胃癌组织中KAI1/CD82、p27和p53的表达水平及其临床意义

目的研究胃癌组织中KAI1/CD82、p27、p53蛋白的表达水平及其临床意义。方法收集中南大学湘雅医学院附属海口医院胃肠外科2020年6月至2021年6月期间接受胃癌切除术治疗的43例胃癌患者标本,将标本分为43例胃癌组、43例配对的癌旁组(距癌2 cm)和43例配对的正常组(距癌5 cm以上),运用免疫印迹(Western blot)方法检测并比较三组组织中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平,分析胃癌组织中KAI1/CD82、p27、p53的表达水平与临床病理参数的关系,采用Pearson相关分析法分析其与胃癌的临床病理特征的关系。结果胃癌组中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平明显低于癌旁组和正常组,且癌旁组明显低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);KAI1/CD82、p27、p53蛋白的阳性表达率与肿瘤组织的分化程度、临床分期和淋巴结是否转移有关(P<0.05),而与年龄、性别无关(P>0.05);经Pearson相关分析结果显示,胃癌组织中KAI1/CD82与p27蛋白和p53蛋白的表达均呈正相关(r=0.586、0.426,P<0.05)。结论胃癌组织中的KAI1/CD82、p27、p53蛋白表达水平明显降低,联合检测KAI1/CD82、p27、p53可能成为胃癌诊断及预后评估的新的分子标记物。

禽白血病病毒p27抗原ELISA检测试剂盒的比较与评估

为了更好地进行禽白血病监测与净化,研究使用由蛋清、细胞培养物、胎粪等多种样品组成的样品盘对7种禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)p27抗原ELISA检测试剂盒(国产试剂盒DA、DB、DC,进口试剂盒IA、IB、IC、IDEXX)进行比较。结果显示:从分析特性上看,试剂盒分析特异性均较好,未观察到与其他常见禽源病毒的交叉反应;与IDEXX相比,DA、IA的分析敏感性较高,DB、IC其次,DC、IB较低,对于ALV不同亚群,各种试剂盒分析敏感性差异可达2~3个稀释度;从诊断特性上看,与IDEXX相比,DB、DC和IC的诊断敏感性和诊断特异性均高于90%;DA、IA和IB与IDEXX的诊断敏感性和诊断特异性均高于80%;各试剂盒对于不同类型样品(DF-1细胞培养物、蛋清、胎粪)的诊断敏感性和诊断特异性存在差异;从重复性上看,DA和IA的批内变异系数均在15%以内。综上所述,与IDEXX相比,当前国产p27抗原ELISA检测试剂盒DA和DB、进口p27抗原ELISA检测试剂盒IA和IC的各项性能可满足禽白血病净化各阶段对不同类型样品的检测需求。

IgA肾病患者肾小球系膜组织P21、P27、PCNA表达与肾病预后不良的关系分析

目的:探讨免疫球蛋白A(IgA)肾病患者肾小球系膜组织P21、P27、增殖细胞核抗原(PCNA)表达与肾脏预后不良的关系。方法:选取2017年4月至2019年8月孝感市中心医院收治的145例IgA肾病患者作为研究对象,采用免疫组化法检测肾小球系膜组织P21、P27、PCNA的表达。所有患者均接受跟踪随访24个月,统计预后情况,对比不同预后患者肾小球系膜组织P21、P27、PCNA的表达,并采用Logistic回归分析法分析IgA肾病患者预后不良的影响因素。结果:IgA肾病患者肾小球系膜组织P21、P27、PCNA阳性细胞表达率分别为(38.69±6.83)%、(55.94±8.08)%、(33.47±5.72)%;IgA肾病患者预后不良发生率为17.24%,预后不良患者肾小球系膜组织P21、PCNA阳性细胞表达率均高于预后良好组(P<0.05),P27阳性细胞表达率低于预后良好组(P<0.05);经Logistic多元回归分析显示,舒张压升高、24 h蛋白尿增多、系膜细胞增生、节段性肾小球硬化、肾小管萎缩/间质纤维化、新月体与P21、PCNA阳性表达率升高、P27阳性细胞表达率降低均是影响IgA肾病患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论:IgA肾病肾小球系膜组织存在P21、P27、PCNA阳性表达,IgA肾病预后不良患者肾小球系膜组织P21、PCNA阳性细胞表达率均高于预后良好者,P27蛋白阳性细胞表达率低于预后良好者,且均为IgA肾病患者预后不良的危险因素。

CYP27A1对肝细胞癌预后的影响及生物学作用

目的分析细胞色素P450家族27亚家族A成员1(CYP27A1)对肝细胞癌(HCC)预后的影响及生物学作用,并初步探讨其影响HCC生长的分子机制。方法基于癌症基因数据库(TCGA)分析CYP27A1在HCC中的表达情况及其与HCC患者预后的关系;基于CYP27A1表达量中位值,将样本分为CYP27A1高表达组(n=170)与CYP27A1低表达组(n=170),利用基因集富集分析(GSEA)分别对两组进行基因集富集分析;免疫荧光染色检测及数据库查找CYP27A1蛋白亚细胞定位;构建过表达CYP27A1质粒,转染HCC细胞MHCC-97H和HCCLM3,设置阴性对照组(转染空载质粒)与CYP27A1过表达组(转染过表达CYP27A1重组质粒)。采用CCK-8法、流式细胞仪、活性氧(ROS)荧光探针等检测过表达CYP27A1对HCC细胞活力、凋亡及ROS生成的影响;结合生物信息学分析CYP27A1与ROS生成相关基因及HCC增殖相关基因表达的相关性。结果与正常肝组织比较,HCC组织中CYP27A1 mRNA表达量明显降低(P<0.01)。CYP27A1表达与HCC患者性别、T分期、肿瘤分级和肿瘤分期有关(P<0.05)。CYP27A1低表达组总生存率明显低于高表达组(P<0.01)。GSEA富集分析结果显示,CYP27A1低表达组HCC“干性”亚类和“增殖”亚类基因集水平升高。在MHCC-97H和HCCLM3细胞中,CYP27A1主要定位于细胞核;在HepG2细胞中,CYP27A1主要定位于线粒体。与阴性对照组比较,过表达CYP27A1后,HCC细胞活力下降(P<0.01)、ROS水平降低(P<0.05),而细胞凋亡水平无明显改变(P>0.05)。CYP27A1与抑制ROS生成相关基因表达呈正相关(P<0.05),抑制ROS生成相关基因与HCC增殖相关基因表达呈负相关(P<0.05)。结论CYP27A1在HCC中呈低表达,下调CYP27A1可能通过促进ROS生成促进HCC恶性生长。

SPY1和p27^(kip1)在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

目的:探讨SPY1(Speedy A1)和p27^(kip1)(cyclin-dependent kinase inhibitor 1B,p27)在子宫内膜癌中的表达情况及其临床意义。方法:采用生物医学信息数据库分析子宫内膜癌中SPY1、p27^(kip1) mRNA表达水平;采用免疫组织化学染色法及蛋白质印迹法检测子宫内膜癌及正常子宫内膜组织中SPY1、p27^(kip1)蛋白的表达水平,并分析其表达与患者临床病理参数、激素受体、癌症基因组图谱分子分型的关系,以及两者之间的相关性。通过Kaplan-Meier法绘制生存曲线,应用Cox比例风险模型分析影响子宫内膜癌患者的预后因素。结果:SPY1在子宫内膜癌组织中的蛋白质表达水平显著高于不典型增生的子宫内膜及正常子宫内膜组织(P=0.009),p27kip1在子宫内膜癌组织中的蛋白质表达水平显著低于不典型增生的子宫内膜及正常子宫内膜组织(P=0.001);SPY1蛋白表达与肿瘤病理分级(P=0.023)、国际妇产科协会(The International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)癌分期(P=0.003),肌层浸润深度(P=0.010)及淋巴结转移(P<0.001)有关,p27kip1蛋白表达与肿瘤病理分级(P=0.001)、FIGO癌分期(P=0.001)及淋巴结转移(P<0.001)有关;SPY1与p27kip1表达呈负相关(r=−0.563,P<0.001);Kaplan-Meier预后分析表明SPY1高表达患者生存率低于低表达患者(P<0.05),p27kip1高表达患者的生存率高于低表达患者(P<0.05)。Cox单因素及多因素分析表明FIGO癌分期(P=0.023)、病理分级(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)及p27kip1表达(P<0.001)可作为子宫内膜癌患者的独立预后指标。结论:子宫内膜癌组织中SPY1蛋白呈高表达,p27kip1蛋白呈低表达,且两者之间呈负相关,可用于评估子宫内膜癌的发生和发展。

长链非编码RNA BC002811对胃癌细胞活性、细胞间质转化及p27kip1活化的影响

目的:探究长链非编码RNA(LncRNA) BC002811对胃癌细胞活性、细胞间质转化及p27kip1活化的影响。方法 :收集本院原发性胃癌手术切除样本50例,采用TaqMan RNA试剂盒检测BC002811的相对表达量。将胃癌细胞株HGC-27细胞培养及转染后分为HGC-27组(无转染的HGC-27细胞)、BC002811-NC组(HGC-27细胞+BC002811 siRNA-NC)、BC002811组(HGC-27细胞+BC002811 siRNA);HGC-27组、空载体组(HGC-27细胞+p27kip1空质粒)、p27kip1组(HGC-27细胞+p27kip1质粒);HGC-27组、BC002811+空载体组(HGC-27细胞转染BC002811+p27kip1空质粒)、BC002811+p27kip1组(HGC-27细胞转染BC002811+p27kip1)。Transwell分别检测各组HGC-27细胞侵袭、转移能力,采用免疫印迹检测HGC-27细胞vimentin、E-cadherin蛋白表达,采用qRT-PCR检测HGC-27细胞BC002811、p27kip1表达。结果 :与胃癌组织比较,癌旁组织BC002811的表达显著降低。与HGC-27组比较,BC002811组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高,HGC-27组与BC002811-NC组差异无统计学意义。与HGC-27组比较,p27kip1组HGC-27细胞的侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高,HGC-27组与空载体组差异无统计学意义。与HGC-27组比较,BC002811+空载体组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高;与BC002811+空载体组比较,BC002811+p27kip1组HGC-27细胞侵袭、迁移能力及E-cadherin表达水平显著降低,vimentin表达水平升高。Pearson相关分析结果显示,在HGC-27细胞侵袭、迁移中,BC002811与vimentin水平呈负相关性,与E-cadherin水平呈正相关;vimentin与E-cadherin水平呈负相关性。结论 :在胃癌细胞中BC002811-siRNA激活p27kip1水平、抑制胃癌细胞的迁移及侵袭,其作用机制可能与调控胃癌细胞间质转化蛋白表达相关。

构建携带人GFAP启动子和p27基因的重组腺病毒载体及其转染对星形胶质细胞增殖的影响

目的:构建携带人GFAP启动子和p27基因的重组腺病毒载体并进行鉴定,研究其转染星形胶质细胞后对细胞生长增殖的影响。方法:对实验室原有的pGFAP-IRES2-EGFP-p27质粒进行转化、扩增、抽提、酶切后进行琼脂糖凝胶电泳鉴定和测序;通过设计引物,进行PCR扩增后分别获取GFAP启动子和p27基因片段,依次交换入线性化表达载体GV269和p DC315-GFAP-EGFP载体,最终构建pDC315-GFAP-p27-EGFP;将其转染HEK293细胞包装成重组病毒颗粒,经在HEK293细胞反复扩增数代后,进行纯化及滴度检测;转染星形胶质细胞后观察细胞生长和荧光表达情况;检测转染后星形胶质细胞细胞周期和凋亡比例、p27的表达情况。结果:经酶切鉴定和测序,成功鉴定真核表达载体pGFAP-IRES2-EGFP-p27;经PCR鉴定和测序,成功构建重组腺病毒过表达载体pDC315-GFAP-p27-EGFP;经包装后,Ad-GFAP-p27-EGFP可见EGFP表达和细胞致病效应,而且能够特异性地在星形胶质细胞中表达绿色荧光蛋白;经流式细胞仪分析,转染星形胶质细胞72 h后,与对照组相比,转染组处于S期的细胞比例下降,G1和G2期的细胞比例增高,凋亡比例增高(P<0.05);转染后第5天,星形胶质细胞中p27蛋白表达水平较对照组有明显升高(P<0.05)。结论:利用腺病毒包装系统AdMax成功构建了携带人GFAP启动子和p27基因的重组腺病毒过表达载体,其可以特异性转染星形胶质细胞过表达p27,对星形胶质细胞的生长增殖有明显抑制作用。

SGK通过下调抑癌基因p27蛋白促进小鼠肿瘤生长

肿瘤已成为老年动物常见疾病。多种恶性肿瘤高表达血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK),但其对肿瘤生长的作用机理还未完全解析。为了探究SGK对肿瘤生长的影响及作用机制,本研究利用人乳腺癌细胞系(MDA-MB-231),通过小干扰RNA(siRNA)敲低SGK,使用二甲氧唑黄(XTT)、溴脱氧尿苷(Brdu)和软琼脂克隆形成试验检测SGK对MDA-MB-231细胞增殖和转化的影响;利用过表达系统构建小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3/HER2/SGK和NIH3T3/HER2/SGK/p27,通过XTT、Brdu、流式细胞术和软琼脂克隆形成试验探究SGK是否通过抑癌基因p27蛋白调控肿瘤细胞的增殖转化和细胞周期;使用蛋白免疫印迹(WB)和免疫荧光(IF)技术分析SGK调控p27的机制;利用裸鼠构建体内肿瘤模型,通过计算形成肿瘤的体积和免疫组织化学(IHC)技术分析SGK调控肿瘤生长的机制。结果显示,敲低SGK能够显著下调肿瘤细胞的增殖和转化(P<0.05);过表达p27能够明显降低肿瘤细胞的增殖和转化(P<0.05),且G0-G1期的细胞数量增多,而过表达SGK能够逆转这些现象;此外,过表达SGK能够诱导p27定位于细胞质。在小鼠肿瘤模型中也显示,SGK能够降低p27蛋白水平,促进肿瘤生长。结果表明,无论在体外还是体内,SGK均能够通过抑制p27促进肿瘤细胞生长,提示SGK可以作为动物肿瘤疾病诊断和预后的指标,是肿瘤相关药物研发的潜在靶点。

Cyclin D1、P27在小鼠ARDS肺纤维化中的表达及意义

目的 探讨细胞周期相关蛋白Cyclin D1、P27在脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤及肺纤维化中的动态表达规律及作用。方法 56只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为Control组、LPS组,每组28只,LPS组小鼠腹腔注射LPS(5 mg/kg, 0.2 mL/kg),Control组腹腔注射等量生理盐水,连续给药5 d。每组按时点分为4个亚组(T1、T3、T7、T14),分别于给药后1、3、7、14 d从两组中随机抽取7只,取肺组织,苏木精-伊红(HE)染色后在倒置显微镜下观察肺组织病理学改变;检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量及Ⅰ型胶原水平;采用Western blot及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测肺组织中Cyclin D1、P27蛋白及mRNA表达水平;并采用Spearman分析对Cyclin D1、P27 mRNA表达水平与小鼠肺纤维化程度进行相关分析。结果 HE染色可见,与Control组比较,LPS组第3、7、14 d肺部炎症逐步加重,伴弥漫性炎性细胞浸润及出血,肺部结构破坏明显,肺纤维化程度逐渐加重;第3、7、14 d肺组织纤维化评分明显增加(均P<0.01);LPS组第3、7、14 d HYP含量及Ⅰ型胶原水平较Control组显著增加(均P<0.01)。与Control组比较,LPS组3、7、14 d肺组织中Cyclin D1蛋白及mRNA的表达水平明显升高,而P27蛋白及mRNA的表达明显降低(均P<0.05);LPS组Cyclin D1 mRNA表达水平与肺纤维化程度呈正相关(r=0.930,P<0.01),P27 mRNA表达与纤维化评分呈负相关(r=-0.881,P<0.01)。结论 脂多糖致小鼠急性肺损伤过程中细胞周期相关蛋白Cyclin D1、P27异常表达,其表达水平与肺纤维化程度相关。

过表达P27Kip1对胃癌细胞P27蛋白及其磷酸化产物表达分布的影响

目的:研究胃癌BGC823细胞系中过表达P27蛋白时,P27及其磷酸化蛋白在细胞中的分布。方法:将外源性P27^(kipl)基因转染人胃癌细胞系BGC823,应用流式细胞分析术检测转染组和对照组的细胞周期和细胞凋亡,采用Western blot和免疫荧光方法,检测P27蛋白和磷酸化P27蛋白(p-P27)在二组细胞中的表达和分布。结果:转染组细胞G_1期细胞数较对照组明显增加(62.783%vs.41.933%,P<0.001);转染组细胞凋亡指数(AI)显著高于对照组(26.3 vs.3.6,P<0.001)。转染组P27蛋白和p-P27表达均高于对照组。对照组P27蛋白主要在胞核内表达,p-P27主要在胞浆内表达;转染组P27蛋白主要在胞核内分布,p-P27蛋白在胞浆、胞核内均有分布表达,但主要分布在胞核内。结论:P27蛋白过表达能够使细胞周期停滞于G_1期,诱导细胞凋亡。推测胞核内P27蛋白水平和p-P27的核浆比值可能是评价肿瘤增殖活性的重要指标。

skp2及p27Kip1蛋白与晚期胃癌患者临床预后的关系

目的探讨细胞S期激酶相关蛋白(skp)2及p27Kip1蛋白与晚期胃癌患者临床预后的关系。方法选取2013年5月至2015年1月开滦点医院林西医院收治130例晚期胃癌患者,免疫组化法检测skp2和p27Kip1蛋白表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨skp2和p27Kip1蛋白表达与晚期胃癌临床预后的关系。结果晚期胃癌组织skp2和p27Kip1阳性表达在不同卡氏功能状态(KPS)评分、肿瘤直径、手术、腹腔淋巴结转移、肝转移、临床分期及组织学分化患者中差异存在统计学意义(P<0.05),而性别、年龄、化疗、放疗及腹水等指标差异未见统计学意义(P>0.05)。年龄、KPS评分、肿瘤直径、手术、化疗、放疗、腹腔淋巴结转移、肝转移、腹水、临床分期、组织学分级、skp2蛋白表达和p27Kip1蛋白表达水平是晚期胃癌患者5年存活的影响因素。Cox回归分析结果显示,KPS评分(≤60分)、组织学分级(低分化)、腹腔淋巴结转移、skp2蛋白阳性表达和p27Kip1蛋白阴性表达是晚期胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论晚期胃癌组织中skp2蛋白阳性表达和p27Kip1蛋白阴性表达是晚期胃癌临床预后差的独立危险因素,可作为晚期胃癌治疗方案、预后评估等方面的有效指标。

三七总皂苷调控SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨三七总皂苷(PNS)通过SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用。方法首先将PASMCs随机分为正常(Control)组和三七总皂苷(PNS)组、野百合碱(MCT)组和野百合碱+三七总皂苷(MCT+PNS)组,CCK8检测PNS对正常细胞的安全浓度,进一步检测PNS抑制增殖的最适浓度;为研究作用机制将PASMCs分为Control组、溶剂(DMSO组)组、MCT组、MCT+PNS组、MCT+PNS+SIRT1抑制剂(MCT+PNS+EX-527)组。造模结束,Edu检测细胞增殖;免疫荧光检测SIRT1、FOXO3a表达;qPCR检测细胞SIRT1、FOXO3a、p27、PCNA的表达。结果CCK8显示:0~400 mg·L^(-1)的PNS对正常细胞无毒(P>0.05),100 mg·L^(-1)的PNS可显著抑制MCT诱导的细胞增殖(P<0.01);Edu显示:MCT组较Control组增殖增多;MCT+PNS组较MCT组增殖减少;MCT+PNS+EX-527组较MCT+PNS组增殖增多。免疫荧光和qPCR显示:MCT组较Control组,SIRT1、FOXO3a、p27表达降低,PCNA表达增高;较MCT组,MCT+PNS组SIRT1、FOXO3a、p27表达增多,PCNA表达降低;较MCT+PNS组,MCT+PNS+EX-527组SIRT1、FOXO3a、p27表达降低,PCNA表达增高。结论PNS可通过SIRT1/FOXO3a/p27通路抑制大鼠PASMCs增殖。

禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质研制

为了临床检验中p27蛋白含量测定结果的量值溯源,制备禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质。建立同位素稀释质谱法对纯品禽白血病p27蛋白含量进行测定,结果表明,该方法准确、可靠,可以作为p27蛋白标准物质的定值方法。同时结合多家实验室定值,最终定值结果为(1.46±0.13)mg/mL。该标准物质均匀性良好,在–20℃、4℃和室温环境下可以稳定7天,在–70℃环境中可以保存6个月。禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质的研制对禽白血病检测的质量控制、不同检测方法间的评价具有很好的实用价值。

p27^(Kip1)的生物学功能及其在肿瘤中作用的研究进展

p27^(Kip1)的经典生物学功能是作为细胞周期的关键调控因子,通过结合并抑制细胞周期素-细胞周期素依赖性激酶复合物,控制细胞周期进程。近年来研究发现,p27^(Kip1)参与了许多其它细胞过程的调控,包括转录、细胞迁移与运动及自噬等。研究显示,在儿童多发性内分泌肿瘤、白血病、乳腺癌及儿童神经母细胞瘤中存在p27^(Kip1)编码基因CDKN1B突变或多态性;作为肿瘤抑制因子,儿童急性髓细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤及乳腺癌等肿瘤中p27^(Kip1)表达水平明显下降,并与肿瘤发生、发展、预后相关;而在儿童急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、结肠癌、肺癌等肿瘤中,异常定位于胞浆的p27^(Kip1)则具有促癌功能,促进肿瘤的侵袭和转移。本文综述了p27^(Kip1)的多种生物学功能,并重点阐述其在肿瘤中的重要作用及机制研究进展。

Skp2及p27kip1在原发性胃癌组织的表达及对胃癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探究S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)及细胞周期素依赖的蛋白激酶抑制物(Cyclin dependent protein kinase inhibitor,p27kip1)在原发性胃癌组织的表达及si-Skp2对胃癌细胞增殖、凋亡和p27Kip1表达的影响。方法组织学实验:临床入组2018年12月~2021年12月唐山市开滦总医院林西医院归档的资料齐全完整的63例原发性胃癌患者,获得患者的癌组织和癌旁组织,通过qPCR对两组患者胃癌组织和胃癌旁组织Skp2和p27Kip1mRNA表达水平进行检测。细胞学实验,将人胃癌细胞SGC-7901分为对照组和si-Skp2组,对照组转染NC质粒,si-Skp2组转染si-Skp2质粒,CCK8法检测各组细胞24 h、48 h和72 h增殖能力,流式细胞分别分析两组细胞细胞存活、早期凋亡和晚期凋亡,Western blot检测两组细胞Skp2和p27kip1蛋白表达水平。结果组织学实验表明,相比于癌旁组织,癌组织中Skp2mRNA表达显著上升,p27Kip1表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。细胞学实验表明,与对照组相比,si-Skp2组细胞24 h、48 h和72 h细胞增殖能力显著降低;细胞存活显著降低、细胞晚期凋亡显著增加(P<0.01),细胞早期凋亡没有显著的统计学差异(P>0.05);Western blot实验表明si-Skp2组细胞Skp2表达显著降低,p27Kip1蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论原发性胃癌组织中Skp2表达显著高表达,p27Kip1显著低表达,si-Skp2具有显著抑制胃癌细胞增殖,促进细胞晚期凋亡的作用,其机制与p27Kip1的调控相关。

CyclinD1、p27在非小细胞肺癌中的表达及与其临床病理特征及预后的关系

目的探讨细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p27在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与其临床病理特征、术后复发的关系。方法选取92例NSCLC患者,采用免疫组织化学SP法检测癌组织和癌旁组织中的CyclinD1、p27水平。结果NSCLC癌组织中CyclinD1阳性率[72.83.%(67/92)]较癌旁组织[23.91%(22/92)]高,p27阳性率[16.30%(15/92)]较癌旁组织[60.87%(56/92)]低(P<0.05);低分化、Ⅲ期、有LNM的NSCLC患者CyclinD1阳性率[96.00%(24/25)、93.88%(46/49)、97.44%(38/39)]较中高分化[64.18%(43/67)]、Ⅰ~Ⅱ期[48.84%(21/43)]、无LNM[54.72%(29/53)]高(P<0.05);中高分化、Ⅰ~Ⅱ期、无LNM的NSCLC患者p27阳性率[22.39%(15/67)、30.23%(13/43)、24.53%(13/53)]较低分化[0.00%(0/25)]、Ⅲ期[4.08%(2/49)]、有LNM[5.13%(2/39)]高(P<0.05);复发NSCLC患者癌组织中CyclinD1阳性率[89.47%(51/57)]较未复发患者[45.71%(16/35)]高,p27阳性率[5.26%(3/57)]较未复发患者[34.29%(12/35)]低(P<0.05)。结论CyclinD1在NSCLC中的阳性率高,p27在NSCLC中的阳性率低,且二者与NSCLC分化程度、疾病分期等临床病理特征和术后复发存在明显关联性,临床可将CyclinD1、p27指标作为评估NSCLC进展和预后的重要指标进行检测,为临床治疗提供参考。

PI3K信号通路对胃癌细胞P27磷酸化蛋白分布表达的影响

目的:研究PI3K信号通路对胃癌BGC-823细胞中P27与磷酸化P27(p-P27)蛋白表达分布的影响。方法:LY294002处理BGC-823细胞,流式细胞术测定处理前后两组细胞周期分布。Western blotting测定两组细胞总蛋白、胞浆蛋白、核蛋白中P27与p-P27(Thr187、Thr157及Ser10)蛋白含量及分布特点。结果:处理后G_1期细胞数明显增加(83.9%vs.67.6%,P<0.01)P27在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋白中表达均显著增加(P<0.01,P<0.01,P<0.01);p-P27(Ser10)在总蛋白、胞浆蛋白和核蛋白中表达均显著下降(P<0.01,P<0.01,P<0.01);p-P27(Thr157)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均显著下降(P<0.01,P<0.01),在核蛋白中下降不明显(P=0.482);p-P27(Thr187)在总蛋白、胞浆蛋白中表达均下降,在核蛋白中表达增高,均无显著性差异(P=0.254,P=0.70,P=0.223)。结论:阻断PI3K通路可增加胃癌细胞P27蛋白表达,降低p-P27蛋白表达,改变P27和p-P27蛋白的核浆分布,可以使细胞周期停滞于G_1期,诱导细胞凋亡。

成骨性肿瘤中p27基因mRNA与蛋白的表达及其意义

目的 :探讨 p27mRNA与蛋白在成骨性肿瘤中的表达状况 ,了解其与肿瘤组织学类型、分化程度及生物学行为的关系。方法 :采用免疫组化和非放射性核酸原位杂交技术检测成骨性肿瘤中 p27蛋白和mRNA的表达状况。结果 :骨瘤、骨母细胞瘤中 p27蛋白高表达 ,主要定位于胞核 (85.7 %、75 % ) ,骨肉瘤中低表达 ,胞核表达极低(4.7 % ) ,两者间差异显著 (P<0.01)。p27蛋白在骨肉瘤中的表达与肿瘤的浸润、复发和转移有关。原位杂交显示良、恶性成骨性肿瘤的 p27mRNA表达阳性率及表达强度无显著性差异 (P>0.05)。且与骨肉瘤的组织学类型、分级及生物学行为无关。结论 :p27蛋白表达在成骨性肿瘤中的改变具有特异性 ,可作为骨肉瘤的诊断和评估预后的指标。骨肉瘤中p27蛋白表达低下可能是由于转录后特异性的蛋白酶介导的降解所致。

240Hz、2304分区 泰坦军团P27A6S电竞显示器

近两年,采用Mini LED背光的显示器越来越多。其相比OLED来说具有较高的性价比,同时色彩表现也不输OLED,成为很多中高端显示器首选的一种背光。当然,Mini LED显示器也有高低端之分,一些主打低端走量的Mini LED显示器往往分区数量比较少,通常不到500个分区,而中高端的Mini LED显示器分区数量更多,有的能达到2000多个分区。所以,分区数量的多少一定程度上能成为判断一款Mini LED显示器优劣的标准。

S相激酶相关蛋白和P27kip1蛋白表达与胃癌临床病理特征的相关性研究

在本次研究中主要分析细胞5相激酶相关蛋白以及P27kip1与胃癌的临床关系。方法 本次研究中针对67例临床诊断为胃癌的患者,利用免疫组化S-P法检测Skp2和P27kip1蛋白的表达情况,结果 在胃癌患者中Skp2蛋白表达率达33.33%,而对于正常患者来说,胃组织Skp2蛋白表达率为10.73%,两组数据具有明显统计差异。除此之外,根据研究发现Skp2蛋白阳性表达率与患者的肿瘤大小、年龄,性别以及病灶位置无明显关系,但与患者的肿瘤分化程度具有紧密联系。Skp2与P27kip1的表达是呈现负相关关系的。结论 临床上Skp2异常表达会从一定程度上加速细胞周期转化,以促进胃癌症状发生,在胃癌发生中,泛素-蛋白酶体途径发挥重要作用。