高抗硫保压井下取样器的研制及在P202-1井中的应用

针对国内目前井下取样器不抗硫化氢、所取样品不保压等问题,研制出新型高抗硫保压井下取样器,该种取样器选材选用钛合金和全氟醚胶圈,解决了抗硫化氢腐蚀问题;采用氮气室背压保压技术,确保在取样、转样、运输过程中的样品压力始终大于取样点压力,实现了全程保压,保证所取样品相态不发生变化。在普光气田P202-1井成功取得2支可代表地层真实流体特性的井下PVT气体样品。

外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977与狼疮性肾炎疾病活动性的关系及临床价值

目的:探讨外周血微小RNA-23b(miR-23b)、微小RNA-202-3p(miR-202-3p)、微小RNA-7977(miR-7977)在狼疮性肾炎(LN)疾病活动性中的应用价值。方法:选取我院2020年4月—2022年5月收治的104例LN患者为研究对象,根据入院时系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLE-DAI)将患者分为活动组(63例,SLE-DAI评分≥10分)和稳定组(41例,SLE-DAI评分<10分)。比较两组一般临床资料、入院时外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平,Logistic回归分析影响LN疾病活动性的因素,探讨联合检测对活动性LN的诊断价值。结果:活动组eGFR、SCr、ESR、补体C3、补体C4、miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平与稳定组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);入院时,外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平均与eGFR、补体C3、补体C4水平呈正相关,均与ESR、Scr、SLE-DAI评分呈负相关(P<0.05);Logistic回归分析显示,入院时eGFR≤76.93ml/(min·1.73m^(2))、SCr>96.01μmol/L、ESR>53.66mm/h、补体C3≤0.80g/L、补体C4≤0.24g/L、miR-23b≤0.49、miR-202-3p≤10.49、miR-7977≤6.10水平是活动性LN的危险因素(P<0.05);临床受试者工作曲线(ROC)结果显示,外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977水平联合诊断活动性LN的AUC、敏感度、特异度最佳。结论:临床联合检测外周血miR-23b、miR-202-3p、miR-7977对诊断LN疾病活动程度具有重要指导作用。

变应性鼻炎患者血清miR-124-3p和miR-202-5p的表达及临床意义

目的探讨血清miR-124-3p和miR-202-5p水平在变应性鼻炎(AR)患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年1~12月间荆州市中心医院收治的173例AR患者作为观察组,另外选取同期在本院进行体检的63名健康者作为对照组。结果在对照组、轻度AR组、中重度AR组中,血清miR-124-3p水平逐渐降低,分别为1.02±0.29、0.79±0.21、0.63±0.18,miR-202-5p水平逐渐升高,分别为1.01±0.25、1.39±0.29、1.62±0.33,两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)。AR患者血清miR-124-3p水平与miR-202-5p水平呈负相关(r=-0.437,P<0.001)。血清miR-124-3p水平[OR(95%CI)=0.651(0.508~0.835)]、症状发作时间[OR(95%CI)=1.671(1.088~2.567)]、哮喘[OR(95%CI)=1.571(1.029~2.399)]、血清miR-202-5p[OR(95%CI)=2.053(1.020~4.133)]水平是中重度AR患者的影响因素(P<0.05)。血清miR-124-3p和miR-202-5p二者联合预测优于血清miR-124-3p(Z=2.385,P=0.017)或miR-202-5p(Z=2.466,P=0.014)单独预测。结论AR患者血清中,miR-124-3p低表达、miR-202-5p高表达,与患者病情严重程度密切相关,有望成为潜在的生物标志物。

miR-211-5p和miR-202-3p在抑郁症患者中的表达及其与患者病情程度和认知功能的关系

目的探究微小核糖核酸-211-5p(miR-211-5p)和微小核糖核酸-202-3p(miR-202-3p)在抑郁症患者中的表达及其与患者病情程度和认知功能的关系。方法选取2021年1月至2023年6月郑州大学第一附属医院精神科收治的92例确诊为抑郁症的患者为抑郁症组,同期选取本院体检健康(精神状态正常)的志愿者92例为对照组。根据抑郁自评量表(SDS)分为轻度抑郁组(SDS:53~62分)45例、中度抑郁组(SDS:63~72分)30例、重度抑郁组(SDS:73分及以上)17例。根据简易智力状态检查量表(MMSE)评分分为轻度认知功能障碍组(MMSE:21~26分)24例、中度认知功能障碍组(MMSE:10~20分)40例、重度认知功能障碍组(MMSE:1~9分)28例。实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-211-5p和miR-202-3p水平。血清miR-211-5p、miR-202-3p水平对抑郁症的诊断价值采用ROC曲线进行分析。血清miR-211-5p、miR-202-3p水平与病情程度及认知功能的关系采用Spearman相关性分析。结果抑郁症患者血清miR-211-5p水平低于对照组,miR-202-3p水平高于对照组(P<0.05)。miR-211-5p、miR-202-3p联合诊断抑郁症的AUC高于miR-211-5p(Z=4.701,P<0.001)、miR-202-3p(Z=2.275,P=0.023)单独诊断的AUC。与轻度抑郁组相比,中度抑郁组和重度抑郁组miR-211-5p水平依次降低,与轻度抑郁组相比,中度抑郁组和重度抑郁组miR-202-3p水平依次升高。不同认知功能抑郁症患者血清miR-211-5p水平比较:重度认知功能障碍组<中度认知功能障碍组<轻度认知功能障碍组;miR-202-3p水平比较:重度认知功能障碍组>中度认知功能障碍组>轻度认知功能障碍组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,抑郁症患者血清miR-211-5p水平与病情程度及认知功能损害呈负相关,miR-202-3p水平与病情程度及认知功能损害呈正相关(P<0.05)。结论抑郁症患者血清miR-211-5p低表达,miR-202-3p高表达,二者与病情程度及认知功能有关,有成为抑郁症辅助诊断生物学指标的潜力。

p200家族蛋白人AIM2及小鼠Aim2介导的新型炎性复合体

人AIM2及小鼠Aim2属干扰素诱导蛋白p200家族成员。AIM2的突变和黑色素瘤、大肠癌等肿瘤进程密切相关。2009年以来一系列的研究表明其作为一种新的DNA识别受体(DNA sensor),其对内源性及病原体双链DNA(dsDNA)同样敏感。AIM2介导的天然免疫应答通过识别并结合胞质中的dsDNA,进而启动caspase-1炎性复合体(inflammasome)通路相关的免疫反应。本文通过介绍p200家族蛋白(尤其是AIM2、Aim2、p202)的结构及表达定位特点,综述了AIM2调节自身免疫应答的机制及最新进展,并对其临床意义做出展望。

miR-202-5p靶向下调SOX6表达对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激的影响研究

目的:探讨miR-202-5p靶向SOX6对缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激的影响。方法:体外培养大鼠胚胎心肌细胞H9C2,构建心肌细胞缺氧/复氧损伤模型。将H9C2细胞随机分为空白组、缺氧复氧组、缺氧复氧+miR-con组、缺氧复氧+miR-202-5p组、缺氧复氧+miR-202-5p+pcDNA组、缺氧复氧+miR-202-5p+pcDNA-SOX6组。qRT-PCR和Western blot检测心肌细胞miR-202-5p和SOX6的表达水平。CCK-8法检测心肌细胞存活率。流式细胞术检测心肌细胞凋亡。试剂盒检测活性氧簇(ROS)水平、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量变化。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-202-5p和SOX6的靶向调控关系。结果:缺氧复氧处理可显著抑制心肌细胞miR-202-5p表达,促进SOX6表达,提高ROS和MDA水平,降低GSH-Px水平,抑制细胞存活,促进细胞凋亡。上调miR-202-5p表达可显著降低ROS和MDA水平,提高GSH-Px水平,促进细胞存活,抑制细胞凋亡。miR-202-5p可靶向负性调控SOX6的表达。上调SOX6可部分逆转miR-202-5p对缺氧复氧处理心肌细胞的保护作用。结论:miR-202-5p通过靶向下调SOX6减轻缺氧复氧诱导的心肌细胞氧化应激,促进细胞存活,抑制细胞凋亡,发挥保护作用。

西门塔尔牛无角性状的分子鉴定及应用

为鉴定西门塔尔牛有角和无角性状的相应基因型,为西门塔尔牛无角品系的培育提供数据基础,试验采集了103头无角西门塔尔牛、5头有角西门塔尔牛和5头无角安格斯牛颈静脉血,提取全血DNA后,通过PCR-测序法检测牛PC基因中P202ID突变位点的基因型。分型与测序结果显示,108头西门塔尔牛P202ID位点的基因型与角型完全一致,其中,103头无角西门塔尔牛中4头为纯合子,基因型与无角安格斯牛一致,均为PC/PC,PC的基因频率为0.0370;82头为无角杂合子,基因型为PC/prs,其中,PC的基因频率为0.7593;剩余17头去角西门塔尔牛与5头有角西门塔尔牛基因型一致,均为prs/prs,prs的基因频率为0.2037。鉴定群体中PC的基因频率为0.4166,prs的基因频率为0.5834。卡方检验结果显示,P202ID基因型与检测群体中有无角性状具有极显著关联,可以利用P202ID位点对西门塔尔牛角型进行鉴定。

白癜风患者外周血中miR-155、miR-1238-3p、 miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p的 表达与病情进展的研究

目的本研究旨在探讨miR-155、miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p在白癜风患者外周血中的表达改变与病程发展的关系。方法本次研究选取2018年1月—2019年1月来我院治疗和检查的62例白癜风患者,平均年龄(23.25±2.11)岁,男30例(48.39%),女32例(51.61%),其中白癜风稳定期患者44例(71.77%),白癜风进展期患者18例(28.23%)。选取与白癜风组性别、年龄和体质量指数匹配的健康者作为对照组;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测受试者外周血中miR-155、miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p的表达量;通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IFN-α和白细胞介素(IL)-1β蛋白水平含量;通过活性氧检测试剂盒和流式细胞仪检测受试者白癜风患者细胞内活性氧含量。结果随着白癜风病程发展,miR-155 mRNA和蛋白表达量逐渐增加,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p mRNA和蛋白表达量逐渐降低(P<0.05)。白癜风进展期miR-155 mRNA和蛋白表达量高于白癜风稳定期,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p mRNA和蛋白表达量低于白癜风稳定期(P<0.05);相较于健康对照组,白癜风稳定期和白癜风进展期均能使TNF-α、IFN-γ、IFN-α和IL-1β含量增加,白癜风进展期TNF-α、IFN-γ、IFN-α和IL-1β含量高于白癜风稳定期;相较于健康对照组(2.36±0.15),白癜风稳定期(3.85±0.47)和白癜风进展期(8.18±0.56)活性氧含量均增加,且进展期高于稳定期(P<0.05)。结论随着白癜风病程发展,外周血中miR-155表达量逐渐增加,miR-1238-3p、miR-202-3p、miR-630和miR-766-3p表达量逐渐降低。

男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平变化及临床意义

目的探讨男性不育症患者精浆外泌体微小RNA-202-5p(miR-202-5p)水平变化及其在男性生殖中的临床意义。方法选取于解放军东部战区总医院、江苏省中医院及温州医科大学附属第一医院就诊的男性不育症患者107例为研究对象,其中无精症患者53例,弱精症患者54例;另选取同期招募的53例正常生育的健康男性为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测精浆外泌体miR-202-5p水平,分析其在男性不育症中的诊断价值及与精液参数的相关性,采用生物信息学分析软件预测其靶基因、相关通路及靶蛋白相互作用网络。结果与对照组比较,弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显增加(P<0.05),无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平明显降低(P<0.05);无精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平较弱精症患者明显降低(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,精浆外泌体miR-202-5p诊断弱精症的曲线下面积(AUC)为0.664,诊断无精症的AUC为0.785,对弱精症和无精症鉴别诊断的AUC为0.878。弱精症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与a+b级前向运动精子比例呈负相关(r=-0.312,P<0.05),与不动精子比例呈正相关(r=0.308,P<0.05)。精浆外泌体miR-202-5p是弱精症和无精症发生的危险因素(P<0.05)。生物信息学分析发现,miR-202-5p的靶基因明显富集于生殖和精子功能密切相关的蛋白调控通路。结论男性不育症患者精浆外泌体miR-202-5p水平与正常生育的健康男性存在明显差异,且与精子活力密切相关,可能参与了男性不育症的发生、发展过程。

弱精子症和非梗阻性无精子症患者精浆中miR-106b-5p和miR-202-3p的表达检测及临床价值

目的探讨miR-106b-5p和miR-202-3p在弱精子症和非梗阻性无精子症(NOA)患者精浆中的表达情况及其临床价值。方法选取2018年12月至2020年10月于唐山市妇幼保健院就诊的男性不育症患者和精液参数正常的志愿者为研究对象,根据精液检查参数和临床资料不同分为3组:精子浓度>15×10^(6)/ml且精子前向运动(PR)<32%为弱精子症组(n=106),NOA患者为NOA组(n=92),同期精液检查参数正常的男性为对照组(n=119)。提取各组研究对象的精浆miRNA,采用实时定量PCR(qRT-PCR)法分析各组对象精浆miR-106b-5p和miR-202-3p的表达情况;采用受试者工作特征曲线(ROC)评价精浆miR-106b-5p和miR-202-3p对NOA的诊断价值。结果qRT-PCR检测结果显示,NOA组miR-106b-5p和miR-202-3p的表达水平显著低于对照组及弱精子症组(P<0.05),而弱精子症组中两者的表达水平与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。ROC分析结果显示,miR-106b-5p诊断NOA的ROC曲线下面积(AUC)为0.750[95%CI(0.665,0.835),P<0.0001],灵敏度和特异性分别为72.1%和61.2%;miR-202-3p诊断NOA的AUC为0.873[95%CI(0.810,0.936),P<0.0001],灵敏度和特异性分别为88.6%和82.9%。结论NOA患者精浆中miR-106b-5p和miR-202-3p的表达显著降低,二者可能成为NOA临床诊断的新标志物。

miR-202-5p通过下调NFATc3的表达抑制口腔鳞状细胞癌细胞的生长、迁移和侵袭

目的:探讨miR-202-5p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous carcinoma,OSCC)细胞生长、集落形成、迁移和侵袭的影响及其可能的机制。方法:通过qPCR法检测OSCC细胞系(Tca8113和SCC-4)和口腔角质细胞HOK中miR-202-5p和T细胞核因子c3(nuclear factor of activated T-cells isoform c3,NFATc3)mRNA的表达水平;将miR-202-5p mimic或/和NFATc3过表达质粒转染入Tca8113和SCC-4细胞,用MTT和集落形成实验检测转染对细胞增殖的影响,划痕伤口愈合实验和Transwell实验检测转染对细胞迁移和侵袭的影响,用Western blotting实验检测转染对NFATc3蛋白表达的影响;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-202-5p对候选靶基因NFATc3的直接调控作用。结果:与正常口腔角质细胞HOK相比,miR-202-5p在OSCC细胞Tca8113和SCC-4中呈低表达(均P<0.01),NFATc3 m RNA和蛋白质表达显著升高(P<0.01)。在Tca8113细胞和SCC-4细胞中,过表达miR-202-5p可显著抑制细胞生长、集落形成、迁移、侵袭以及细胞中NFATc3表达(均P<0.01)。NFATc3被证实是miR-202-5p的靶基因,过表达NFATc3能逆转miR-202-5p对OSCC细胞生长、迁移和侵袭的抑制作用。结论:miR-202-5p通过下调NFATc3表达发挥其肿瘤抑制功能,导致OSCC细胞的生长、迁移和侵袭受到抑制。

miR-202-5p在牙鲆性腺中的表达分析及其与cbx2靶向关系验证

为研究miR-202-5p在鱼类中作用的靶基因及功能,采用荧光定量PCR和原位杂交技术构建了miR-202-5p在牙鲆(Paralichthys olivaceus)不同组织和雌雄性腺中的表达谱。定量结果发现,miR-202-5p在牙鲆性腺中具有特异性的高表达,且在精巢中的表达水平高于卵巢。原位杂交结果显示,miR-202-5p主要在精巢的精原细胞和精母细胞中表达,而仅在卵巢的Ⅳ和Ⅴ期卵母细胞中有较强烈表达。研究发现色素框同源蛋白2(Chromobox homolog 2,CBX2)在性腺发育中具有重要调节作用,为进一步研究miR-202-5p在牙鲆性腺发育中的功能,采用生物信息学方法预测和双荧光素酶报告基因技术鉴定了二者的靶向关系,结果证实,cbx2为miR-202-5p直接调节的靶基因,为深入阐述miR-202-5p在牙鲆性腺发育中的作用机制提供了基础。

SLE患者血清miR-202-3p、PS-PLA1水平与疾病活动度和细胞免疫功能的关系

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清微小RNA-202-3p(miR-202-3p)、磷脂酰丝氨酸特异性磷脂酶A1(PS-PLA1)水平与疾病活动度和细胞免疫功能的关系。方法选择SLE患者158例(SLE组),根据SLE疾病活动度指数(SLEDAI)评分分为轻度52例、中度71例、重度35例,同期选择体检健康的志愿者76例(对照组),采集所有研究对象空腹肘静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-202-3p,采用ELISA法检测血清PS-PLA1,采用流式细胞仪检测细胞免疫功能(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞以及CD4^(+)/CD8^(+))。采用Pearson或Spearman相关分析法分析SLE患者血清miR-202-3p、PS-PLA1水平与SLEDAI评分和细胞免疫功能的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-202-3p、PS-PLA1水平对重度SLE的鉴别诊断价值。结果观察组血清miR-202-3p水平低于对照组,血清PS-PLA1水平高于对照组(P均<0.05)。随着疾病活动度增加,SLE患者血清miR-202-3p水平逐渐降低,血清PS-PLA1水平逐渐升高(P均<0.05)。观察组CD3^(+)、CD4^(+)T细胞及CD4^(+)/CD8^(+)均低于对照组,而CD8^(+)T细胞高于对照组(P均<0.05)。相关性分析显示,SLE患者血清miR-202-3p水平与SLEDAI评分、CD8^(+)T细胞均呈负相关关系,与CD3^(+)、CD4^(+)T细胞及CD4^(+)/CD8^(+)均呈正相关关系(P均<0.05);SLE患者血清PS-PLA1水平与SLEDAI评分、CD8^(+)T细胞均呈正相关关系,与CD3^(+)、CD4^(+)T细胞及CD4^(+)/CD8^(+)均呈负相关关系(P均<0.05)。血清miR-202-3p、PS-PLA1水平单独时鉴别重度SLE的曲线下面积(AUC)分别为0.697、0.717,二者联合时鉴别重度SLE的AUC为0.903,血清miR-202-3p、PS-PLA1水平联合时鉴别重度SLE的AUC高于二者单独时(Z分别为4.417、3.311,P均<0.05)。结论SLE患者血清miR-202-3p水平降低、血清PS-PLA1水平升高,并且二者与疾病活动度和细胞免疫功能紊乱密切相关。miR-202-3p、PS-PLA1可作为鉴别SLE病情程度的血清生物标志物。

过表达miR-202-5p通过抑制PCSK9减轻阿尔茨海默病神经损伤

目的探讨miR-202-5p对前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)的调控作用,及对阿尔茨海默症(AD)神经元损伤的影响。方法SD大鼠用侧脑室注射β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)法建立AD模型,随机分正常对照组、模型组、ago-miR-202-5p组、ago-NC组、PCSK9抑制剂组。给药结束后进行空间记忆及学习能力检测;尼氏染色检测脑皮层组织神经元变化;神经元核抗原(NeuN)免疫荧光染色法检测脑皮层组织神经元数目;ELISA法检测脑脊液中PCSK9、β-淀粉样蛋白42(Aβ42)、β-淀粉样蛋白40(Aβ40)、总胆固醇(TC)及脑皮层组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、磷酸化Tau蛋白(P-tau)水平;qRT-PCR法检测脑皮层组织miR-202-5p表达水平;Western blot法检测脑皮层组织PCSK9、LDL受体相关蛋白1(LRP-1)、载脂蛋白E(ApoE)及淀粉前体蛋白(APP)、β位点APP剪切酶1(BACE1)蛋白表达。双荧光素酶验证miR-202-5p对PCSK9的靶向调控作用。建立体外AD细胞模型,共转染miR-202-5p mimic及PCSK9过表达载体(pcDNA-PCSK9),探究PCSK9过表达对miR-202-5p作用的逆转。结果与正常对照组相比,模型组大鼠空间记忆及学习能力降低,脑皮质神经元损伤及数目减少,脑脊液中PCSK9、Aβ42、Aβ40、胆固醇水平升高,脑皮质组织中P-tau及炎症因子水平升高,miR-202-5p表达降低,PCSK9活化介导的BACE1-APP-Aβ生成途径活性升高,LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除活性降低(P<0.05)。miR-202-5p过表达或PCSK9抑制剂干预治疗,均可抑制Aβ42、Aβ40沉积引起的神经元损伤,减少炎症因子分泌,并抑制PCSK9活化介导的BACE1、APP、Aβ生成,提高LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除(P<0.05)。miR-202-5p与PCSK9之间存在靶向调控作用。PCSK9上调,可部分减弱miR-202-5p过表达发挥的抗AD作用(P<0.05)。结论过表达miR-202-5p可通过抑制PCSK9活化抑制Aβ生成并促进LRP-1-ApoE介导的促胆固醇摄取及Aβ清除,进而发挥抗AD神经损伤作用。

LncRNA SOX21-AS1靶向调控miR-202-5p影响结直肠癌细胞生物学行为的实验研究

背景:长链非编码RNA(lncRNA)可通过调控miRNA的表达来参与肿瘤发生、发展过程,但lncRNA在结直肠癌发展和转移中的分子机制尚未阐明。目的:探讨lncRNA SOX21-AS1通过调控微小RNA-202-5p(miR-202-5p)的表达影响结直肠癌细胞生物学过程的分子机制。方法:以SOX21-AS1小分子干扰RNA(si-SOX21-AS1)、miR-202-5p模拟物及其抑制剂转染结直肠癌HCT116、SW480细胞,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测结直肠癌细胞株SOX21-AS1、miR-202-5p mRNA表达,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭情况,双萤光素酶报告实验检测SOX21-AS1与miR-202-5p的靶向调控关系,蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白1(cyclin D1)、MMP-2、cleaved caspase-3蛋白表达。结果:结直肠癌细胞中SOX21-AS1 mRNA表达显著高于人正常结肠黏膜上皮细胞(P<0.05),miR-202-5p mRNA表达显著降低(P<0.05)。沉默SOX21-AS1或上调miR-202-5p表达可显著抑制HCT116、SW480细胞增殖、迁移和侵袭,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),并可抑制cyclin D1、MMP-2蛋白表达(P<0.05),促进cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。SOX21-AS1可靶向结合miR-202-5p,并可负向调控miR-202-5p的表达和活性;抑制miR-202-5p表达可逆转沉默SOX21-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结论:沉默SOX21-AS1表达可通过上调miR-202-5p的表达从而抑制结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭,并可诱导细胞凋亡。

重型颅脑损伤患者血浆外泌体微小RNA-202-5p表达水平及其对预后的预测价值

目的观察重型颅脑损伤(sTBI)患者血浆外泌体微小RNA-202-5p(miR-202-5p)的表达水平及其对预后的预测价值。方法选择sTBI患者78例为研究对象,根据格拉斯哥预后量表(GOS)评分将sTBI患者分为预后不良(n=27)和预后良好(n=51)患者,同时选择同期50例健康人群为对照。提取人群血浆外泌体,检测外泌体miR-202-5p表达水平,采用Logistic回归分析探讨预后不良的相关因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-202-5p对预后的预测价值。结果sTBI患者血浆外泌体miR-202-5p表达水平为(0.8±0.1),低于健康人群的(3.7±0.2),差异有统计学意义(t=12.235,P<0.01);预后不良患者格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、miR-202-5p水平及鹿特丹CT评分低于预后良好患者,急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)评分高于预后良好患者,差异均有统计学意义(P<0.05);GCS评分、miR-202-5p水平、APACHEⅡ评分及鹿特丹CT评分是影响患者预后的独立危险因素;血浆外泌体miR-202-5p水平与鹿特丹CT评分和GCS评分呈正相关(r=0.703、0.711,P<0.01),与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.693,P<0.01);miR-202-5p的ROC曲线下面积(AUC)预测患者预后的效果优于APACHEⅡ评分、鹿特丹CT评分及GCS评分。结论sTBI患者血浆外泌体低表达miR-202-5p能够反映疾病预后。

抑制microRNA-202-3p表达促进滑膜间充质干细胞软骨分化

目的:探究microRNA-202-3p(miR-202-3p)对滑膜间充质干细胞(SMSCs)软骨分化能力的影响。方法:从骨关节炎(OA)患者手术切除的滑膜组织标本中分离培养SMSCs,分别以Has-miR-202-3p inhibitor和Has-miR-202-3p inhibitor negative control(NC)转染第3代SMSCs,分别设为实验组和对照组,培养7 d内,检测两组细胞增殖曲线;培养21 d后,组织学观察两组成软骨能力;qRT-PCR检测两组成软骨分化后细胞的软骨特异性基因表达。结果:滑膜间充质干细胞从第3天开始进入快速增殖期,CCK-8实验和亚甲蓝染色显示实验组细胞增殖数量明显多于对照组;成软骨诱导21 d后,实验组软骨特异性基因Ⅱ型胶原蛋白、蛋白多糖、Sox9基因表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论:抑制microRNA-202-3p表达可促进滑膜间充质干细胞增殖和向软骨细胞分化。

miR-202-3p调节血管内皮生长因子信号通路抑制肺腺癌的增殖和迁移与侵袭

目的探究miR-202-3p与血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的调控关系及其影响肺腺癌细胞生长的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-202-3p的表达水平。通过Western blot实验检测肺腺癌细胞中VEGF信号通路相关蛋白的磷酸化水平及蛋白水平。利用噻唑蓝(MTT)实验、细胞划痕实验及Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移与侵袭能力。结果miR-202-3p在肺腺癌细胞中显著下调。下调miR-202-3p提高了VEGF信号通路相关蛋白磷酸化水平,但不改变通路相关蛋白的表达,而加入通路抑制剂后通路相关蛋白磷酸化水平有所恢复。下调miR-202-3p可促进肺腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭,加入VEGF信号通路抑制剂后,肺腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力显著降低。结论miR-202-3p可调控VEGF信号通路抑制肺腺癌细胞的发生发展,miR-202-3p很可能是治疗肺腺癌的新靶点。

阿尔茨海默病患者血清miR-202-5p、PCSK9的表达水平及其临床意义

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清miR-202-5p、前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)的表达水平及其临床意义。方法选取79例AD患者为AD组,39名体检健康者为对照组。检测两组血清miR-202-5p、PCSK9水平,分析AD患者血清miR-202-5p、PCSK9水平与血清β淀粉样蛋白(Aβ)_(1-40)、Aβ_(1-42)水平和简易精神状态检查(MMSE)量表评分的相关性,并评估血清miR-202-5p、PCSK9水平单独及联合对AD的诊断价值。结果AD组血清Aβ_(1-42)、miR-202-5p水平及MMSE量表评分低于对照组,血清Aβ_(1-40)、PCSK9水平高于对照组(P<0.05)。AD患者血清miR-202-5p水平与血清Aβ_(1-40)、PCSK9水平呈负相关,与血清Aβ_(1-42)水平、MMSE量表评分呈正相关(P<0.05);血清PCSK9水平与血清Aβ_(1-40)水平呈正相关,与血清Aβ_(1-42)水平、MMSE量表评分呈负相关(P<0.05)。血清miR-202-5p、PCSK9水平联合诊断AD的曲线下面积大于二者单独诊断(P<0.05)。结论AD患者血清miR-202-5p水平降低、血清PCSK9水平升高,二者水平变化可能与AD患者Aβ沉积和认知功能受损有关,或可作为AD的辅助诊断指标。

LncRNA EBLN3P调节miR-202-5p/BAG3轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA内源性博纳病毒样核蛋白3假基因(LncRNA EBLN3P)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其作用机制。方法 体外培养乳腺癌细胞MDA-MB-468、MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7及人乳腺上皮MCF-10A细胞,qRT-PCR法检测各细胞LncRNA EBLN3P和微小RNA-202-5p(miR-202-5p)的相对表达量,Western blot法检测Bcl2关联永生基因3(BAG3)蛋白的表达;使用Starbase数据库预测LncRNA EBLN3P、BAG3与miR-202-5p的结合位点,做双萤光素酶报告基因分析;转染MCF-7细胞并分为NC组、si-NC组、si-EBLN3P组、si-EBLN3P+anti-miR-NC组和si-EBLN3P+anti-miR-202-5p组,qRT-PCR法检测各组细胞LncRNA EBLN3P和miR-202-5p的相对表达量,Western blot法检测BAG3蛋白的表达,Edu法检测Edu阳性细胞比例,流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞划痕试验检测愈合效率。结果 与MCF-10A组比较,MDA-MB-468、MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7组细胞LncRNA EBLN3P、BAG3表达水平升高,miR-202-5p表达水平下降(P<0.05);生物信息学分析显示,miR-202-5p与LncRNA EBLN3P、BAG3有结合位点,且双萤光素酶报告基因证实二者存在靶向关系;与si-NC组比较,si-EBLN3P组LncRNA EBLN3P、BAG3的表达水平以及Edu阳性细胞比例、划痕愈合率降低,miR-202-5p的表达水平以及凋亡率升高(P<0.05);与si-EBLN3P+anti-miR-NC组比较,si-EBLN3P+anti-miR-202-5p组BAG3的表达水平以及Edu阳性细胞比例、划痕愈合率升高,miR-202-5p的表达水平以及凋亡率降低(P<0.05)。结论 沉默LncRNA EBLN3P表达通过上调miR-202-5p、降低BAG3的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡。