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牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白p20的原核表达
1
作者
王婉怡
李娅婕
+1 位作者
王桂花
韩晓东
《动物医学进展》
北大核心
2024年第10期48-52,共5页
牛病毒性腹泻是由黄病毒科、瘟病毒属中的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染牛引起的一种传染病,是一种全球性牛传染病。为了在原核表达系统表达BVDV非结构蛋白p20,并分离纯化蛋白进行晶体学研究。首先对BVDV-1 p20蛋白基因进行密码子优化,合...
牛病毒性腹泻是由黄病毒科、瘟病毒属中的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染牛引起的一种传染病,是一种全球性牛传染病。为了在原核表达系统表达BVDV非结构蛋白p20,并分离纯化蛋白进行晶体学研究。首先对BVDV-1 p20蛋白基因进行密码子优化,合成后克隆到pET30表达载体上。测序鉴定成功的pET30-p20表达质粒转化大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),IPTG诱导获得的p20蛋白经过Ni柱、分子筛纯化。最终,经过多重缓冲溶液的筛选,p20蛋白可以稳定存在于含有5 mmol/Lβ-巯基乙醇、5%甘油、150 mmol/L氯化钠(pH8.0)的Tris-HCl缓冲液中。高纯度均一性的p20蛋白获得,为后续p20晶体学研究以及单克隆抗体的制备提供原核表达纯化方案。
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关键词
牛病毒性腹泻病毒
原核表达系统
分子筛
p20蛋白质
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职称材料
题名
牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白p20的原核表达
1
作者
王婉怡
李娅婕
王桂花
韩晓东
机构
内蒙古农业大学生命科学学院
出处
《动物医学进展》
北大核心
2024年第10期48-52,共5页
基金
内蒙古自然科学基金项目(2022SHZR1769)。
文摘
牛病毒性腹泻是由黄病毒科、瘟病毒属中的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染牛引起的一种传染病,是一种全球性牛传染病。为了在原核表达系统表达BVDV非结构蛋白p20,并分离纯化蛋白进行晶体学研究。首先对BVDV-1 p20蛋白基因进行密码子优化,合成后克隆到pET30表达载体上。测序鉴定成功的pET30-p20表达质粒转化大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),IPTG诱导获得的p20蛋白经过Ni柱、分子筛纯化。最终,经过多重缓冲溶液的筛选,p20蛋白可以稳定存在于含有5 mmol/Lβ-巯基乙醇、5%甘油、150 mmol/L氯化钠(pH8.0)的Tris-HCl缓冲液中。高纯度均一性的p20蛋白获得,为后续p20晶体学研究以及单克隆抗体的制备提供原核表达纯化方案。
关键词
牛病毒性腹泻病毒
原核表达系统
分子筛
p20蛋白质
Keywords
Bovine viral diarrhea virus
p
rokaryotic ex
p
ression system
molecular sieve
p
20
p
rotein
分类号
S852.653 [农业科学—基础兽医学]
S858.23 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白p20的原核表达
王婉怡
李娅婕
王桂花
韩晓东
《动物医学进展》
北大核心
2024
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