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p27^kipl基因诱导食管癌细胞凋亡的实验研究
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作者 吴清明 童强 《胃肠病学》 2002年第B11期26-27,共2页
关键词 p27^kipl基因 食管癌 细胞凋亡 实验研究
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长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22调控微小RNA-27b-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
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作者 周金阔 张晋弘 +3 位作者 史晓晶 刘广顺 姜磊 刘倩峰 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期52-59,共8页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CA... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)22调控微小RNA(miR)-27b-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集52例OSCC患者的癌组织及癌旁组织标本,体外培养人正常口腔角质细胞HOK和3种人OSCC细胞(CAL-27、SCC-25和HSC-3),实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织、癌旁组织、HOK细胞和3种OSCC细胞中SNHG22、miR-27b-3p表达情况。对SCC-25细胞进行转染并将其分为Ctrl组(未进行转染)、si-SNHG22组、si-NC组、miR-27b-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、si-SNHG22+inhibitor-NC组和si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组,检测各组SCC-25细胞增殖情况[细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测增殖率、流式细胞术检测增殖指数(PI)];Transwell实验检测各组SCC-25细胞侵袭情况;划痕愈合实验检测各组SCC-25细胞迁移情况;双荧光素酶实验验证SNHG22与miR-27b-3p的靶向作用关系。结果与癌旁组织比较,OSCC癌组织中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低(P<0.05);与HOK细胞比较,CAL-27、SCC-25和HSC-3细胞中SNHG22表达显著升高,miR-27b-3p表达显著降低,且SCC-25细胞中SNHG22与miR-27b-3p的表达与HOK细胞差异最大(P<0.05)。与Ctrl组比较,si-SNHG22组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著减少(P<0.05),miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05);与si-SNHG22组比较,si-SNHG22+miR-27b-3p inhibitor组SCC-25细胞增殖率、PI、侵袭数和划痕面积愈合率均显著增加(P<0.05)。双荧光素酶实验显示SNHG22与miR-27b-3p存在靶向作用关系。结论SNHG22在OSSC中高表达,miR-27b-3p在OSSC中低表达,SNHG22可能通过海绵化miR-27b-3p促进SCC-25细胞增殖、侵袭和迁移,SNHG22/miR-27b-3p轴可能是OSCC一个新的诊断和治疗靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因22 微小RNA-27b-3p 口腔鳞状细胞癌 增殖 侵袭 迁移
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胃肠道类癌中p27^(kip1)、PCNA表达及p16基因缺失 被引量:4
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作者 牟坤 刘洪琪 +2 位作者 蔡毅然 张廷国 周志强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第5期514-518,共5页
目的 :探讨 p2 7kip1 、PCNA及 p1 6与胃肠道类癌转移的关系。 方法 :采用免疫组化SABC法检测 2 5例胃肠道类癌组织中p2 7kip1 和PCNA蛋白表达 ,同时用PCR法检测 p1 6基因的缺失情况。 结果 :p2 7kip1 在胃肠道类癌阳性表达率为 64 % (1... 目的 :探讨 p2 7kip1 、PCNA及 p1 6与胃肠道类癌转移的关系。 方法 :采用免疫组化SABC法检测 2 5例胃肠道类癌组织中p2 7kip1 和PCNA蛋白表达 ,同时用PCR法检测 p1 6基因的缺失情况。 结果 :p2 7kip1 在胃肠道类癌阳性表达率为 64 % (1 6/ 2 5) ,PCNAⅠ~Ⅱ级和Ⅲ~Ⅳ级表达率分别为 56 %、44 %。 2种蛋白阳性表达率与分化程度无相关性 (P >0 0 5) ,与淋巴结转移相关 (P <0 0 5)。p2 7kip1 与PCNA表达负相关。p1 6基因纯合性缺失率为 48% (1 2 / 2 5) ,其缺失率与类癌分化程度和淋巴结转移无关。结论 :p2 7kip1 低表达、PCNA高表达与胃肠道类癌转移有关 ,胃肠道 ;类癌的发生与p1 6基因缺失有关 ,但可能为早期分子事件。 展开更多
关键词 胃肠道类癌 p27^KIpL pCNA p16基因 增殖细胞核抗原 基因缺失
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p21^(cip1)和p27^(kip1)基因遗传多态与食管癌及贲门癌发病风险的关联 被引量:6
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作者 郭炜 崔雅静 +3 位作者 方淑梅 李琰 王娜 张健慧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期194-199,共6页
背景与目的:有研究表明p21cip1和p27kip1的基因多态性与乳腺癌、肺癌、前列腺癌等肿瘤易感性有关。本研究分析中国北方高发区人群食管鳞状细胞癌(ESCC)和贲门腺癌(GCA)与p21cip1和p27kip1基因多态性之间的关系。方法:应用聚合酶链反应-... 背景与目的:有研究表明p21cip1和p27kip1的基因多态性与乳腺癌、肺癌、前列腺癌等肿瘤易感性有关。本研究分析中国北方高发区人群食管鳞状细胞癌(ESCC)和贲门腺癌(GCA)与p21cip1和p27kip1基因多态性之间的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测299例ESCC患者、256例GCA患者及437名健康对照人群p21cip13′非翻译区和p27kip1第109位密码子基因多态性分布情况。结果:ESCC患者组p21cip1T等位基因型频率(42.8%)显著高于健康对照组(36.7%)(P=0.02),ESCC和GCA患者组p27kip1V等位基因型频率(分别为96.8%和96.1%)均显著高于健康对照组(92.9%)(P值分别为0.00和0.02)。ESCC患者组p21cip1基因型频率分布与健康对照组相比有显著性差异(P=0.04),与C/C和C/T基因型相比,T/T基因型可显著增加ESCC的发病风险(校正OR=1.93,95%CI=1.12~3.94)。ESCC和GCA患者组p27kip1基因型频率分布与健康对照组相比均有显著性差异(P分别为0.00和0.01),与V/G和G/G基因型相比,V/V基因型可显著增加ESCC和GCA的发病风险(校正OR分别为2.44和2.01,95%CI分别为1.21~4.02和1.12~3.68)。当按吸烟和上消化道肿瘤家族史状况进行分层分析时发现,与V/G和G/G基因型相比,V/V基因型可显著增加吸烟人群患ESCC和GCA(校正OR分别为2.24和2.61,95%CI分别为1.14~4.03和1.25~3.82)以及有家族史人群患ESCC的发病风险(校正OR=2.04,95%CI=1.04~3.43)。两基因联合分析显示,携带p21cip1T/T和p27kip1V/V基因型可显著增加患食管癌和贲门癌的发病风险(校正OR分别为3.78和2.56,95%CI分别为1.46~5.89和1.06~4.78)。结论:在中国北方人群中,p21cip1基因多态性可能与食管癌的易感性有关,p27kip1基因多态性可能与食管癌和贲门癌的易感性有关,而且这两个基因的多态性可能在食管癌和贲门癌发病中起联合作用。 展开更多
关键词 p21^cip1基因 p27^KIp1基因 单核苷酸多态性 食管肿瘤 胃肿瘤
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PTEN、P27基因甲基化及蛋白表达与子宫内膜癌发生发展的关系 被引量:7
5
作者 岑慧 柯珮琪 +3 位作者 王莉 舒珊荣 费慧 沈宏伟 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-31,共4页
目的:探讨PTEN及P27基因甲基化状态及其蛋白表达与子宫内膜癌发生发展的关系。方法:用甲基化特异性PCR检测36例子宫内膜癌、17例子宫内膜增生症及27例正常子宫内膜组织中的PTEN及P27基因甲基化情况;应用免疫组化Elivision二步法检测PTEN... 目的:探讨PTEN及P27基因甲基化状态及其蛋白表达与子宫内膜癌发生发展的关系。方法:用甲基化特异性PCR检测36例子宫内膜癌、17例子宫内膜增生症及27例正常子宫内膜组织中的PTEN及P27基因甲基化情况;应用免疫组化Elivision二步法检测PTEN、P27基因在以上3种组织中蛋白表达情况。结果:在子宫内膜癌及子宫内膜增生症中PTEN及P27基因甲基化率明显高于正常子宫内膜(P<0.05),在子宫内膜癌中PTEN及P27蛋白表达率明显低于子宫内膜增生症及正常子宫内膜(P<0.05)。同时,PTEN蛋白表达与P27蛋白表达呈正相关(r=0.491,P=0.005)。结论:PTEN及P27基因甲基化可能参与子宫内膜癌的发生发展;P27基因甲基化可能是子宫内膜癌早期分子事件,可作为子宫内膜癌发生的预测及预防的靶点;在子宫内膜癌中,PTEN蛋白与P27蛋白表达间存在正向调控关系。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 pTEN基因 p27基因 甲基化
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抑癌基因p27对肾癌细胞系GRC-1生长的抑制作用 被引量:7
6
作者 张运涛 刘凡 +5 位作者 姜茹 南鹏娟 汪勇 于文强 刘荣福 李玉梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第17期1566-1568,共3页
目的 探讨 p2 7基因对肾癌 GRC- 1细胞系生长的抑制作用 ,为肾癌发生机制的研究和基因治疗提供理论依据 .方法 采用基因转染技术 ,将 p2 7c DNA转染到肾癌 GRC- 1细胞系中 ,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响 .结果 转染 p2 7基... 目的 探讨 p2 7基因对肾癌 GRC- 1细胞系生长的抑制作用 ,为肾癌发生机制的研究和基因治疗提供理论依据 .方法 采用基因转染技术 ,将 p2 7c DNA转染到肾癌 GRC- 1细胞系中 ,了解其对细胞增殖能力及细胞周期的影响 .结果 转染 p2 7基因的肾癌细胞生长受到抑制 ,其在软琼脂上克隆形成能力降低了大约 4倍 .对细胞周期分析表明 ,处在 G0 -G1 期的细胞由 32 .2 %增加到 6 6 .9% ,经 Dot blot和 Westernblot杂交证实 ,p2 7m RNA表达有明显差异 (P<0 .0 1) ,p2 7的蛋白表达量有明显差异 (P<0 .0 1) .说明 p2 7蛋白具有生长抑制功能 ,其作用点为 G1 - S.结论 提高肾癌细胞中 p2 7的表达 ,能抑制肿瘤细胞的生长 ,导入 p2 展开更多
关键词 肾癌 p27基因 基因表达 基因转染
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禽白血病劳斯肉瘤病毒衣壳蛋白P27基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:6
7
作者 乔彩霞 关云涛 +5 位作者 陈洪岩 刘怀然 蔡雪辉 李昌文 葛俊伟 刘家森 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期169-173,共5页
从人工感染禽白血病劳斯肉瘤病毒的SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中提取RNA,通过RT_PCR方法扩增出720bp的gagP27基因片段,克隆至pMD18_T载体,酶切鉴定后进行序列测定和分析,表明该片段编码序列与国外RSV分离株(JO2342)的同源性达97 3... 从人工感染禽白血病劳斯肉瘤病毒的SPF鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物中提取RNA,通过RT_PCR方法扩增出720bp的gagP27基因片段,克隆至pMD18_T载体,酶切鉴定后进行序列测定和分析,表明该片段编码序列与国外RSV分离株(JO2342)的同源性达97 3%。将该片段亚克隆至pGEX_6P_1原核表达载体,转化受体菌BL_21,经IPTG诱导表达,12%SDS_PAGE凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,证明目的基因得到高效表达,所表达蛋白是大小为56kD的融合蛋白,占菌体总蛋白的23%。表达产物经GlutathionSpharose4B树脂亲和层析法纯化后,每100mL菌液最终可获得5mg重组P27蛋白,蛋白纯度在90%以上。用兔抗自然P27蛋白阳性血清进行Westernblot检测,表明重组P27蛋白有抗原反应活性。用纯化的重组P27蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应。所制备的重组P27蛋白和多克隆抗体将为禽白血病的诊断及ELISA试剂盒的研制奠定基础。 展开更多
关键词 禽白血病 禽劳斯肉瘤病毒 p27基因 克隆 表达 多克隆抗体
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卵巢上皮癌中p16和p27基因的表达及其临床意义 被引量:5
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作者 李红梅 于月成 +2 位作者 宋天保 魏茂富 张春莉 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2006年第1期30-33,共4页
目的:研究p16,p27基因在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达及其临床意义.方法:用免疫组织化学方法检测18例卵巢正常组织、20例卵巢良性肿瘤及38例卵巢癌组织中p16,p27基因的表达情况,并与临床特征相比较.结果:P16蛋白在卵巢上皮性恶、良性肿... 目的:研究p16,p27基因在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达及其临床意义.方法:用免疫组织化学方法检测18例卵巢正常组织、20例卵巢良性肿瘤及38例卵巢癌组织中p16,p27基因的表达情况,并与临床特征相比较.结果:P16蛋白在卵巢上皮性恶、良性肿瘤和正常组织中的阳性表达率分别为39%,70%和83%;P27蛋白在卵巢上皮性恶、良性肿瘤和正常组织中阳性表达率分别为32%,65%和78%,P16和P27蛋白在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达明显低于卵巢正常组织和卵巢良性肿瘤.在细胞分化程度Ⅰ级的肿瘤中,P16和P27蛋白表达阳性率明显高于分化程度Ⅱ级和Ⅲ级的肿瘤(P<0.01);在临床分期早期的肿瘤中,P16和P27蛋白的表达率明显高于临床分期晚期的肿瘤(P<0.01).不伴淋巴转移的P16和P27蛋白的表达率明显高于有淋巴转移的蛋白的表达率(P<0.01).结论:p16,p27基因的表达与卵巢上皮性恶性肿瘤的细胞分化程度、临床分期及有无淋巴转移密切相关.临床检测卵巢上皮性肿瘤P16和P27蛋白的表达,可以作为判断卵巢上皮性恶性肿瘤生物学行为及患者预后的参考指标. 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 p27基因 p16基因:免疫组化
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P27基因甲基化在鼻咽癌发生发展中的作用 被引量:7
9
作者 倪海峰 黄光武 +2 位作者 张哲 江波 李勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期147-150,共4页
目的探讨P27基因甲基化在鼻咽癌发生发展中的作用。方法运用甲基化特异性PCR技术对5个鼻咽癌细胞株(CNE1、CNE2、TWO3、HNE1、HONE1)和1个正常鼻咽上皮细胞株(NP69),54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的P27基因启动子区甲基化状态... 目的探讨P27基因甲基化在鼻咽癌发生发展中的作用。方法运用甲基化特异性PCR技术对5个鼻咽癌细胞株(CNE1、CNE2、TWO3、HNE1、HONE1)和1个正常鼻咽上皮细胞株(NP69),54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的P27基因启动子区甲基化状态进行检测。半定量反转录PCR法检测加入甲基转移酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine)后CNE1和CNE2中P27基因转录表达的变化,分析鼻咽癌组织中P27基因甲基化与临床因素的关系以及去甲基化对P27基因转录表达的影响。结果正常鼻咽上皮细胞株NP69及20例正常鼻咽上皮组织中均未检测到P27基因甲基化;5个鼻咽癌细胞株中P27基因甲基化频率为80%(4/5),54例鼻咽癌组织中P27基因甲基化频率为63%(34/54),二者与正常鼻咽上皮细胞株及正常鼻咽上皮组织比较差异均有统计学意义(P<0.01),进一步分析发现P27基因甲基化状态与患者年龄、性别、T分期、N分期、TNM分期、病理类型等临床因素均无相关性(P>0.05),经5-氮-2-脱氧胞苷处理后CNE1和CNE2中P27基因的转录表达增加。结论P27基因甲基化与其转录表达密切相关,是基因表达调节的一种重要方式。P27基因甲基化具有肿瘤特异性,为鼻咽癌早期事件,有望成为早期分子生物学辅助诊断的标志物,并有可能作为去甲基化基因治疗的靶点。 展开更多
关键词 基因 p27 鼻咽肿瘤 甲基化 5-氮-2-脱氧胞苷
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腺病毒介导的p27kip1基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响 被引量:6
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作者 张卫国 吴清明 +3 位作者 童强 于皆平 王小虎 谢国建 《胃肠病学》 2003年第4期210-214,共5页
背景:近年来胃癌基因治疗的研究取得了一定的进展,但总体疗效尚不尽人意,目前正积极寻求组织特异性基因作为胃癌基因治疗的突破点。目的:以腺病毒为载体,研究p27kipl基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响。方法:将成功构建的携带人p... 背景:近年来胃癌基因治疗的研究取得了一定的进展,但总体疗效尚不尽人意,目前正积极寻求组织特异性基因作为胃癌基因治疗的突破点。目的:以腺病毒为载体,研究p27kipl基因对胃癌细胞周期和DNA合成的影响。方法:将成功构建的携带人p27kipl基因的重组腺病毒载体Ad-p27kipl和LacZ重组腺病毒Ad-LacZ转染胃癌细胞系SGC-7901,并观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,^3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入实验测定细胞DNA合成。结果:Ad-p27kip1转染SGC-7901细胞后,细胞变圆、呈葡萄串样聚集以致脱落,G0/G1期细胞比例增加,8期、G2/M期细胞比例降低,并有凋亡发生,^3H-TdR掺入量亦显著降低。结论:腺病毒介导的p27kipl基因能使SGC-7901细胞产生G0/G1期阻滞,并能诱导细胞凋亡,抑制DNA合成,表明该基因疗法能有效抑制体外胃癌细胞的生长。 展开更多
关键词 腺病毒 介导 p27kipl基因 胃癌 细胞周期 DNA合成
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树舌多糖对小鼠HepA P16 P27 Rb基因表达的影响 被引量:5
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作者 王玉 于英君 +2 位作者 徐广有 王璐 周丽 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第6期1353-1356,共4页
目的:探讨树舌多糖抗肿瘤作用的机制. 方法:通过免疫组化、ELISA法分别测定瘤体和血清中抑癌基因P16,P27,Rb表达蛋白的量;通过透射电镜观察凋亡小体是否存在. 结果:树舌多糖作用后P16,P27,Rb基因表达蛋白的量与盐水组有差异具有统计学意... 目的:探讨树舌多糖抗肿瘤作用的机制. 方法:通过免疫组化、ELISA法分别测定瘤体和血清中抑癌基因P16,P27,Rb表达蛋白的量;通过透射电镜观察凋亡小体是否存在. 结果:树舌多糖作用后P16,P27,Rb基因表达蛋白的量与盐水组有差异具有统计学意义,免疫组化结果:bP<0.01, vs(1)(2);aP<0.05,vs(2)(3);dP<0.01,vs(3).ELISA结果: aP<0.05,vs(3);bP<0.01,cP<0.05,vs(4);dP<0.01,vs (3)(4);fp<0.01,vs(4);gP<0.05,hP<0.01,vs(3).且P16, P27表达的量与Rb呈负相关mr=-0.094(1),nr=-0.446 (1),再有观察到凋亡小体的存在. 结论:树舌多糖通过激活抑癌基因,抑制肿瘤的生长促进肿瘤细胞凋亡. 展开更多
关键词 树舌多糖 小鼠 HEpA p16 p27 RB基因表达 免疫组化 细胞周期
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转化生长因子β1和即刻早期基因及p27在中耳胆脂瘤上皮中的表达 被引量:16
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作者 江超武 展鸿谋 +4 位作者 王文惠 张林 金树珍 杨一兵 章宗籍 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期211-215,共5页
目的 研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor β1,TGF β1)、即刻早期基因 (c fos)、周期素依赖性激酶抑制蛋白 p2 7在中耳胆脂瘤上皮中的表达及相互之间的关系 ,探讨其表达对胆脂瘤侵袭能力的影响。方法 应用免疫组化链霉... 目的 研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor β1,TGF β1)、即刻早期基因 (c fos)、周期素依赖性激酶抑制蛋白 p2 7在中耳胆脂瘤上皮中的表达及相互之间的关系 ,探讨其表达对胆脂瘤侵袭能力的影响。方法 应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白 过氧化酶染色法检测TGF β1、c fos和 p2 7在 31例胆脂瘤上皮、11例胆脂瘤患者外耳道上皮和 10例正常外耳道上皮中的表达 ,应用计算机图像分析系统对其阳性表达进行定量分析。结果 TGF β1和c fos在胆脂瘤上皮中表达阳性率分别为 87 1%和 83 9% ,与胆脂瘤患者外耳道上皮和正常外耳道上皮相比表达差异有显著性。而p2 7在胆脂瘤上皮和外耳道上皮组上皮中均未见阳性表达。胆脂瘤上皮中c fos与TGF β1表达无相关性 (r =0 339,P =0 331) ;胆脂瘤侵袭能力与c fos表达有高度显著相关关系 (r =- 0 96 5 ,P <0 0 1) ,与TGF β1表达也有高度相关关系 (r =- 0 4 0 6 ,P <0 0 1)。 结论 即刻早期基因c fos在胆脂瘤中表达显著增强 ,且与胆脂瘤的侵袭能力有高度显著相关性 ,提示高c fos表达是胆脂瘤高增殖特征的因素之一。TGF 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 即刻早期基因 p27 中耳胆脂瘤 周期素依赖性激酶抑制蛋白
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p57^(Kip2)和p27^(Kip1)基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 高红 张志波 尚海 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期525-526,529,共3页
目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RTPCR技术,分别检测p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在108例胃癌组织及60例癌旁组织中的表达。结果p57Kip2基因mRNA在胃癌组织中阳性表达... 目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RTPCR技术,分别检测p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在108例胃癌组织及60例癌旁组织中的表达。结果p57Kip2基因mRNA在胃癌组织中阳性表达率为28.70%,显著低于癌旁组织中的阳性表达率56.67%(P<0.05),p57Kip2基因mRNA相对含量检测胃癌组织为0.59±0.17,显著低于癌旁组织1.63±0.21(P<0.05);p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中阳性表达率为23.15%,低于癌旁组织中的阳性表达率31.67%(P>0.05),p27Kip1基因mRNA相对含量检测胃癌组织为1.53±0.23,稍高于癌旁组织1.46±0.35(P>0.05)。结论胃癌组织中p57Kip2和p27Kip1基因蛋白表达的降低与转录机制有关,并在胃癌的发生中存在不同的抑癌途径或不同的调控机制。 展开更多
关键词 p57^Kip2基因 p27^KIp1基因 胃癌
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细菌内同源重组高效制备人突变p27基因重组腺病毒 被引量:4
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作者 陈珺 徐少勇 +2 位作者 邓长生 王家宁 黄永章 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第5期406-409,共4页
目的 :利用细菌内同源重组法 ,构建含人突变p2 7(hp2 7mt)基因重组腺病毒 .方法 :hp2 7mt自载体 pORF9 hp2 7mt中切出 ,亚克隆至穿梭质粒 pShuttle CMV中 ,形成转移质粒pShuttle CMV hp2 7mt;然后再用PmeI线性化的pShuttle CMV hp2 7mt... 目的 :利用细菌内同源重组法 ,构建含人突变p2 7(hp2 7mt)基因重组腺病毒 .方法 :hp2 7mt自载体 pORF9 hp2 7mt中切出 ,亚克隆至穿梭质粒 pShuttle CMV中 ,形成转移质粒pShuttle CMV hp2 7mt;然后再用PmeI线性化的pShuttle CMV hp2 7mt转化含腺病毒骨架质粒pAdeasy 1的超感受态BJ5 1 83,使其在细菌内发生同源重组 .重组质粒鉴定正确后经PacI酶切 ,转入Ad2 93细胞 ,包装成重组腺病毒Ad hp2 7mt.采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定 ,用紫外分光光度计进行滴度测定 .结果 :用含pShuttle CMV hp2 7mt转化含pAdeasy 1的超感受态BJ5 1 83后 ,可获得约 30 %的阳性重组质粒 .PCR检测表明重组腺病毒含有目的基因 .滴度为 7.95× 1 0 1 5pfu/L .结论 :用细菌内同源重组法可快速、高效制备均一的高滴度重组腺病毒 .为研究 p2 展开更多
关键词 同源重组 细菌 重组腺病毒 p27mt基因
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大肠癌组织中p16、Rb及p27基因启动子区甲基化状态检测 被引量:2
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作者 原志庆 崔静 +2 位作者 千新来 贺国洋 郑丽丽 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第3期379-381,共3页
目的:探讨大肠癌组织中p16、Rb和p27基因启动子区甲基化状态的改变及意义。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测56例大肠癌及其相应癌旁正常上皮、42例腺瘤组织中p16、Rb和p27基因启动子区甲基化状态。结果:腺瘤、癌组织中p16和... 目的:探讨大肠癌组织中p16、Rb和p27基因启动子区甲基化状态的改变及意义。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测56例大肠癌及其相应癌旁正常上皮、42例腺瘤组织中p16、Rb和p27基因启动子区甲基化状态。结果:腺瘤、癌组织中p16和p27基因启动子区甲基化率均较正常组织增加(χ2=4.680、9.091和4.008、10.618,P<0.05);Rb基因启动子区甲基化率无明显变化(χ2=2.513和3.125,P>0.05),而且甲基化水平低。癌组织中p16和p27基因启动子区甲基化状态与其蛋白表达负关联(rP分别为0.894和0.920,P<0.001),而Rb基因启动子区甲基化状态与蛋白表达无关联(rP=0.026,P=0.661)。p16基因启动子区高甲基化状态与大肠癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(χ2=10.757,6.229和5.707,P<0.05),而p27高甲基化状态仅与淋巴结转移有关(χ2=10.475,P<0.001)。结论:p16和p27基因启动子区高甲基化在大肠癌的发生、演进和转移中可能起重要作用。 展开更多
关键词 大肠癌 DNA甲基化 p16基因 RB基因 p27基因
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p27kip1基因纳米粒子抑制鼠移植静脉内膜增殖的实验研究 被引量:4
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作者 杨菁 宋存先 郎晓讴 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1192-1198,共7页
用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p... 用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p27kip1基因纳米粒子的体外释放情况,发现DNA体外最初释放速度较大,约1周后释放速度开始减缓,可维持平稳释放15天以上.体外转染大鼠血管平滑肌细胞,用流式细胞仪检测到p27kip1基因纳米粒子对细胞周期进程的抑制作用.建立自体静脉移植大鼠模型,随机分成三组进行试验:p27kip1基因纳米粒子组,空白纳米粒子组,单纯静脉移植组.分别于给药后3天、7天、14天、28天取材,HE染色及Verhoeff染色检测内膜厚度,蛋白质印迹检测P27抑癌基因蛋白的表达,免疫组化SABC法检测移植静脉内膜PCNA、E2F表达.动物模型试验中转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P<0.01);转基因组PCNA的表达较其他组明显降低(P<0.01);转基因组E2F的表达7 ̄14天较其他组显著降低(P<0.01);对照组及单纯静脉移植组之间均无明显差异.纳米粒子作为p27kip1基因载体能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖. 展开更多
关键词 p27KIp1基因 再狭窄 纳米粒子 静脉移植
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鼻咽癌组织HSP27与P53、P21癌基因蛋白表达相关性研究 被引量:8
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作者 刘立思 肖成峰 +2 位作者 甄宏韬 刘争 何琼钦 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期365-367,369,共4页
探讨鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中热应激蛋白 2 7(heat stress protein 2 7,HSP2 7) ,P5 3及 P2 1癌基因蛋白表达水平及其相互关系 ,采用间接免疫荧光染色和 SABC相结合的双重荧光染色法 ,分析 3种蛋白在鼻咽癌发生、... 探讨鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中热应激蛋白 2 7(heat stress protein 2 7,HSP2 7) ,P5 3及 P2 1癌基因蛋白表达水平及其相互关系 ,采用间接免疫荧光染色和 SABC相结合的双重荧光染色法 ,分析 3种蛋白在鼻咽癌发生、发展及预后中的作用。结果发现 :32例 NPC中 HSP2 7,P5 3和 P2 1阳性表达比例 (阳性率 )分别为83.8%、 5 0 %、 93.8% ;8例鼻咽增生性炎症组织中三者比例为 4/ 8、 0 / 8、 4/ 8;4例正常组织则全部阴性表达。 HSP2 7、P5 3、 P2 1的共表达以 HSP2 7与 P2 1的共表达最为显著 ,且与 NPC恶性程度和临床分期有关。提示 :HSP2 7及 P2 1阳性表达可能是 NPC发生的早期变化 ,可将二者联合作为 NPC早期诊断及预防的敏感生物标志物。 展开更多
关键词 鼻咽癌 热应激蛋白27 p53 p21 基因蛋白
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p27kip1基因对食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成的影响 被引量:5
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作者 童强 王小虎 +1 位作者 谢国建 吴清明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期100-102,共3页
目的 :研究p2 7kip1基因对人食管癌细胞EC -970 6的DNA复制及蛋白质合成的影响。方法 :重组体腺病毒Ad -p2 7kip1转染EC -970 6细胞 ,采用细胞生长计数、[3H] -TdR、[3H] -Leucine掺入法、流式细胞术 ,研究其对食管癌细胞DNA复制及蛋白... 目的 :研究p2 7kip1基因对人食管癌细胞EC -970 6的DNA复制及蛋白质合成的影响。方法 :重组体腺病毒Ad -p2 7kip1转染EC -970 6细胞 ,采用细胞生长计数、[3H] -TdR、[3H] -Leucine掺入法、流式细胞术 ,研究其对食管癌细胞DNA复制及蛋白合成的影响。结果 :Ad -p2 7kip1组细胞生长明显受抑 ,[3H] -TdR和 [3H ] -Leucine掺入量均明显减少 ,与对照组比较P <0 0 1;食管癌细胞的增殖明显受抑制。结论 :p2 7可有效抑制食管癌细胞的增殖活性 ,这与其抑制食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成有关。 展开更多
关键词 p27KIp1基因 食管肿瘤 DNA复制 蛋白质合成 癌细胞 EC-9706细胞
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5-Aza-CdR对胃癌细胞系p27kip1基因异常甲基化的影响 被引量:6
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作者 王贺玲 张建 +1 位作者 李岩 王学清 《实用药物与临床》 CAS 2011年第2期101-103,共3页
目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞系SGC7901的p27kip1基因异常甲基化及表达的影响。方法选择不同浓度的5-Aza-CdR处理体外培养的SGC7901细胞后,用MSP法检测用药前后细胞中p27kip1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用... 目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞系SGC7901的p27kip1基因异常甲基化及表达的影响。方法选择不同浓度的5-Aza-CdR处理体外培养的SGC7901细胞后,用MSP法检测用药前后细胞中p27kip1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用药前后细胞中p27kip1的mRNA及蛋白表达的变化。结果 p27kip1基因的甲基化状态得到了逆转,p27kip1基因的mRNA和蛋白表达得到增加。结论 SGC7901细胞中p27kip1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关。 展开更多
关键词 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 p27KIp1基因 胃癌 甲基化
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长角血蜱甘肃株肌钙蛋白基因P27/30的克隆和序列分析 被引量:3
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作者 田占成 刘光远 +3 位作者 李知新 谢俊仁 王路 张林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期413-416,共4页
参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株肌钙蛋白P27/30基因的核苷酸序列,设计合成一对引物,从本实验室保藏的干净长角血蜱卵中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出607 bp的肌钙蛋白基因,将其克隆于PGEM-T-Easy载体,对其进行序列分析,并推导... 参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株肌钙蛋白P27/30基因的核苷酸序列,设计合成一对引物,从本实验室保藏的干净长角血蜱卵中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出607 bp的肌钙蛋白基因,将其克隆于PGEM-T-Easy载体,对其进行序列分析,并推导出氨基酸序列,将这一序列与国内外已发表的长角血蜱肌钙蛋白基因进行比较分析。结果表明本实验室保藏的长角血蜱甘肃株与上述已发表的Okayama株核苷酸序列同源性为92.1%,氨基酸同源性为86%。长角血蜱甘肃株与Okayama株、四川孤雌生殖株的发育有一定差异。经RT-PCR分析表明,该基因在长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱和饥饿成蜱这几个阶段均有表达。 展开更多
关键词 长角血蜱 肌钙蛋白基因p27/30 克隆 序列分析
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