在多个靶器官迁移和浸润,造成组织结构的破坏和纤维化,因此导致器官功能受损,并且经常伴有骨痛[2]。ECD的病灶可累及全身,除了骨骼系统外.