骨巨细胞瘤组织中Bax、p27^(kipl)的表达及意义

采用免疫组化法检测60例骨巨细胞瘤(GCTB)标本中Bax及p27^(kip1)蛋白。不同病理分级的GCTB中Bax和p27^(kip1)的阳性表达率相比,P<0.05;不同预后的GCTB中p27^(kip1)阳性表达率相比,P<0.05。认为Bax及p27^(kip1)的表达与GCTB的病理分级相关,但Bax不能作为判断GCTB预后的指标,而p27^(kip1)则可作为判断预后的指标之一。

卵巢上皮性肿瘤组织中p27^(kipl)和cyclin E的表达及意义

目的探讨p27^(kip1)、细胞周期素(cydin)E在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与卵巢癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性肿瘤组织中的p27^(kip1)、cyclin E。结果p27^(kip1)蛋白在卵巢上皮性癌和交界性肿瘤中的阳性表达率分别为37.5%、42.11%,显著低于良性肿瘤的78.05%(P均<0.05);cyclin E在卵巢上皮性癌及交界性肿瘤、良性肿瘤的阳性表达率分别为72.22%、47.37%,29.27%,三者相比,P均<0.01。p27^(kip1)、cyclin E在卵巢上皮性癌中的表达与组织分化程度、临床分期有关(P均<0.05)。结论卵巢上皮性癌组织中p27^(kip1)表达下降,cyclin E表达上调,二者在卵巢癌的发生发展过程中发挥重要作用。

p27^(Kip1)的生物学功能及其在肿瘤中作用的研究进展

p27^(Kip1)的经典生物学功能是作为细胞周期的关键调控因子,通过结合并抑制细胞周期素-细胞周期素依赖性激酶复合物,控制细胞周期进程。近年来研究发现,p27^(Kip1)参与了许多其它细胞过程的调控,包括转录、细胞迁移与运动及自噬等。研究显示,在儿童多发性内分泌肿瘤、白血病、乳腺癌及儿童神经母细胞瘤中存在p27^(Kip1)编码基因CDKN1B突变或多态性;作为肿瘤抑制因子,儿童急性髓细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤及乳腺癌等肿瘤中p27^(Kip1)表达水平明显下降,并与肿瘤发生、发展、预后相关;而在儿童急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、结肠癌、肺癌等肿瘤中,异常定位于胞浆的p27^(Kip1)则具有促癌功能,促进肿瘤的侵袭和转移。本文综述了p27^(Kip1)的多种生物学功能,并重点阐述其在肿瘤中的重要作用及机制研究进展。

腺病毒介导的p27kip1基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响

背景：近年来胃癌基因治疗的研究取得了一定的进展，但总体疗效尚不尽人意，目前正积极寻求组织特异性基因作为胃癌基因治疗的突破点。目的：以腺病毒为载体，研究p27kipl基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响。方法：将成功构建的携带人p27kipl基因的重组腺病毒载体Ad-p27kipl和LacZ重组腺病毒Ad-LacZ转染胃癌细胞系SGC-7901，并观察细胞形态的变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，^3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入实验测定细胞DNA合成。结果：Ad-p27kip1转染SGC-7901细胞后，细胞变圆、呈葡萄串样聚集以致脱落，G0／G1期细胞比例增加，8期、G2／M期细胞比例降低，并有凋亡发生，^3H-TdR掺入量亦显著降低。结论：腺病毒介导的p27kipl基因能使SGC-7901细胞产生G0／G1期阻滞，并能诱导细胞凋亡，抑制DNA合成，表明该基因疗法能有效抑制体外胃癌细胞的生长。

腺病毒介导的人p27kip1基因转染对球囊损伤后兔颈动脉新生内膜增生的抑制作用

目的 研究腺病毒介导的p27kip1基因及其蛋白产物高表达对球囊损伤后兔颈动脉新生内膜增生的抑制作用。方法 建立兔颈动脉球囊损伤模型,将LacZ重组腺病毒（AdLacZ）和人p27kipl重组腺病毒（Adhp27kipl）在体内分别转染损伤动脉节段,以Western blot、x-gal染色、HE染色、兔疫组化及计算机图像处理方法观察转染动脉节段中外源性p27kipl蛋白表达及其对新生内膜增生的影响。结果 与AdLacZ转染组及未转染组比较,Adhp27kip1转染的动脉节段内p27kip1蛋白呈高表达,表达高峰在7～14 d,持续4周以上;转染4周后未转染组、AdLacZ转染组及Adhp27kip1转染组的新生内膜面积分别为1.106mm2、0.988mm2及0.278mm2;管腔狭窄率分别为87.07％、65.40％及32.14％。结论 外源性p27kip1基因及其蛋白产物在损伤动脉节段内高表达可显著抑制新生内膜增生及管腔狭窄。

重组腺病毒介导的人p27kip1基因高表达对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响

目的 探讨重组腺病毒介导的p2 7kip1基因及其蛋白产物高表达对血管平滑肌细胞 (VSMCs)迁移的抑制作用。方法 将含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Adhp2 7kip1)及含 β 半乳糖苷酶基因的重组腺病毒 (AdLacZ)在体外转染原代大鼠主动脉VSMCs,用Westernblot及Boyden趋化小室检测外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达及对VSM Cs迁移的影响。结果 转染后 2 4h ,Adhp2 7kip1转染的VSMCs内p2 7kip1蛋白高表达 ,而AdLacZ转染的VSMCs内仅显示极低水平的内源性p2 7kip1蛋白表达 ;Boyden趋化小室检测显示未转染的VSMCs、AdLacZ及Adhp2 7kip1转染的VSMCs血清诱导后的迁移细胞数分别为 139± 2 6、10 6± 16及 6 8± 14。结论 外源性p2

5-Aza-CdR对胃癌细胞系BGC823生长及p27kip1基因异常甲基化的影响

选择浓度为1×10-6mol/L的5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理体外培养的BGC823细胞后,用AO染色检测药物处理后细胞增殖情况;MSP法检测用药前后细胞中Apaf-1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用药前后细胞中p27kip1的mRNA表达的变化。结果显示,药物作用细胞增殖明显受到抑制,p27kip1基因的甲基化状态得到了逆转,p27kip1基因的mRNA表达得到增加。认为5-Aza-CdR对BGC823细胞具有增生抑制作用,p27kip1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关。

P27kipl和CyclinA在胃癌中的表达及意义

目的 研究P27kipl和CyclinA蛋白在胃癌中的表达,探讨其在胃癌发生、发展中的可能作用及意义。方法 应用免疫组化S-P法检测P27kipl和CyclinA蛋白表达情况。结果 P27kipl和CyclinA蛋白在62例胃癌中表达阳性率分别为27.4％和41.9％;58例癌前病变中分别为44.8％和22.4％;25例正常对照组中分别为84.0％和0.0％,胃癌与癌前病变、正常对照组相比有显著性差异(P<0.05)。在胃癌中P27kipl蛋白表达与CyclinA蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论 P27kipl在胃癌中的表达降低,CyclinA在胃癌中高表达,两者与胃癌发生机制有关,且具有相关性。

外源性p27kip1基因转染诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探索前列腺癌基因治疗的新途径。方法 用脂质体介导 p2 7kip1基因转染前列腺癌 PC- 3 M细胞 ,SABC免疫组化法检测癌细胞外源性 p2 7kip1基因表达 ;MTT比色分析检测癌细胞体外生长活性 ;流式细胞仪 ( FCM)分析细胞周期改变 ;DNA L adder、吖啶橙 -溴化乙啶荧光染色法检测细胞凋亡。结果 发现外源性 p2 7kip1基因转移后 ,前列腺癌细胞 p2 7kip1蛋白水平显著增强 ( P<0 .0 1) ,体外生长抑制 12 .2 4%～ 3 6.5 2 % ( P<0 .0 1) ,出现 G0 / G1 期细胞周期阻滞及凋亡性“亚 G1期”峰 ,电泳可见典型的“梯状”条带 ,凋亡比率为 18.5 % ( P<0 .0 1)。结论 转染外源性p2 7kip1基因能增强对细胞周期的负性调节 ,显著诱导前列腺癌细胞凋亡 。

P27KIPL蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的 探讨P2 7KIPL蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及其与生物学行为和预后的关系。方法 采用免疫组化SP法检测 88例卵巢浆液性肿瘤中P2 7KIPL蛋白的表达水平。结果 6 1例卵巢浆液性囊腺癌中P2 7KIPL阳性表达率为 4 6 % (2 8/ 6 1例 ) ,明显低于浆液性囊腺瘤 80 % (12 / 15例 )和浆液性交界性肿瘤 75 % (9/ 12例 ) (P <0 0 5 )。P2 7KIPL阳性表达在Ⅰ级癌中表达率最高 73 3% ,Ⅱ级癌 4 6 7% ,Ⅲ级癌表达最低 12 5 %。三组之间差异显著 (P <0 0 5 ) ,P2 7KIPL阳性表达与组织分级呈负相关。早期 (Ⅰ Ⅱ期 )P2 7KIPL表达率 76 % ,明显高于晚期 (Ⅲ Ⅳ期 ) 2 7% (P <0 0 5 )。结论 P2 7KIPL蛋白表达水平可能与卵巢浆液性囊性癌组织分化、临床分期有关。

p27kip1基因转染联合化疗对胃癌细胞生长的影响

背景：p27kipl是一种抑癌基因，早期研究显示p27kipl基因转染能明显抑制胃癌、食管癌细胞生长．表明该基因疗法可能是治疗胃癌、食管癌的新途径，深入阐明p27kipl的抑癌机制，可为p27kipl基因治疗胃癌、食管癌提供可靠的理论基础。目的：研究p27kipl基因转染联合化疗对胃癌细胞生长的影响。方法：将p27kipl重组腺病毒（Ad-p27kipl）转染胃癌细胞SGC-7901，免疫细胞化学法检测p27kipl的表达。加入5-氟尿嘧啶（5-FU）和顺铂（DDP）后．甲基噻唑基四唑（MrIT）法测定细胞生长抑制率,^3H-胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR）掺入试验测定DNA的合成。结果：Ad-p27kipl转染胃癌细胞后，p27kipl表达明显增强。加入5-FU和DDP后，细胞生长抑制率显著增高．^3H-TdR掺人量显著降低（P〈0．01）。结论：p27kipl基因转染联合化疗能明显抑制胃癌细胞的生长。

p27 kipl与膀胱癌

p27 kipl是近年发现的具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、诱导分化等作用的抑癌因子。本文就有关膀胱癌中p27 kipl蛋白表达及抑癌作用进行综述。 1 p27 kipl基因及其蛋白 1994年,Polyak等在转化生长因子β和经细胞接触处理的生长抑制细胞中发现了一种热稳定蛋白,该蛋白能与细胞周期蛋白(cyclin)-细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)复合物(cyclin-CDK)紧密结合,抑制CDK的活性,称为p27 kipl。p27基因定位于人12号染色体的p12.

p27 kipl在胃癌中的表达及其意义

目的研究胃癌手术标本中p27kipl的表达以及临床病理学特征的关系。方法应用免疫组织化学方法对20例正常胃粘膜及60例胃癌组织标本p27 kipl的表达及其临床病理学特征的关系进行分析。结果 p27 kipl在正常胃粘膜的阳性表达率为100％,在胃癌组中阳性表达率为51.67％,且在两组织中的表达差异有显著性(P<0.005)。p27 kipl的表达与胃癌的分化程度呈正相关,与癌组织的浸润深度、淋巴结转移呈负相关。结论 p27 kipl蛋白的表达与胃癌的病理学特征密切相关,可作为胃癌的分化程度、进展情况,并可能作为一个恶性程度高的指征。

PTTG和p27Kipl在肝癌中的表达及其临床意义

目的分析垂体肿瘤转化基因(PTTG)和p27Kipl基因在原发性肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测48例HCC及癌旁肝癌组织中PTTG蛋白、p27Kipl蛋白的表达情况。结果 HCC、癌旁和正常肝组织的PTTG蛋白阳性表达率分别是70.8%(34/48)、91.7%(44/48),二者之间的差异有统计学意义(P<0.05),且PTTG蛋白在癌旁中的表达明显高于在HCC中的表达(P<0.05);HCC、癌旁组织的p27kip1蛋白阳性表达率分别是20.8%(10/48)83.3%(40/48),二者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。34例PTTG表达阳性组织中有10例见p27kip1表达阳性,而14例PTTG表达阴性组织中有9例见p27kip1阳性表达,二者比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论 PTTG和p27Kipl异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起重要的作用。

Transfection of p27^(kip1) enhances radiosensitivity induced by ^(60)Co γ-irradiation in hepatocellular carcinoma HepG_2 cell line

AIM: To study the cell cycle alterations of human hepatoma cell line HepG2 in vitro after ^60Co γ-irradiation and further to examine the mechanisms underlying the enhancement of radiosensitivity to γ-irradiation in HepG2 transiently transfected with wild type p27^kip1. METHODS: The proliferation of HepG2 cells was evaluated with MTT assay, and the cell cycle profile and apoptosis were assessed by cell morphology, DNA fragmentation analysis and flow cytometry. HepG2 cells were transfectedwith p27^kip1 wild type by using Lipofectamine (LF2000), and the expression and subcellular localization of p27^kip1 in HepG2 were detected by immunocytochemistry.RESULTS: ^60Co γ-irradiation inhibited the growth of HepG2 cells in a dose-dependent manner. Apoptosis of HepG2 cells was induced 48 h after ~, ray exposure. Furthermore research was carried out to induce exogenous expression of p27^kip1 in HepG2. The expression of p27^kip1 induced G0/G1 phase arrest in HepG2 cells. The overexpression of p27^kip1 enhanced ^60Co γ-irradiation-induced radiosensitivity in HepG2 cells. CONCLUSION: Overexpression of p27^kip1 is a rational approach to improve conventional radiotherapy outcomes, which may be a possible strategy for human hepatoma therapy.

TGF-β_1和P 27 Kipl表达与星形细胞瘤分化及Ki 67相关性分析

为探讨星形细胞瘤中 TGF-β_1和 P27 Kipl 表达与星形细胞瘤增殖分化的关系,利用免疫组化方法检测了31例星形细胞瘤中的 TGF-β_1和 P27 Kipl 及 Ki67的蛋白表达。结果表明.分化高、恶性度低的肿瘤TGF-β_1、Ki 67表达阳性低,而 P27 Kipl 表达阳性高;分化低、恶性度高的肿瘤 TGF-β_1、Ki 67的蛋白表达增高,P27 Kipl 表达减低。二组间差异有非常显著的意义(P<0.01)。P27 Kipl 与 Ki 67呈负相关(r=-0.458)。P27 Kipl 阳性者平均生存期较阴性者长。上述结果提示,TGF-β_1和 P27 Kipl 与星形细胞瘤的增殖分化有关,P27 Kipl 的失活可作为判断星形细胞瘤恶性程度和预后的参考指标。

胃癌组织中P27kipl和PCNA的表达及其临床意义

目的 研究 p27kipl和PCNA在胃癌中的表达及其临床意义。方法 用免疫组化方法检测78例胃癌组织中p27kipl和PCNA的表达。结果 78例胃癌组织中p27kipl阳性表达36例(46.2%) ,PCNA阳性表达42例(53.8 %) ,p27kipl阳性率在分化程度低、浸润浆膜和有淋巴结转移的胃癌中明显下降(p<0.05) ,P27kipl和PCNA表达呈负相关性。结论 P27kipl和PCNA可作为判断胃癌生物学行为和预后的指标。

腺病毒介导的p27kip1对食管癌裸鼠模型抑制的作用

目的:用腺病毒为载体,来研究p27kip1基因对食管癌的体内抑制作用.方法:用人食管癌细胞Eca109接种于裸鼠皮下,原代生长后在鼠间传代,再用组织块移植法构建食管癌裸鼠模型,应用直接注射法,将成功构建的携带人p27kip1基因的重组腺病毒及LacZ重组腺病毒导入裸鼠食管癌瘤体中,与对照组比较,绘制肿瘤生长曲线,并计算肿瘤生长抑制率.结果:p27kip1基因治疗组肿瘤生长明显受到抑制,与对照组比较,有显著性差异(P<0.001),肿瘤生长抑制率达64.1%.结论:腺病毒介导的p27kip1基因对食管癌具有较显著的体内抑制作用.

消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的分子机制

目的观察消岩汤对WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平变化,探索消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7细胞增殖的分子机制。方法WISP2/CCN5 shRNA慢病毒质粒转染MCF-7细胞,构建WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞系,采用高、中、低浓度的消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞24、36及48 h后,检测细胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平。结果WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖抑制率低于空白组和空载组(P<0.05),消岩汤干预组细胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05);高浓度消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞48 h组细胞增殖抑制率高于相同浓度孵育24 h组(P<0.05)。WISP2/CCN5基因敲减组Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白组和空载组(P<0.05,P<0.05),而p27Kip1 mRNA和蛋白水平则低于空白组和空载组(P<0.05,P<0.05)。消岩汤干预组的Skp2 mRNA和蛋白水平低于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05,P<0.05),而p27Kip1 mRNA和蛋白水平则高于WISP2/CCN5基因敲减组(P<0.05,P<0.05)。结论消岩汤干预WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞,在mRNA和蛋白水平下调Skp2表达,上调p27Kip1表达,抑制MCF-7细胞增殖;2.高浓度消岩汤对细胞增殖活性的抑制较显著,孵育时间较长组对细胞增殖活性的抑制较显著。