神经生长因子受体P75和P140trkA mRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的 : 研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)受体P75和P14 0trkA在寻常型银屑病发病机制中的作用。方法 : 应用原位杂交技术检测了 33例寻常型银屑病患者 (18例为进展期 ,15例为静止期 )和 10例正常人皮肤组织中两受体 (P75和P14 0trkA)mRNA的表达情况。结果 : 与正常人皮肤比较 ,寻常型银屑病皮损及非皮损中P75和P14 0trkA受体mRNA的表达明显上调 ,且皮损中的表达明显高于非皮损区 (P <0 .0 1) ;进展期患者皮损与非皮损中P75和P14 0trkA受体mRNA的表达分别高于静止期患者的皮损与非皮损区 (P <0 .0 1)。结论

活化T细胞抗原p140在输血患者T淋巴细胞的表达

目的观察1种新的活化T细胞膜分子p140在输血患者T淋巴细胞的表达。方法选择7名输血患者(均为意外创伤)为实验组,10名未输血患者(泌尿结石或精索静脉曲张术前患者)为正常对照组,用免疫荧光染色和流式细胞术观察p140在两组患者淋巴细胞中的表达。结果p140在输血患者淋巴细胞亚群及活化T细胞有表达,第1周时最高,至第4周时已无表达;而正常对照组患者外周血单个核细胞上始终无p140表达。结论p140在输血患者T淋巴细胞的表达表明:输血患者T细胞有活化,此种活化为外来抗原特异诱导的。

p140Cap在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨p140Cap在乳腺癌的表达及其临床意义。方法收集本院2012年6月～2017年6月的246例原发性乳腺癌患者组织作为病例组,选取60例乳腺癌旁组织作为对照组。应用免疫组化技术检测p140Cap基因在乳腺癌及乳腺癌旁组织中的表达水平,利用统计学方法分析其在乳腺癌及乳腺正常组织中的表达水平、在不同乳腺癌分子分型及不同临床参数中的表达水平和相关性。结果 p140Cap在乳腺癌组织中的表达明显降低或缺失,与在癌旁组织中的表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。p140Cap的表达同乳腺癌患者的肿瘤直径、年龄、腋窝淋巴结转移、组织学分级、雌激素受体状态、孕激素受体状态、人表皮生长因子受体状态有关,而与患者的肿瘤分期无关。结论 p140Cap在乳腺癌组织中低表达,并且与乳腺癌的临床病理分型存在相关性,影响乳腺癌的不良预后。

P140-X30井钻井施工实践与认识

P140-X30井是部署在P油田的一口评价井。本文在对井身结构和井眼轨迹剖面设计情况简单介绍的基础上,对钻井施工中的井眼轨迹控制技术和安全钻井技术进行了详细的叙述。该井的钻探成功,为施工同类型大斜度、大位移定向井积累了宝贵的经验。

LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。

补肾调肝周期疗法及组方含药血清对Ishikawa细胞miR⁃140⁃5p/VEGF信号通路的影响

目的研究补肾调肝周期疗法及组方对Ishikawa细胞增殖、分泌及miR-140-5p/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法制备各组含药血清及空白血清,运用慢病毒转染构建miR-140-5P稳定过表达的Ishikawa细胞株,将细胞分为阴性对照组(转染miR-140-5p NC+空白血清)、过表达组(转染miR-140-5p siRNA+空白血清)、阳性对照组(转染miR-140-5p siRNA+阿司匹林含药血清)、逍遥散组(转染miR-140-5p siRNA+逍遥散含药血清)、三子养膜汤组(转染miR-140-5p siRNA+三子养膜汤含药血清)、补肾调肝周期疗法组(转染miR-140-5p siRNA+周期疗法含药血清)。倒置荧光显微镜观察转染效率;ELISA法检测细胞培养液上清E_(2)、P水平;流式细胞仪测定细胞周期分布;CCK-8法检测细胞增殖效率;Western blot法检测细胞VEGF、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)蛋白表达;RT-qPCR法检测细胞miR-140-5p、VEGF、ER、PR mRNA表达。结果成功构建miR-140-5p稳定过表达的Ishikawa细胞系。miR-140-5p过表达会抑制Ishikawa细胞E_(2)、P的分泌(P<0.01),使Ishikawa细胞发生G 2/M期阻滞(P<0.01),抑制Ishikawa细胞的增殖(P<0.01)和VEGF、ER、PR mRNA表达(P<0.01);而各组含药血清均能降低Ishikawa细胞miR-140-5p表达(P<0.01),促进E_(2)、P的分泌(P<0.01),使细胞周期基本恢复正常(P<0.05,P<0.01),促进细胞增殖(P<0.01),升高VEGF mRNA表达(P<0.01);阿司匹林、逍遥散、三子养膜汤含药血清均能升高ER、PR mRNA表达(P<0.05,P<0.01);补肾调肝周期疗法含药血清能升高ER mRNA表达(P<0.01)。结论miR-140-5p过表达会损伤子宫内膜容受性,可能是子宫内膜容受性的关键调控因子,补肾调肝周期疗法及组方可能通过介导miR-140-5p/VEGF,靶向上调VEGF、ER、PR基因的表达,从而促进子宫内膜细胞增殖、改善子宫内膜细胞内分泌及局部血运以提升子宫内膜容受性。

miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死患者诊疗中的价值研究

目的 探讨miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死(ACI)患者诊疗中的应用价值。方法 选取2020年1月至2022年12月南通市第三人民医院全科医学科收治的ACI患者100例作为研究对象,定义为ACI组,根据ACI患者3个月改良Rankin评分量表(mRS评分)将其分为预后良好组(mRS评分≤2分)68例与预后不良组(mRS>2分)32例,另选同期于南通市第三人民医院全科医学科体检的健康者100例作为对照组。记录各组miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平并进行比较,采用Pearson相关分析探讨两变量的相关性,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测在ACI诊断中的效能,采用多因素Logistic回归分析探讨ACI预后的危险因素。结果 ACI组平均年龄、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-140-3p与miR-128-3p及miR-27-3p表达水平均明显高于对照组(均P<0.05)。miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的曲线下面积(AUC值)为0.965,敏感度为99.00%,特异度为98.00%,表明miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的效能更高。预后不良组平均年龄、入院时NIHSS评分、梗死体积、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平及3个月mRS评分均明显高于预后良好组(均P<0.05)。经Pearson相关分析表明ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平均分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关(均P<0.05)。经多因素Logistic回归分析表明年龄(OR:1.546;95%CI:1.124~1.969)、入院时NIHSS评分(OR:1.721;95%CI:1.229~2.308)、梗死体积(OR:1.853;95%CI:1.436~2.786)、吸烟史(OR:1.517;95%CI:1.168~1.825)、miR-27-3p (OR:2.481;95%CI:1.452~3.201)、miR-128-3p (OR:1.692;95%CI:1.288-2.431)及miR-140-3p (OR:2.032;95%CI:1.141~1.976)均为ACI患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论 ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平均明显升高,通过三指标联合检测可提高对ACI的诊断效能,而预后不良ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平则升高更为明显,并分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关,且miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p均为ACI患者预后的独立危险因素,应予以重点关注。

急性缺血性脑卒中患者血清微小RNA-140-3p、Krüpple样因子5表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性

目的探索急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)、Krüpple样因子5(KLF5)表达水平与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度的相关性。方法选择2022年10月—2024年1月本院收治的285例AIS患者作为研究对象,依据超声结果将患者分为斑块易损组(196例)、斑块稳定组(53例)以及无斑块组(36例);将患者依据斑块狭窄程度分为狭窄重度组(42例)、狭窄中度组(57例)、狭窄轻度组(150例)以及无狭窄组(36例)。收集患者的一般资料,采用实时荧光定量PCR对血清miR-140-3p、KLF5表达水平进行检测;多因素Logistic回归分析AIS患者颈动脉斑块不稳定性的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-3p、KLF5水平检测对AIS患者颈动脉斑块不稳定的诊断价值;分析不同狭窄程度血清miR-140-3p、KLF5水平;Pearson法和Spearman法相关性分析血清miR-140-3p、KLF5水平的相关性及二者与AIS患者颈动脉斑块稳定及狭窄程度的相关性。结果斑块易损组患者高血压人数、糖尿病人数、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、膀抑素C(Cys-C)及KLF5水平高于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),血小板(PLT)及miR-140-3p水平低于斑块稳定组及无斑块组(P<0.05),斑块稳定组LDL-C、FIB、D-D、Cys-C及KLF5水平高于无斑块组(P<0.05),PLT及miR-140-3p水平低于无斑块组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示PLT、D-D、FIB、Cys-C、miR-140-3p、KLF5是AIS患者斑块不稳定性的影响因素(P<0.05);ROC分析显示,miR-140-3p、KLF5联合诊断AIS患者颈动脉斑块不稳定的ROC曲线下面积(AUC)显著大于miR-140-3p单独诊断的AUC(Z=4.617,P<0.001),KLF5单独诊断的AUC(Z=3.473,P=0.001);随着患者狭窄程度的增加,患者血清miR-140-3p水平降低(F=341.819,P<0.001),血清KLF5水平升高(F=152.186,P<0.001);Pearson法相关性分析显示,血清miR-140-3p水平与血清KLF5水平及斑块稳定性、狭窄程度呈负相关(r=-0.536,-0.529,-0.601,P<0.001),血清KLF5水平与斑块稳定性及狭窄程度呈正相关(r=0.511,0.634,P<0.001)。结论AIS患者血清miR-140-3p水平降低,血清KLF5水平升高,其水平变化与颈动脉斑块稳定性及狭窄程度密切相关。

五味消毒饮加减对子宫内膜炎急性期炎症因子及miR-140-5p、TLR4表达的影响

目的评价五味消毒饮加减治疗子宫内膜炎急性发作期的临床疗效及对炎症因子和miR-140-5p、TLR4表达的影响。方法将86例患者随机分为对照组与观察组各43例。对照组口服盐酸多西环素片;观察组在对照组治疗的基础上给予五味消毒饮加减内服治疗。记录腹痛消失时间、白带恢复正常时间;进行治疗前后热毒瘀结证评分;检测治疗前后相关炎症介质水平;检测治疗前后miR-140-5p、Toll样受体4(TLR4)水平;进行治疗前后彩色多普勒超声检测,记录血流指数(FI)、阻力指数(RI)和搏动指数(PI);比较临床疗效。结果治疗后,观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);观察组患者主要症状病程短于对照组(P<0.05);观察组主要症状评分和总分明显低于对照组(P<0.05);观察组各炎症介质水平均明显低于对照组(P<0.05);观察组TLR4水平低于对照组,miR-140-5p水平高于对照组(P<0.05);观察组的RI、PI低于对照组,FI高于对照组(P<0.05)。结论五味消毒饮加减治疗子宫内膜炎急性发作期患者,可调节miR-140-5p和TLR4表达,抑制促炎因子释放,减轻炎性损伤,改善子宫内膜血液循环,缩短病程,改善临床症状,提高临床治疗效果,值得临床使用。

miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄性腺中的差异表达和调控功能的研究

miR-140-3p是在不同物种性腺组织中广泛表达的一种miRNA。本研究利用qRT-PCR方法检测miR-140-3p在大鳞副泥鳅性腺中的雌雄表达差异并预测其生物学功能。结果显示:miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄鱼的性腺组织中均有表达,且精巢中的表达量显著高于卵巢(P<0.01);KEGG pathway分析表明,靶基因CPEB4和GDF9参与卵母细胞成熟分化过程,富集在与性腺发育、繁殖功能相关的孕激素介导卵母细胞成熟通路、卵母细胞减数分裂通路、卵巢类固醇生成通路。荧光定量结果显示CPEB4和GDF9在卵巢中表达量显著高于精巢(P<0.01),且表达量与miR-140-3p的表达呈显著负相关,说明miR-140-3p和CPEB4、GDF9具有潜在的靶标关系。这为进一步探索miR-140-3p在鱼类性腺发育和繁殖过程中的作用奠定了基础。

miR-140-3p通过靶向MAPK1影响宫颈癌细胞增殖及顺铂敏感性的研究

目的研究miR-140-3p在宫颈癌细胞增殖和对顺铂敏感性中的作用及其机制。方法采用原位杂交技术检测宫颈癌及其癌旁组织中miR-140-3p的表达水平,并分析与临床病理参数的关系。通过CCK8实验、细胞克隆形成和细胞划痕实验,比较各组宫颈癌细胞增殖和迁移的差异。在不同浓度顺铂处理下,检测各组细胞的增殖、克隆形成及死亡率变化。利用miRNA数据库预测目标基因,并通过荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot检测目标基因mRNA和蛋白水平,以及凋亡相关蛋白表达,以验证miR-140-3p的潜在靶点。结果宫颈癌组织中miR-140-3p表达显著低于癌旁组织(P<0.05)。上调miR-140-3p可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、克隆形成及迁移。CCK8、细胞克隆形成和划痕实验结果表明,不同浓度顺铂处理后,miR-140-3p过表达组MAPK1的表达下降,宫颈癌细胞增殖及克隆形成下降,而细胞凋亡增加(P<0.05)。结论miR-140-3p可能通过调控MAPK1基因抑制宫颈癌细胞增殖,并增强对顺铂的敏感性。

miRNA-140-5P在甲状腺癌细胞TPC-1中的表达及对其增殖迁移侵袭能力的影响

目的探讨miR-140-5p在甲状腺癌发展中的作用及其分子生物调节机制,miRNA-140-5P对甲状腺癌细胞TPC-1侵袭、迁移的调控作用机制。方法收集2021年1月—2022年1月南充市中心医院手术切除的甲状腺恶性肿瘤36例和良性肿瘤32例的肿瘤标本。qt-PCR检测miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤和良性肿瘤组织中mRNA的表达水平,外购甲状腺癌细胞TPC-1,WB实验检测miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤和良性肿瘤细胞中的蛋白表达水平,评估miRNA-140-5P在两种组织中的表达差异;实验引入miRNA-140-5Pmimics转染细胞,Transwell小室实验、CCK-8对甲状腺肿瘤细胞迁移、侵袭、增殖能力进行检测;实验对甲状腺癌细胞TPC-1中NLRP3炎性小体进行检测,并对NLRP3表达进行干预,评估甲状腺肿瘤细胞中miR-140-5P与NLRP3的调控关系。结果miRNA-140-5P在甲状腺恶性肿瘤组织和细胞中呈低表达(P<0.05)。而miRNA-140-5P mimics可增强甲状腺癌细胞TPC-1的增殖、迁移和侵袭能力,miRNA-140-5P可减弱甲状腺癌细胞中炎性介质NLRP3的表达。结论miRNA-140-5P可降低甲状腺癌细胞TPC-1的增殖、迁移和侵袭能力;并在甲状腺恶性肿瘤细胞中与NLRP3炎性小体存在交互调控,其可能降低了对NLRP3的抑制作用,从而激发了NLRP3参与的活化调控而诱发了甲状腺癌的发生发展。

MiR-140-3p调节PI3K/Akt通路减轻缺氧复氧心肌细胞损伤的实验研究

目的:探讨miR-140-3p靶向调节PI3K/Akt通路对缺氧复氧心肌细胞再灌注损伤的影响。方法:对大鼠来源的H9C2心肌细胞进行缺氧/复氧以诱导细胞损伤,使用miR-140-3p mimics及其对照(NC)转染H9C2心肌细胞,再使用10μmol/L LY294002处理过表达miR-140-3p的H9C2细胞。将心肌细胞分为6组,分别为对照组(CON组)、H/R组(Model组)、Model+NC组、Model+miR-140-3p mimics组、Model+miR-140-3p mimics+LY294002组、Model+LY294002组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组miR-140-3p相对表达量,CCK-8法检测各组心肌细胞活力,流式细胞仪检测各组心肌细胞凋亡率,Western blot检测各组磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、Bax、Bcl-2、Cleaved-caspases-3表达量。结果:与CON组比较,Model组miR-140-3p表达量、细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05),Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率明显提高(P<0.05),与Model组比较,miR-140-3p过表达可上调miR-140-3p表达量、细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白,下调Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率,LY294002可抑制miR-140-3p表达,下调细胞活力以及Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白,上调Bax、Cleaved-caspases-3蛋白表达和凋亡率。结论:MiR-140-3p可通过调节PI3K/Akt通路减轻缺氧复氧心肌细胞自噬和凋亡,进而减轻心肌损伤。

苓桂术甘汤调控miR-140-5p/TLR4/NF-κB信号通路对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障及免疫平衡的影响

目的:探讨苓桂术甘汤调控miR-140-5p/Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)/核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜屏障及免疫平衡的影响。方法:取SD大鼠用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid solution,TNBS)诱导建立UC模型,随机分为5组:模型组、苓桂术甘汤低剂量组、苓桂术甘汤高剂量组、NC-miR-140-5p(miR-140-5p阴性对照)组、苓桂术甘汤高剂量组+miR-140-5p antagomir(miR-140-5p抑制剂)组,每组10只,另取10只大鼠作对照组,分组干预后检测大鼠结肠黏膜损伤指数(colonic mucosal injury index,CMDI)评分与结肠长度;透射电镜观察各组大鼠结肠黏膜屏障超微结构;流式细胞实验检测各组大鼠外周血Treg、Th17细胞比例及Treg/Th17比值;ELISA检测大鼠血清免疫炎症相关因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-17、IL-10、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平;采用实时荧光PCR及免疫印迹法检测大鼠结肠黏膜组织miR-140-5p/TLR4/NF-κB信号相关因子表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠结肠黏膜屏障超微结构损伤严重,CMDI、Th17细胞比例、血清IL-6与IL-17水平、结肠黏膜组织TLR4 mRNA、蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65显著升高(P<0.05),结肠长度、Treg细胞比例、Treg/Th17比值、血清IL-10与TGF-β1水平、结肠黏膜组织claudin-1、claudin-4蛋白表达与miR-140-5p表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,苓桂术甘汤低剂量组、苓桂术甘汤高剂量组大鼠结肠黏膜屏障超微结构损伤均减轻,CMDI、Th17细胞比例、血清IL-6与IL-17水平、结肠黏膜组织TLR4 mRNA、蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65均降低(P<0.05),结肠长度、Treg细胞比例、Treg/Th17比值、血清IL-10与TGF-β1水平、结肠黏膜组织claudin-1、claudin-4蛋白表达与miR-140-5p表达均升高(P<0.05);NC-miR-140-5p组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05);高剂量苓桂术甘汤作用更强。下调miR-140-5p可减弱高剂量苓桂术甘汤对UC模型大鼠各指标的作用。结论:苓桂术甘汤可通过上调miR-140-5p而抑制TLR4/NF-κB信号激活,进而促使Treg/Th17免疫平衡向Treg偏移,抑制免疫炎症,减轻UC大鼠肠黏膜屏障损伤。

高分辨率磁共振成像联合血清miR-140-3p、miR-223-3p在颈动脉粥样硬化斑块易损性评价中的价值研究

目的探究高分辨率磁共振成像(高分辨率MR)联合血清微小核糖核酸-140-3p(miR-140-3p)、微小核糖核酸-223-3p(miR-223-3p)在颈动脉粥样硬化斑块易损性评价中的价值。方法选取2022年1月—2023年12月连云港市第一人民医院神经内科收治的颈动脉粥样硬化患者86例为研究对象,根据病理学确诊斑块状况将患者分为斑块易损组42例和非斑块易损组44例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-140-3p、miR-223-3p表达;Kappa检验分析高分辨率MR检测与金标准诊断颈动脉粥样硬化斑块易损的一致性;多因素Logistic回归分析颈动脉粥样硬化患者斑块易损的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p对颈动脉粥样硬化患者斑块易损性的诊断价值。结果斑块易损组血清miR-140-3p表达低于非斑块易损组,血清miR-223-3p表达高于非斑块易损组(t/P=6.033/<0.001,6.367/<0.001);2组动脉重构类型及斑块分布位置比较,差异无统计学意义(P>0.05);Kappa检验显示,高分辨率MR检测与金标准诊断颈动脉粥样硬化斑块易损的一致性尚可(Kappa=0.603,P<0.001);多因素Logistic回归分析显示,C反应蛋白(CRP)、miR-223-3p升高为颈动脉粥样硬化患者斑块易损的独立危险因素[OR(95%CI)=1.685(1.051~2.702)、3.054(2.008~4.645)],miR-140-3p升高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.752(0.616~0.918)];高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p及三者联合诊断颈动脉粥样硬化患者斑块易损性的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.860、0.884、0.981,三者联合的AUC大于高分辨率MR、miR-140-3p、miR-223-3p单独诊断的AUC(Z/P=4.537/<0.001、2.980/0.003、2.869/0.004)。结论高分辨率MR联合血清miR-140-3p、miR-223-3p检测对颈动脉粥样硬化斑块易损性有较高的诊断价值。

鼻咽癌组织中LncRNA CTBP1-AS2和miR-140-5p水平表达与放疗疗效及预后的关系研究

目的探讨鼻咽癌癌组织中长链非编码RNA羧基末端结合蛋白1反义RNA2(long non-coding RNA C-terminal binding protein 1 antisense RNA2,LncRNA CTBP1-AS2)、微小核糖核酸(microRNA,miR)-140-5p水平表达与放疗疗效及预后的关系。方法选取2018年3月~2020年3月于南通市肿瘤医院确诊的222例鼻咽癌患者为鼻咽癌组,记录患者临床资料,评估放疗疗效及预后,并分为生存组(n=194)和死亡组(n=28);另选取同期219例鼻咽炎患者为对照组。采用Pearson相关分析检验鼻咽癌患者中LncRNA CTBP1-AS2与miR-140-5p表达水平的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析鼻咽癌组织中LncRNA CTBP1-AS2,miR-140-5p表达水平与患者预后的关系;采用COX比例风险回归模型对鼻咽癌患者预后进行多因素分析。结果鼻咽癌组患者组织中LncRNA CTBP1-AS2表达水平(2.25±0.46)高于对照组(1.02±0.22),miR-140-5p表达水平(0.67±0.19)低于对照组(1.01±0.23),差异具有统计学意义(t=35.742,16.934,均P<0.001)。鼻咽癌患者中LncRNA CTBP1-AS2与miR-140-5p表达水平呈负相关(r=-0.624,P<0.001)。LncRNA CTBP1-AS2高表达的鼻咽癌患者放疗后总有效率(74.11%)和三年生存率(77.68%)低于低表达患者(93.64%,97.27%),差异具有统计学意义(χ^(2)=15.578,19.331,均P<0.001);miR-140-5p高表达患者放疗后总有效率(93.58%)和三年生存率(96.33%)显著高于低表达患者(74.34%,78.76%),差异具有统计学意义(χ^(2)=15.119,15.538,均P<0.001)。死亡组磁共振酰胺质子转移(amide proton transfer,APT)值(2.10±0.26)、放疗无效(85.71%)、LncRNA CTBP1-AS2高表达(89.29%)及miR-140-5p低表达(85.71%)患者比例高于生存组(1.82±0.31,6.19%,44.85%,45.88%),差异具有统计学意义(t/χ^(2)=4.551,108.127,19.331,15.538,均P<0.001)。LncRNA CTBP1-AS2表达水平为鼻咽癌患者三年内死亡的危险因素(HR=2.762,95%CI:1.510~5.051,P=0.001),miR-140-5p表达水平为鼻咽癌患者三年内死亡的保护因素(HR=0.817,95%CI:0.718~0.930,P=0.002)。结论鼻咽癌组织中LncRNA CTBP1-AS2高表达,miR-140-5p低表达,二者与放疗疗效及预后关系密切。

LncRNA PSMA3-AS1调节miR-140-3p/DDX5轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(PSMA3-AS1)调节miR-140-3p/DEAD box p68 RNA解旋酶(DDX5)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测40例肺癌组织和细胞系中PSMA3-AS1、miR-140-3p、DDX5表达。将A549细胞分为:control组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor-NC组、si-PSMA3-AS1+miR-140-3p inhibitor组,qRT-PCR检测转染效率;MTT法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及DDX5蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与PSMA3-AS1和DDX5的关系;构建肺癌裸鼠模型,分为si-NC、si-PSMA3-AS1组,测量肿瘤质量与体积,qRT-PCR检测移植瘤组织中miR-140-3p表达,免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、DDX5蛋白表达。结果在肺癌组织/细胞系中,PSMA3-AS1 mRNA、DDX5蛋白表达升高,miR-140-3p mRNA表达水平降低(P<0.05);敲低PSMA3-AS1表达可显著抑制A549细胞增殖、迁移与侵袭,降低PCNA、MMP-2、vimentin、DDX蛋白表达,促进miR-140-3p、Bax、E-cadherin表达及细胞凋亡(P<0.05);下调miR-140-3p,可减弱敲低PSMA3-AS1对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-140-3p与PSMA3-AS1、miR-140-3p与DDX5存在靶向调控关系(P<0.05);体内实验显示,抑制PSMA3-AS1表达可显著降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、DDX5表达水平,升高miR-140-3p表达(P<0.05)。结论敲低PSMA3-AS可能通过调节miR-140-3p/DDX5轴,抑制肺癌细胞的增殖和EMT,促进细胞凋亡。

类风湿关节炎患者血清miR-140-5p、VEGF水平与动脉粥样硬化的相关性分析

目的分析类风湿关节炎患者血清微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、血管内皮生长因子(VEGF)水平与动脉粥样硬化的相关性。方法选取2022年1月至2023年9月该院收治的类风湿关节炎患者80例为研究组,根据颈动脉超声是否存在中层厚度增厚将研究组分为合并组(46例)与未合并组(34例)。另选取同期在该院体检中心体检的健康者40例为对照组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测受试者血清miR-140-5p、VEGF水平,超声检查合并组与未合并组的颈动脉内膜中层厚度。Pearson和Spearman分析类风湿关节炎患者临床资料之间的相关性,并以Logistic回归模型分析影响类风湿关节炎患者并发动脉粥样硬化的因素。结果3组受试者的类风湿因子、红细胞沉降率(ESR)、颈动脉内膜中层厚度、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、miR-140-5p、VEGF差异有统计学意义(P<0.05),未合并组和合并组的类风湿因子、ESR、颈动脉内膜中层厚度、FPG、hs-CRP、VEGF高于对照组,FINS、HOMA-IR、miR-140-5p低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。合并组的类风湿因子、颈动脉内膜中层厚度、FPG、hs-CRP、VEGF高于未合并组,差异有统计学意义(P<0.05),FINS、miR-140-5p低于未合并组,差异有统计学意义(P<0.05)。类风湿关节炎患者的类风湿因子、颈动脉内膜中层厚度、hs-CRP与miR-140-5p呈负相关(P<0.05),与VEGF呈正相关(P<0.05),miR-140-5p与VEGF呈负相关(P<0.05)。类风湿因子、颈动脉内膜中层厚度、hs-CRP、VEGF为影响类风湿关节炎患者并发动脉粥样硬化的危险因素,miR-140-5p是保护因素。结论类风湿关节炎患者血清miR-140-5p、VEGF与动脉粥样硬化的发生相关,miR-140-5p是并发动脉粥样硬化的保护因素,VEGF是危险因素。

重型颅脑损伤患者血清miR-129-5p、miR-140-5p水平及其与TLR4/NF-κB信号通路和预后的关系

目的观察重型颅脑损伤(TBI)患者血清微小核糖核酸-129-5p(miR-129-5p)、miR-140-5p水平变化,探讨两者与Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路及预后的关系。方法选取重型TBI患者118例作为sTBI组、轻中型TBI患者100例作为轻中型TBI组、健康体检者100例作为对照组,RT-qPCR法检测血清miR-129-5p、miR-140-5p及外周血单个核细胞TLR4、NF-κB。采用Pearson相关性分析重型TBI患者血清miR-129-5p、miR-140-5p与外周血单个核细胞TLR4、NF-κB的相关性;统计重型TBI患者术后28 d内的全因死亡例数,根据重型TBI患者术后28 d内生存情况将患者分为生存者及死亡者,比较不同预后结局重型TBI患者的临床资料;采用多因素Logistic回归分析重型TBI患者预后影响因素。结果血清miR-129-5p、miR-140-5p水平对照组>轻中型TBI组>重型TBI组(P均<0.05);Pearson相关性分析显示,重型TBI患者血清miR-129-5p与外周血单个核细胞TLR4、NF-κB呈负相关(r分别为-0.320、-0.312,P均<0.01),miR-140-5p与外周血单个核细胞TLR4、NF-κB呈负相关(r分别为-0.358、-0.361,P均<0.01)。118例重型TBI患者28 d内死亡42例、生存76例,28 d生存率为64.40%。死亡重型TBI患者入院时外科损伤严重度(ISS)评分、术中失血量、受伤后至手术时间、外周血单个核细胞TLR4、外周血单个核细胞NF-κB高于生存重型TBI患者,入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、血清miR-129-5p、血清miR-140-5p低于生存重型TBI患者(P均<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,入院时ISS评分高、受伤后至手术时间长、外周血单个核细胞TLR4表达高、外周血单个核细胞NF-κB表达高为重型TBI患者死亡的独立危险因素(P均<0.05),入院时GCS评分高、血清miR-129-5p水平高、血清miR-140-5p水平高为重型TBI患者死亡的独立保护因素(P均<0.05)。结论重型TBI患者血清miR-129-5p、miR-140-5p水平降低,血清miR-129-5p、miR-140-5p水平与TLR4/NF-κB信号通路相关分子存在相关性,且为重型TBI患者死亡的独立影响因素。

外周血sCD14、miR-140-3p及TBIL对冠心病患者冠脉斑块稳定性的评估价值

目的探究外周血可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)、微小RNA-140-3p(miR-140-3p)及总胆红素(TBIL)对冠心病患者冠脉斑块稳定性的评估价值。方法选取郸城县人民医院2021年8月至2023年8月收治的80例冠心病患者为研究对象,行血管内超声检查,对患者的斑块性质进行分类,并根据检查结果对患者进行分组:稳定组55例与不稳定组25例。收集并对比两组患者一般资料信息及血清指标水平,将有统计学意义的变量进行分析,探究影响冠心病患者冠脉斑块稳定性的因素。结果稳定组和不稳定组患者的年龄、性别、体质量指数(BMI)、糖尿病、高血压、尿素氮、尿肌酐以及血中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平比较差异无统计学意义(P>0.05);稳定组sCD14水平显著低于不稳定组,差异具有统计学意义(P<0.05),miR-140-3p、TBIL水平显著高于不稳定组,差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析显示,高水平sCD14、低水平miR-140-3p及低水平TBIL均为冠心病患者冠脉斑块不稳定性斑块形成的危险因素,差异均有统计学意义(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线分析表明,高水平sCD14、低水平miR-140-3p及低水平TBIL均对不稳定型斑块均具有一定诊断价值,其曲线下面积(AUC)分别为0.706、0.939、0.807,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论冠心病患者外周血sCD14、miR-140-3p及TBIL表达水平与冠脉不稳定型斑块的形成具有密切关系,对于斑块稳定性具有一定的评估价值。