禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质研制

为了临床检验中p27蛋白含量测定结果的量值溯源,制备禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质。建立同位素稀释质谱法对纯品禽白血病p27蛋白含量进行测定,结果表明,该方法准确、可靠,可以作为p27蛋白标准物质的定值方法。同时结合多家实验室定值,最终定值结果为(1.46±0.13)mg/mL。该标准物质均匀性良好,在–20℃、4℃和室温环境下可以稳定7天,在–70℃环境中可以保存6个月。禽白血病p27蛋白冻干粉标准物质的研制对禽白血病检测的质量控制、不同检测方法间的评价具有很好的实用价值。

过表达P27Kip1对胃癌细胞P27蛋白及其磷酸化产物表达分布的影响

目的:研究胃癌BGC823细胞系中过表达P27蛋白时,P27及其磷酸化蛋白在细胞中的分布。方法:将外源性P27^(kipl)基因转染人胃癌细胞系BGC823,应用流式细胞分析术检测转染组和对照组的细胞周期和细胞凋亡,采用Western blot和免疫荧光方法,检测P27蛋白和磷酸化P27蛋白(p-P27)在二组细胞中的表达和分布。结果:转染组细胞G_1期细胞数较对照组明显增加(62.783%vs.41.933%,P<0.001);转染组细胞凋亡指数(AI)显著高于对照组(26.3 vs.3.6,P<0.001)。转染组P27蛋白和p-P27表达均高于对照组。对照组P27蛋白主要在胞核内表达,p-P27主要在胞浆内表达;转染组P27蛋白主要在胞核内分布,p-P27蛋白在胞浆、胞核内均有分布表达,但主要分布在胞核内。结论:P27蛋白过表达能够使细胞周期停滞于G_1期,诱导细胞凋亡。推测胞核内P27蛋白水平和p-P27的核浆比值可能是评价肿瘤增殖活性的重要指标。

p27蛋白在乳腺癌中的表达及其临床病理意义

目的 :研究 p2 7蛋白在乳腺癌中的表达并探讨其临床病理意义 .方法 :应用免疫组织化学方法检测 80例乳腺癌、2 7例乳腺不典型增生以及 2 0例正常乳腺组织中p2 7表达并分析其与临床病理的相关性 .结果 :乳腺癌组织中 p2 7高表达率为 5 3.8% (4 3/ 80 ) ,明显低于乳腺不典型增生和正常乳腺组织 (P <0 .0 1) .p2 7表达与淋巴结转移、临床分期、组织学分级相关 (P <0 .0 5 ) .p2 7高表达的乳腺癌术后 5a无病生存率明显高于 p2 7低表达者 (P <0 .0 5 ) .结论 :乳腺癌组的p2 7高表达率明显低于对照组 ;p2 7高表达的乳腺癌患者预后好 ;p2 7是乳腺癌独立的预后因子 .

CyclinD1和P27蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨人脑胶质瘤组织中CyclinD1和P2 7蛋白的表达及其相互关系。方法 采用SP免疫组化技术检测脑胶质瘤和非肿瘤组织中两者的表达 ,并用彩色图像分析系统作定量分析。结果 ①两者的免疫反应复合物均定位于细胞核。②两者在脑胶质瘤中的表达均显著高于非肿瘤组织 ,且CyclinD1蛋白的表达强度随肿瘤恶性程度增加而升高 ,而P2 7蛋白的表达强度则随肿瘤恶性程度增高而下降 ,两者的表达呈显著负相关。③CyclinD1蛋白的表达强度愈高则预后愈差 ,而P2 7蛋白的表达强度愈低则预后愈差。结论 两者的异常表达可能与人脑胶质瘤的发生和发展有密切关系 ,且具有协同作用 ,其表达强度可客观地反映肿瘤的恶性程度和评价预后。

p27蛋白在结肠直肠癌中的表达与预后的关系

背景与目的:有研究表明p27蛋白在组织中表达水平的高低与某些肿瘤的预后有关,本研究拟探讨p27蛋白在结肠直肠癌中的表达水平与预后的关系。方法:用免疫组化法检测p27蛋白在82例结肠直肠癌中的表达水平,然后用χ2检验检测其与临床病理学特征的关系,Logrank检验p27蛋白的表达与生存时间的关系,Cox回归模型作单因素和多因素预后分析。结果:p27蛋白在结肠直肠癌中的高表达率为53.66%(44/82),低表达率为46.34%(38/82),p27蛋白低表达与肿瘤在肠壁的深浸润及淋巴结转移显著相关;Logrank检验发现p27蛋白的表达与结肠直肠癌患者的生存期呈正相关;Cox模型则显示p27蛋白可作为结肠直肠癌的一个预后指标。结论:p27蛋白低表达与肿瘤在肠壁的深浸润、易发生淋巴结转移、预后差、生存期短显著相关,p27蛋白高表达则相反。p27蛋白可作为结肠直肠癌患者预后的一个独立指标。

良恶性骨肿瘤p27蛋白表达与DNA含量研究

目的 :探讨良恶性骨肿瘤细胞 p2 7蛋白表达与 DNA含量的关系及意义。方法 :取骨肿瘤新鲜标本 5 2例(骨软骨瘤 10例 ,骨巨细胞瘤 10例 ,骨肉瘤 2 0例 ,其他恶性骨肿瘤 12例 ) ,运用流式细胞术、单克隆抗体技术和定量免疫荧光技术 ,检测瘤细胞 p2 7蛋白表达、S期细胞百分数 (SPF)及 DNA含量 (DI) ,分析三者之间的关系。结果 :5 2例骨肿瘤 p2 7蛋白表达的平均 FI值为 1.37(骨软骨瘤 2 .2 4± 0 . 38,骨巨细胞瘤 1.79± 0 .36 ,骨肉瘤1.0 6± 0 .39,其他恶性骨肿瘤 1.0 1± 0 .45 ) ;p2 7<1.37组 2 5例 ,均为恶性骨肿瘤 ;p2 7<1.37组的 DI、SPF均明显高于 p2 7≥ 1.37组 (P<0 .0 0 1)。结论 :p2 7蛋白表达减少 ,导致细胞周期失调 ,S期细胞增多 ,DNA合成增强 ,细胞过度增生、恶变 ,可能是骨肿瘤发生发展的原因之一。

CA-125抗原、肿瘤抑制蛋白质p53、Ki-67抗原及抑癌基因p27蛋白作为卵巢癌病理辅助诊断指标的评价

目的评价CA-125抗原(CA125)、肿瘤抑制蛋白质p53(P53)、Ki-67抗原(Ki-67)及抑癌基因p27蛋白(P27)作为卵巢癌辅助诊断指标的临床意义。方法采用组织芯片微阵列技术检测所选免疫组化指标在96例卵巢癌和22例卵巢良性瘤组织中的表达,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并以病理诊断为金标准,比较单项和多项免疫检测指标联合检测的准确性。结果卵巢癌和卵巢良性瘤组织中CA125、P53、Ki-67、P27的阳性表达率比较,差异均有统计学显著意义(P<0.05)。P53、CA125、Ki-67、P27单项检测的AUC分别为0.730(P<0.01)、0.657(P<0.05)、0.617(P>0.05)和0.371(P>0.05);CA125+P53、CA125+P53+Ki-67、CA125+P53+Ki-67+P27联合检测使ROC曲线下面积(AUC)分别提高到0.773(P<0.01)、0.804(P<0.01)和0.824(P<0.01)。结论多个免疫组化指标联合检测均能不同程度地提高检测效能,优于任何单项检测。

非小细胞肺癌中Skp2的表达及其与p27蛋白表达的关系

背景与目的S期激酶相关蛋白2(Skp2)是细胞周期正性调节因子之一,它能促进周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27的泛素化蛋白水解,在肿瘤中过表达,本研究旨在探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer NSCLC)中Skp2表达的临床意义及其与p27蛋白表达的关系。方法应用组织芯片和免疫组织化学方法检测Skp2和p27在68例NSCLC组织和17例正常支气管上皮细胞中的表达。结果Skp2仅在肺癌组织中表达,且与患者的组织学类型(P=0.039),肿瘤细胞的分化程度(P=0.016),性别(P=0.012)和吸烟与否(P=0.026)显著相关,而与患者的年龄和TNM分期无关。p27在正常支气管上皮细胞中均有表达,在肺癌组织中表达降低;Skp2阳性表达的患者中p27表达明显降低,两者呈负相关(P=0.021)。结论在NSCLC中,Skp2蛋白表达的增高与p27泛素化依赖的蛋白降解有关,提示Skp2蛋白过表达在NSCLC的发生和发展中可能起重要作用。

蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939增殖及cyclin E和P27蛋白表达影响的研究

目的已有诸多研究显示中药蟾蜍灵具有明显抑制肿瘤增殖的作用,观察蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939的cyclin E和P27表达的影响,探讨其调控胆管癌细胞增殖的途径和机制。方法 MTT比色法观察不同浓度蟾蜍灵(0.1、1、10μmol/L)对人胆管癌细胞QBC939增殖的影响;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)实验检测蟾蜍灵毒性;流式细胞术检测人胆管癌细胞QBC939细胞周期的变化;Western blot法测定cyclin E、P27蛋白水平变化。结果 MTT比色法结果表明蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939生长具有较强的抑制作用,并在一定范围内具有时间和浓度依赖性,流式细胞仪检测细胞周期阻滞在G0/G1期,具有良好的量效关系。Western blot测定cyclin E蛋白表达量下降,P27蛋白表达量升高。结论蟾蜍灵可能是通过阻滞细胞周期,减少cyclinE蛋白表达,增加P27蛋白表达,来达到抗肿瘤作用。

大肠癌p27蛋白表达与DNA倍体分析的研究

背景与目的:细胞周期调控的改变存在于绝大多数肿瘤中,因此可以认为肿瘤是一类细胞周期疾病。p27蛋白是细胞周期负性调控因子的主要成员,同时也是肿瘤的重要预后因子。p27蛋白表达下降及亚细胞定位改变在大肠癌发展中的意义尚不清楚。大肠癌中p27蛋白表达与DNA倍体关系尚未见报道。本实验研究大肠癌p27蛋白表达与临床病理特征及DNA倍体分析的关系。方法:应用免疫组化方法检测p27蛋白在40例大肠癌中的表达水平,同时应用病理图像DNA测量系统对癌组织进行倍体分析。结果:p27蛋白在大肠癌中的高表达率为62.5%(25/40),低表达率为37.5%(15/40),p27蛋白低表达与大肠癌分化程度低显著相关(P<0.05)。除胞核着色外,32.5%(13/40)的大肠癌出现胞浆免疫阳性反应。p27蛋白胞浆表达与Dukes分期晚(P<0.01)、易发生淋巴结转移显著相关(P<0.05)。p27蛋白低表达组DNA多倍体细胞检出率(22.2±11.3)%明显高于p27蛋白高表达组犤(8.0±7.7)%,P<0.001犦。结论:p27蛋白表达的下降及亚细胞定位改变促进大肠癌的发展;抑制DNA多倍体形成可能是p27蛋白的抑癌机理之一。

P27蛋白在牙源性肿瘤的表达

采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测４０例牙源性肿瘤中Ｐ２７蛋白表达情况。结果显示：不同类型牙源性肿瘤中有不同表达，良性肿瘤组表达率为３０．０％（６／２０），恶性肿瘤组为８５．０％（１７／２０），良恶性肿瘤组之间差异显著（Ｐ＜０．００５）。

p27蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨p2 7在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化S -P法测定 16份正常子宫内膜、18份子宫内膜不典型增生及 50份子宫内膜癌组织中的p2 7蛋白表达。结果 :p2 7蛋白在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜中的表达率分别为 34%、6 6 .6 7%和 93.75% ,正常子宫内膜及不典型增生组均显著高于子宫内膜癌组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。p2 7蛋白表达与子宫内膜癌组织学分级、肌层浸润程度及患者预后显著相关 (P <0 .0 5) ,但与临床分期无关。结论 :p2 7蛋白表达下降或缺失可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用 。

滋养细胞疾病中p27蛋白表达的研究

目的 探讨周期素依赖激酶抑制剂 p2 7蛋白在滋养细胞中的表达及其与滋养细胞疾病发生、发展和预后的关系。方法 采用免疫组织化学 SP(L SAB)法检测 35例滋养细胞中 p2 7蛋白的表达情况。结果 p2 7蛋白在10例正常早孕绒毛和 15例良性葡萄胎中的表达阳性率明显高于 11例侵蚀性葡萄胎和 9例绒毛膜癌 (P<0 .0 5 )。正常早孕绒毛和良性葡萄胎 p2 7蛋白表达阳性率分别为 80 .0 % (8/10 )和 73.3% (11/15 ) ,而 2 0例恶性滋养细胞疾病中 ,仅 4例 p2 7蛋白表达阳性 (2 0 .0 % )。正常早孕绒毛和良性葡萄胎中 p2 7蛋白表达阳性率无显著差异 (P>0 .0 5 )。15例良性葡萄胎中 ,7例子宫大于停经月份者有 3例 p2 7蛋白表达阳性 ,而 8例子宫小于或相当于停经月份者 p2 7蛋白表达均为阳性 ,两者差异有显著性 (P<0 .0 5 )。随访 14例良性葡萄胎患者有 2例恶变 ,且其 p2 7蛋白表达均为阴性。结论 p2 7蛋白表达减少或缺失与滋养细胞疾病的发生、发展和转归有一定相关性 ,检测 p2 7蛋白在滋养细胞中的表达水平有助于良性葡萄胎的预后判断 ,可能用于指导治疗。

p27蛋白在不同分型腺性膀胱炎中的表达及其临床意义

目的:分析P27蛋白在不同临床分型和病理分型的腺性膀胱炎中的表达,探讨不同分型腺性膀胱炎的恶变可能性,为临床治疗提供依据。方法:对85例腺性膀胱炎组织进行临床分型和病理分型,25例正常膀胱黏膜组织作为对照,应用免疫组织化学(免疫组化)S-P法检测不同类型的腺性膀胱炎组织和正常膀胱黏膜组织中P27蛋白的表达程度,并利用全自动显微镜及图像分析系统对免疫组化染色结果进行图像采集及统计分析。结果:不同临床分型的腺性膀胱炎组织中,乳头型和肠腺瘤型腺性膀胱炎的P27蛋白阳性表达均显著低于正常膀胱组织(P<0.01),而慢性炎症型和滤泡型腺性膀胱炎的P27蛋白阳性表达与正常膀胱组织差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分型的腺性膀胱炎组织中,肠化生型和前列腺型腺性膀胱炎的P27蛋白阳性表达均低于正常膀胱黏膜组织(P<0.01),而移行上皮型腺性膀胱炎的P27蛋白阳性表达与正常膀胱组织差异无统计学意义(P>0.05)。结论:临床分型中,乳头型和肠腺瘤型腺性膀胱炎可能为癌前病变;病理分型中,肠化生型和前列腺型腺性膀胱炎可能为癌前病变。对于乳头型和肠腺瘤型腺性膀胱炎伴有肠化生或前列腺上皮化生者,癌变可能大,应积极手术治疗,术后抗肿瘤药物膀胱灌注,并密切随访。

胃癌及癌旁组织中SKP_2和p27蛋白表达及相互关系研究

目的研究胃癌及其癌旁组织中SKP2和p27蛋白表达水平,探讨两者的相互关系及其临床意义。方法49例胃癌及20例癌旁组织常规制作石蜡包埋切片,SKP2和p27染色方法为SP免疫组化法。结果胃癌组织中SKP2表达阳性率及其评分值明显高于癌旁组织(P<0.01),而p27则相反(P<0.05,P<0.01);SKP2表达阳性和(或)p27表达阴性的癌旁组织呈中至重度不典型增生。SKP2和p27蛋白表达与癌细胞浸润深度、有无淋巴结转移、淋巴结转移分站及有无远处转移有关(P<0.05,P<0.01)。在胃癌组织中SKP2与p27评分值之间呈负相关(r=-0.65,P<0.01)。结论SKP2和p27可能是反映胃癌发生、进展、生物学行为及预后的标记物。

左旋甲状腺素片对老年甲状腺癌术后疗效及T淋巴细胞亚群水平和p27蛋白表达的影响

目的研究左甲状腺素片对老年甲状腺癌疗效和T淋巴细胞亚群水平及p27蛋白表达的影响。方法选取内蒙古医科大学附属医院老年病科2016年7月—2017年8月收治的老年甲状腺癌122例,按用药方法分为对照组和观察组,每组61例。对照组接受甲状腺素替代疗法治疗,观察组口服左甲状腺素钠片治疗。观察并比较2组疗效、T淋巴细胞亚群水平和p27蛋白表达情况。结果观察组治疗后血清促甲状腺激素水平低于对照组(P <0. 01),血清游离三碘甲状腺原氨酸、血清游离甲状腺素、三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素水平均高于对照组(P <0. 01)。观察组治疗后血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇水平均低于对照组(P <0. 01)。观察组治疗后的血清CD3+、CD4+水平高于对照组,血清CD8+水平低于对照组(P <0. 01)。观察组p27蛋白阳性表达率高于对照组(χ~2=6. 07,P=0. 201)。结论左甲状腺素片治疗老年甲状腺癌效果显著,可改善血脂代谢和免疫功能,并促进p27蛋白表达。

P16、P27蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的为探讨P16、P27蛋白在食管鳞状上皮、增生上皮和癌变上皮中表达状况及其与鳞状细胞癌发生、进展和转移的相关性。方法采用SP免疫组织化学方法,检测72例(其中活检标本13例)食管癌组织中P16、P27蛋白的表达情况。结果P16、P27在食管癌和增生性上皮均有阳性表达,但两者相比均无统计学意义(P>0·05),在正常上皮组均无阳性表达;P16、P27在高分化鳞癌组阳性表达率均显著高于低分化鳞癌组(P<0·05);P16、P27在伴有淋巴结转移的食管癌组与不伴有淋巴结转移组比较差异显著(P<0·05)。P16在原发食管癌组阳性表达率和淋巴结转移癌中比较具有显著性差异(P<0·05)。结论P16、P27基因蛋白在食管癌组织中的表达与病理分化程度有关;P16的表达与转移癌的形成有关;P16、P27表达与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、浸润深度无明显相关性。

P27蛋白在腺性膀胱炎的表达及其与膀胱癌的关联

目的分析P27蛋白与腺性膀胱炎的症状严重程度、预后复发及其与膀胱癌的关联。方法应用免疫组化S-P法分别检测20例正常膀胱组织、43例腺性膀胱炎组织及25例膀胱癌组织中P27蛋白的表达程度,分别其与腺性膀胱炎的症状严重程度、预后复发及其与膀胱癌的关联。结果 P27蛋白阳性表达率在正常膀胱组织、腺性膀胱炎组织及膀胱癌组织中分别为80%,48.84%和32%,差异有统计学意义(P<0.05);在膀胱癌患者中,P27蛋白阳性者与P27蛋白阴性者术后复发率分别为12.5%和64.71%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 P27蛋白表达的下降或缺失,更容易诱发腺性膀胱炎及膀胱肿瘤的发生,增加膀胱癌患者术后的复发率。

骨肉瘤组织中Skp2、p27蛋白的表达变化及意义

目的观察p27和Skp2蛋白在骨肉瘤组织中的表达变化,并探讨其意义。方法选取40例骨肉瘤组织标本作为骨肉瘤组,另选40例正常骨组织作为对照组。用免疫组化SP法检测两组中的p27和Skp2蛋白。结果骨肉瘤组中Skp2的阳性表达率明显高于、p27的阳性表达率明显低于正常骨组织(P均<0.05)。Skp2表达与骨肉瘤组织类型、分化程度及淋巴结转移有关(P均<0.05);p27蛋白表达与骨肉瘤组织类型、分化程度有关(P均<0.05)。Skp2、p27蛋白在骨肉瘤组织中的表达呈负相关(r=-0.34,P<0.05)。结论 p27蛋白在骨肉瘤组织中呈低表达,Skp2蛋白在骨肉瘤组织中呈高表达,二者呈负相关关系,且与骨肉瘤的发生和转移有关,有可能成为了解骨肉瘤生物学行为的参考指标。

全反式维甲酸对血管平滑肌细胞增生和细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P27蛋白表达的影响

目的 :探讨全反式维甲酸对细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P2 7蛋白表达 ,血管平滑肌细胞DNA合成和增生的影响。方法 :取Wistar大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞培养 ,用3H TdR掺入率检测血管平滑肌细胞DNA合成和增生 ,用western blotting印迹和图像分析方法检测细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P2 7蛋白表达。结果 :全反式维甲酸 (2 5 μmol/L)明显抑制胎牛血清 (2 0 %FBS)诱导的血管平滑肌细胞P2 7蛋白表达 ;全反式维甲酸明显抑制胎牛血清诱导的血管平滑肌细胞增生和DNA合成。结论 :全反式维甲酸具有抗血管平滑肌细胞增生作用 ,其机制与促进P2