p21-激活激酶家族在结直肠癌中的研究进展与展望

p21-激活激酶家族(PAKs)属于丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶家族,已在多种细胞过程中展示出关键的调控作用。近年来,对于PAKs在结直肠癌中的研究取得了显著的进展,揭示了其在癌症发生和进展中的重要作用。文章论述PAKs在结直肠癌中的表达、调控机制以及对肿瘤生物学特性的影响,及其抑制剂的相关研究进展,为未来的研究和治疗方向提供启示。

p21活化激酶4致癌机制及与消化系统恶性肿瘤发生发展的关系

p21活化激酶4(PAK4)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在多种消化系统肿瘤中过表达,是肿瘤细胞信号转导的关键因子之一。PAK4过表达与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、免疫逃逸及耐药性有关。在消化系统肿瘤中,PAK4可通过影响细胞周期、细胞凋亡及细胞骨架重塑等生物学过程,促进肿瘤的恶性行为。多项研究表明,PAK4抑制剂显示出抑制肿瘤增殖和转移的潜力,在联合化疗中具有较好的应用前景。

p21蛋白激活激酶4在乳腺癌上皮间质转化中的作用研究

目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在乳腺癌细胞上皮间质转化中的作用。方法:在乳腺癌MCF7细胞中超表达PAK4,而在乳腺癌MDA-MB-231细胞中干扰PAK4表达,通过迁移和侵袭实验检测其对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin mRNA和蛋白质表达量变化,免疫印迹法检测EMT相关转录激活因子Snail、Slug表达量变化。结果:MCF7细胞超表达PAK4后,细胞的迁移侵袭能力显著增加,并且上皮标志分子E-Cadherin蛋白表达下调,而间质标志分子N-Cadherin和Vimentin蛋白则表达上调,EMT相关转录激活因子Slug表达量增加;MDA-MB-231细胞中,抑制内源PAK4表达能显著降低细胞的迁移侵袭能力,上调E-Cadherin蛋白表达,下调NCadherin、Vimentin和Slug蛋白的表达。结论:PAK4通过上调Slug促进乳腺癌发生上皮间质转化,可作为抑制乳腺癌转移的分子靶点。

靶向p21蛋白激活激酶2逆转非小细胞肺癌细胞吉非替尼耐药

靶向突变的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)治疗中显示出越来越重要的作用。然而,不可避免的耐药性的出现极大限制了TKI的临床治疗效果。p21蛋白激活激酶2(p21-activated protein kinase 2,PAK2)是丝/苏氨酸激酶家族的重要成员,在肿瘤发生与发展中发挥重要的作用。本研究拟探讨靶向抑制PAK2逆转非小细胞肺癌吉非替尼耐药的作用及可能机制。首先Western印迹检测发现,相比非小细胞肺癌吉非替尼敏感细胞HCC827,耐药细胞HCC827/GR中PAK2的蛋白质磷酸化水平显著上调(P<0.01),而PAK2总蛋白质水平未见明显变化。采用PAK2抑制剂FRAX597和G5555诱导HCC827/GR细胞,MTS及克隆形成结果显示,抑制剂FRAX597和G5555均能显著增加HCC827/GR细胞对吉非替尼的敏感性(P<0.01)。流式细胞术分析发现,抑制剂FRAX597处理诱导HCC827/GR细胞发生G2/M期阻滞,并增加吉非替尼诱导的HCC827/GR细胞的凋亡以及切割胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)表达(P<0.01)。最后,Western印迹结果显示,抑制剂FRAX597处理能够抑制HCC827/GR细胞BCL-2和CDK4蛋白质表达(P<0.05),上调BAX、p21和p27蛋白质表达(P<0.05)。综上所述,PAK2活化与非小细胞肺癌吉非替尼耐药性密切相关;靶向抑制PAK2活化能够诱导细胞周期阻滞及凋亡,从而提高非小细胞肺癌细胞对吉非替尼的敏感性。

下调p21活化蛋白激酶2表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:应用RNA干扰技术下调人乳腺癌MCF-7细胞中p21活化蛋白激酶2(PAK2)的表达,观察其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建针对PAK2基因的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体并包装病毒颗粒,感染MCF-7细胞,筛选获得稳定细胞株。Western blotting检测细胞中PAK2蛋白表达水平的改变;CellTiter96 AQueous法和软琼脂集落形成实验检测MCF-7细胞体外增殖能力的改变;流式细胞术检测十字孢碱诱导的MCF-7细胞凋亡的变化。结果:MCF-7细胞的PAK2基因被沉默后,PAK2蛋白表达量明显下降(P<0.01),与阴性对照组相比,sh-PAK2组细胞生长明显减缓(P<0.01),克隆形成的数目和大小明显下降(P<0.01),十字孢碱诱导的细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:通过RNA干扰技术下调PAK2的表达,可抑制MCF-7细胞的生长和增殖,并增强其对化疗药物诱导的细胞凋亡的敏感性。PAK2可能是潜在的乳腺癌治疗的新靶点。

miR-216a-5p靶向作用于PAK2对膀胱癌细胞增殖和凋亡影响的体外研究

目的探讨miR-216a-5p在多种膀胱癌细胞系中表达及调控p21活化蛋白激酶2(PAK2)基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-216a-5p在正常膀胱细胞系SV-HUC-1及膀胱癌细胞系5637、J82、T24和EJ中的表达,选取其中两种表达miR-216a-5p最少的5637和J82为对象,实验分两组:对照组(转染miR-NC)、实验组(转染miR-216a-5p)。利用qRT-PCR法检测PAK2 mRNA的表达。Western blot法检测PAK2、p-Akt和p-ERK蛋白的表达。Cell Counting Kit-8(CCK-8)实验和克隆形成实验检测膀胱癌细胞活力和增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 miR-216a-5p在膀胱癌细胞系中的表达量均低。实验组PAK2基因mRNA及其蛋自的表达明显降低,PAK2 mRNA在5637细胞中对照组和实验组表达量分别为1.01±0.15和0.40±0.11(P<0.01),在J82细胞中对照组和实验组表达量分别为1.00±0.09和0.56±0.14(P<0.01)。p-Akt和p-ERK蛋白表达显著降低。实验组细胞活力明显被抑制,增殖能力明显降低。实验组细胞凋亡显著增加(P<0.01)。结论 miR-216a-5p在多种膀胱癌细胞系中呈低表达,可在体外靶向抑制PAK2基因,抑制膀胱癌细胞系5637和J82的增殖能力,促进细胞凋亡,可能成为具有膀胱癌生物治疗意义的靶标分子。

p21活化激酶4在乳腺癌细胞中的表达及定位

目的:研究p21激活激酶4(PAK4)在人乳腺癌细胞和组织中的表达和定位。方法:蛋白印迹法检测PAK4在人乳腺癌细胞系中蛋白和基因的表达,激光共聚焦扫描显微镜检测内源PAK4在MCF-7乳腺癌细胞中的定位。结果:PAK4在人乳腺肿瘤细胞系中蛋白和基因表达水平增高,激光共聚焦扫描显微镜观察发现PAK4主要定位于MCF-7细胞质中。结论:PAK4在人乳腺癌细胞系中高表达,主要定位于乳腺癌组织细胞质内,可能是人乳腺癌重要的调节因子。

Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p靶向SKP2缓解支气管肺发育不良

目的探讨来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)外泌体(exosomal,Exos)-miR-21-5p(简称miR-21)靶向S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,SKP2)对支气管肺泡发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的保护效应及作用机制。方法使用60只6~8周龄的SD大鼠,其中30只通过差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并进行培养。密度梯度离心法用于获得AEC-Ⅱ来源的外泌体,密度梯度离心法用于提取AEC-Ⅱ培养基中囊泡,并通过透射电镜及粒径分析对其验证,双荧光素报告基因实验以确认miR-21与SKP2的靶向关系。剩余的30只大鼠按照3∶1的雌雄比例混合,以便于进行怀孕检测。将这些新生小鼠随机分为4个不同的实验组:空气对照组(Con组)、高氧处理组(BPD+PBS组)、接受高氧和外泌体治疗的小鼠(BPD+Exos-miR-21组),以及高氧联合外泌体miR-21抑制剂处理组(BPD+Exos-AV-miR-21组)。新生SD大鼠将暴露于85%的氧气环境中,以此建立BPD模型。经过14 d高氧处理后,使用RTq-PCR技术检测肺组织和外泌体中miR-21的表达水平。肺组织经HE染色观察其病理学变化,并计算了平均肺泡线性截距(MLI)和放射状肺泡计数(RAC)。分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)的水平,荧光分光光度法测定活性氧簇(ROS)水平。此外,利用Western blot技术检测了SKP2、NR2F2和VEGF-A蛋白的表达水平。结果电镜及粒径分析结果显示AEC-Ⅱ细胞提取的小泡结构物质属于外泌体,miR-21在外泌体中表达显著上调(P<0.01),双荧光素酶基因报告实验证实SKP2为miR-21的作用靶标。与Con组比较,BPD+PBS组及BPD+Exos-AVmiR-21组肺组织HE可见肺组织结构紊乱,肺泡增大、简化,ROS、MDA、MLI增高及SKP2蛋白表达升高(P<0.01);而RAC、SOD、T-AOC、miR-21下调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达降低(P<0.01);与BPD+PBS组比较,BPD+Exos-miR-21组肺组织HE可见无肺泡数目增加,肺泡简化程度好转,同时MLI、ROS、MDA降低及SKP2蛋白表达降低(P<0.01);而ROC、SOD、T-AOC、miR-21上调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达升高(P<0.01)。结论AEC-Ⅱ来源的Exos-miR-21可能靶向SKP2通过促进NR2F2、VEGF-A蛋白表达抑制氧化应激促进肺泡发育改善BPD。

PAK1和NF2/Merlin的拮抗作用驱动少突胶质细胞髓鞘膜扩张

在中枢神经系统中,少突胶质细胞(OL)髓鞘的形成依赖于肌动蛋白细胞骨架从聚合到解聚的转变。触发这种转变的分子机制尚未阐明。本研究确定P21活化激酶1(PAK1)是OL中肌动蛋白解聚的主要调节因子。我们的结果表明,PAK1以激酶抑制形式在OL中积累,从而触发肌动蛋白分解,进而导致髓鞘膜扩张。值得注意的是,PAK1结合伙伴的蛋白质组学分析使我们能够确定NF2/Merlin是其内源性抑制剂。本研究表明,OL中的Nf2敲低会导致PAK1活化、肌动蛋白聚合和OL髓鞘膜扩张减少。通过使用PAK1抑制剂治疗可以挽救这种影响。本研究还提供了证据表明,少突胶质细胞中特定的Pak1功能丧失会刺激体内髓鞘增厚。总体而言,我们的数据表明PAK1和NF2/Merlin对OL肌动蛋白细胞骨架的拮抗作用对于髓鞘的正常形成至关重要。这些发现对研究脱髓鞘疾病和神经发育障碍的机制和治疗有着重要意义。

p21活化蛋白激酶与心血管疾病:从病理生理学到药物发现(英文)

在全世界范围内,心血管疾病的发病率和死亡率一直都是排在首位的。从心脏信号转导这一新兴领域寻找新疗法的可能性促使人们在过去几十年中对心肌重塑开展了广泛深入研究。本综述将对一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶——p21活化激酶1(Pak1)——在心脏方面,特别是其心脏保护作用的研究进展作一回顾。我们提出一种Pak1信号转导模型,揭示其特异性影响心脏细胞进程的机制;进而从抗心肌肥厚,抗缺血性损伤以及在生理条件、β-肾上腺素能和肥厚性应激条件下维持心室钙稳态和电生理稳定性的角度探讨它的心脏保护作用。此外,还将通过天然存在的鞘氨醇及其类似物FTY720,以及旨在减少Pak1自抑制而设计的生物活性肽的研究实例来讨论Pak1激活作为心血管疾病新型疗法以及开展药物研发的可能性。

p21活化激酶2基因变异体rs3662C>A与卒中风险和预后的关系及其对转录活性的影响

目的探讨p21活化激酶2(PAK2)基因变异体rs3662C>A与卒中风险及预后的关系和机制。方法收集动脉粥样硬化性脑梗死患者733例、腔隙性脑梗死488例、脑出血435例和健康对照1727人的资料,利用logistic回归模型分析rs3662C>A与卒中风险的关系,Cox生存回归模型分析rs3662C>A与卒中预后的关系。利用荧光素酶报告基因实验分析rs3662C>A对PAK2转录活性的影响。结果与rs3662CC基因型比较,rs3662A与降低动脉粥样硬化性脑梗死的患病风险相关,比值比为0.67(95%CI:0.47~0.95,P<0.05;显性遗传模型),且主要在男性中相关。平均随访4.5年,携带rs3662A的动脉粥样硬化性脑梗死患者发生心脑血管事件和心血管病死亡的风险升高,风险比分别为1.84(95%CI:1.16~2.92,P<0.05)和2.06(95%CI:1.05~4.04,P<0.05)。rs3662C降低荧光素酶表达活性的79%(P<0.01)。结论PAK2基因rs3662A的携带者患动脉粥样硬化性脑梗死的风险低于rs3662CC携带者,但预后不良。rs3662C>A影响PAK2表达活性。

人参皂苷Rg1对细胞衰老过程中p21,cyclin E和CDK2表达的影响

目的 探讨p21、细胞周期蛋白E(cyclin E)和周期蛋白依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)在人参皂苷Rgl对抗三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导’WI-38细胞衰老过程中的可能作用。方法 细胞超微结构、流式细胞分析和β-半乳糖苷酶细胞化学染色观察衰老细胞,蛋白印迹法检测p21,cyclin E和CDK2蛋白的表达。结果 Rgl预处理可明显减弱t-BHP对WI-38细胞衰老的诱导作用,同时p21表达水平明显降低,cyclin E和CDK2表达水平增加。结论 人参皂苷Rgl对抗三丁基过氧化氢对细胞衰老的诱导作用可能与其改变p21,cyclin E和CDK2的表达水平有关。

Cyclin E、CDK_2和p21^(WAF1)在食管上皮癌变过程中的表达及意义

目的 探讨食管上皮癌变过程中细胞周期调控因子cyclin E、CDK2和p21WAF1的表达状况及其意义。方法 应用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测48例食管癌组织、31例非典型增生组织和17例正常食管粘膜中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA表达。应用半定量RT PCR和Western blot检测22例新鲜食管癌及相应癌旁组织的mRNA和蛋白表达。结果 从食管正常粘膜、非典型增生组织到癌组织,cyclin E和CDK2蛋白和mRNA阳性表达率逐渐上升,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。食管癌组织中cyclin E、CDK2和p21WAF1蛋白及mRNA高表达,与癌旁组织或切缘正常食管粘膜有显著性差异(P<0.01)。cyclin E、CDK2和p21WAF1 基因表达显著正相关(P<0.01 或P<0.05)。结论 食管上皮癌变过程中,细胞周期相关基因cyclin E和CDK2表达逐渐增强。cyclin E基因表达异常是食管癌变过程中的早期事件。p21WAF1 基因在食管癌中高表达,可能与细胞周期调控的反馈机制有关。

PAK2的生物学特性及其与肿瘤关系的研究进展

p21激活激酶2(PAK2)因参与一系列的细胞内生物学活动,对肿瘤研究具有一定的价值,但目前对于其与肿瘤关系的研究相对较少。PAK2可被多种上游信号特别是G蛋白Rho家族的Rac和Cdc42激活,参与多种重要的信号通路及细胞功能的调控。PAK2在多种肿瘤中异常表达后可参与细胞骨架重构、细胞运动、凋亡、信号转导、基因转录翻译及血管生成等,在肿瘤的发生、发展中起重要作用。因此,开展PAK2的相关研究和针对其的靶向治疗可能对肿瘤防治提供新的视角。

PAK2通过调节ERK信号通路的活性促进肺癌细胞顺铂耐药

目的:探讨p21激活激酶2(PAK2)在非小细胞肺癌(NSCLC)中是否存在异常表达,以及是否影响肺癌细胞的顺铂敏感性。方法:采用免疫组化和Western blot(WB)方法检测NSCLC中PAK2的蛋白表达模式。利用PAK2-siRNA下调肺癌细胞系中PAK2的表达后,通过WB和细胞功能学实验等方法,明确PAK2对NSCLC细胞系增殖和侵袭能力的影响,并检测顺铂耐药前后的肺癌细胞系中PAK2的表达改变,及其对肺癌细胞顺铂敏感性的影响。结果:PAK2在NSCLC中呈现明显的胞浆强表达,并且其异常表达与肺癌的恶性表型相关;PAK2在顺铂耐药肺癌细胞中表达增强,抑制ERK活性后,PAK2的表达上调不能显著促进肺癌细胞对顺铂耐药。结论:PAK2在NSCLC中发挥着重要的促癌基因功能,并通过调节ERK信号通路的活性介导肺癌细胞系对顺铂耐药性。

人巨细胞病毒微小RNA miR-US4-5p靶向抑制PAK2的表达

目的寻找人巨细胞病毒微小RNA miR-US4-5p调控的靶mRNA,检测miR-US4-5p对靶mRNA PAK2蛋白质表达的调节作用。方法采用Hybrid-PCR方法及Targetscan软件分析从人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞总RNA中筛选候选靶mRNA;应用荧光素酶实验,通过构建PMIR-PAK2报告基因,将其和miR-US4-5p、miRNA阴性对照共转染到HEK293细胞中,验证miR-US4-5p与候选靶mRNA的结合能力;应用Western blot方法,通过将miR-US4-5p、miRNA阴性对照分别转染到HEK293细胞、HELF细胞、THP-1细胞中,验证转染miR-US4-5p对靶mRNA蛋白质表达的调节作用。结果通过HybridPCR方法及Targetscan筛选出12个miR-US4-5p的待选靶mRNA;荧光素酶实验表明:与转染miRNA阴性对照相比,转染miRUS4-5p可以显著地下调PMIR-PAK2的荧光素酶活性,从而验证了miR-US4-5p与PAK2的结合性,在HEK293细胞、HELF、THP-1细胞中PAK2可以被过表达的miR-US4-5p造成不同程度的下调。结论人巨细胞病毒表达的miR-US4-5p在三种不同细胞系中具备抑制PAK2蛋白质表达的能力。

CDK2、p21和p27在生长激素腺瘤中的表达及CDK2抑制剂的体外应用

目的分析细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期调节因子p21和p27在生长激素腺瘤中的表达水平,观察CDK2抑制剂环O6-己基甲基鸟嘌呤(O6)对GH3细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法构建包含3例垂体和46例腺瘤标本的组织芯片,按Knosp分级将肿瘤分为侵袭组(n=15)和非侵袭组(n=31),免疫组织化学技术分析CDK2、p21和p27的蛋白水平,结合随访信息分析其与临床特性的关系。GH3细胞分为O6组(0.4μmol/L和4μmol/L)和二甲基亚砜组(DMSO),细胞增殖实验MTS法检测细胞活力;Annexin V实验检测细胞凋亡;Brdu实验检测细胞周期,Western blotting实验检测CDK2、p21和p27变化。结果腺瘤标本中CDK2、p21和p27的H-score评分分别为(104.8±28.3)分、(195±39.2)分、(158.8±32.3)分,CDK2在侵袭组表达较非侵袭组明显增高[(140±31.7)分vs.(87.8±26.7)分],p21[(152.3.1±35.2)分vs.(215.7±41.2)分]和p27[(118.1±28.4)分vs.(173.7±34.3)分]则明显降低(P<0.05)。O6处理GH3细胞后,细胞活力与DMSO组相比,不同剂量O6处理组细胞活力分别为DMSO组的(84.5±7.6)%和(76.2±7.1)%(24 h)、(75.7±7.3)%和(69.6±6.2)%(48 h)、(70.2±6.4)%和(61.3±5.5)%(72 h)。处理24 h后,O6组Annexin V阳性细胞分别为(8.86±1.78)%(P<0.05)和(19.36±4.20)%(P<0.01),而DMSO组为(3.35±0.73)%,PI阳性则分别为(3.82±0.53)%(P<0.05)、(10.14±2.65)%(P<0.01)和(1.34±0.33)%。Brdu实验显示,O6将GH3细胞阻滞在G1期,分别为(50.4±4.1)%和(59.4±4.7)%(P<0.05),DMSO组为(45.7±3.7)%。同时,蛋白印迹实验显示,O6处理后p21和p27呈现升高趋势(P<0.05)。结论CDK2、p21和p27表达与生长激素腺瘤侵袭密切相关,其抑制剂O6-己基甲基鸟嘌呤诱导GH3细胞凋亡,抑制细胞增殖。

天然PAK1抑制剂抵御SARS-CoV-2感染的潜力

PAK1是主要的“致病”激酶,其异常激活导致人类出现多种疾病,包括衰老、癌症、炎症、疟疾和新型冠状病毒肺炎(Corona virus disease 2019,COVID-19)等大流行性病毒感染。特定的疫苗是治疗病毒感染最有效的方法,但需要长时间的准备及临床试验。在缺乏针对SARS-CoV-2的特异性抗病毒药的情况下,天然的PAK1抑制剂或可成为抵御SARS-CoV-2感染/治疗COVID-19的潜在靶标药物。

PAK1 R203Q突变在致异位ACTH综合征的胸腺神经内分泌肿瘤细胞迁移中的作用及机制

目的探讨p21G激活激酶1(PAK1)R203Q突变在致异位ACTH综合征的胸腺神经内分泌肿瘤细胞迁移中的作用及机制.方法采用SIFT和PolyphenG2软件预测PAK1R203Q突变对其蛋白功能的影响;采用NCBI、ClustalW2等比对该突变位点在不同物种间的同源性;将细胞分为3组:阴性对照组(NC组)、PAK1野生型质粒组(WT组)和PAK1R203Q突变型质粒组(MUT组);采用细胞划痕实验检测3组细胞的迁移能力;采用Western blot检测PAK1下游信号通路蛋白pGJNK、JNK、pGERK及ERK的表达水平.结果生物学信息分析和预测PAK1R203Q突变位点对PAK1蛋白质结构和功能是有害的.PAK1R203Q突变位点位于PIX结合的位置,PAK1R203Q突变位点在物种间是保守的.与NC组比较,WT组的转染细胞迁移能力增强,而MUT组的转染细胞迁移能力最强(P<0.05).与NC组、WT组比较,MUT组细胞中pGJNK表达水平升高(P<0.05).结论PAK1R203Q突变可促进致异位ACTH综合征的胸腺神经内分泌肿瘤的细胞迁移,并可能主要是通过激活下游JNK信号通路而发挥作用.

膀胱癌组织中PAK2表达及对癌细胞活性的影响

目的探讨p21激活激酶(PAK)2在膀胱癌组织中的表达及对癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法行手术治疗的膀胱癌患者108例,收集膀胱癌组织标本108份,癌旁正常膀胱上皮组织标本24份;免疫组化检测标本组织中PAK2表达情况,并分析其与临床病理指标的关系;RT-PCR和Western印迹检测人膀胱癌细胞系BIU-87、人正常膀胱上皮细胞系SV-HUC-1中PAK2 mRNA和蛋白表达情况;通过慢病毒载体转染技术在体外构建PAK2基因沉默的膀胱癌细胞株(PAK2基因沉默组)和含无义序列的慢病毒载体(对照组),检测两组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果膀胱癌组织中PAK2阳性表达率(51.85%)明显高于癌旁正常膀胱上皮组织(8.33%,P<0.05,P<0.01,P<0.001);不同肿瘤直径、病理分级、病理分期、淋巴结转移情况的膀胱癌患者中PAK2阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。BIU-87细胞中PAK2 mRNA和蛋白相对表达量明显高于SV-HUC-1细胞(P<0.05)。随着转染时间的延长,对照组和PAK2基因沉默组细胞增殖水平均逐渐增加,转染48 h、72 h后PAK2基因沉默组细胞增殖情况明显低于对照组(P<0.01)。Transwell细胞迁移和侵袭实验显示,PAK2基因沉默组迁移和侵袭细胞数明显低于对照组(P<0.01)。结论膀胱癌组织中存在PAK2高表达,且与病理指标明显相关;沉默PAK2基因可有效降低膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。