含有Etp28基因昆虫杆状病毒表达载体的构建

以含有柔嫩艾美耳球虫（广东株）子孢子折光体抗原Etp28基因的重组质粒pGEM－T－Etp28为材料，分别构建了可表达GST／6×His－Etp28融合蛋白和Etp28非融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体质粒pAcGHLT－A－Etp28和pSXIVVI＋X3-Etp28，并探讨了两种重组转移载体质粒的特点和应用前景．

柔嫩艾美耳球虫(广东株)子孢子折光体抗原p28基因的分析

将克隆的柔嫩艾美耳球虫广东株p28基因与柔嫩艾美耳球虫MerckstrainLS18株的折光体抗原p28基因和USDA－APIno．24株折光体抗原GX3262基因进行了序列比较．发现广东株和MerckstrainLS18株的折光体抗原核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别为99．9％和100％，且基因内富含AGC重复顺序；而GX3262的基因序列为P28基因C-端的组成部分，并无特别的疏水和亲水区．

癌基因p28^(GANK)突变体的构建及其对p53的调控

目的构建癌基因p28GANK缺失不同ankyrin序列的突变体,进一步研究p28GANK的功能及在肝癌发生发展中的作用。方法利用QuikChangSite-DirectedMutagenesisKit构建p28GANK5个ankyrin缺失突变体并检测各个突变体对p53的影响。结果构建出分别缺失第1个ankyrin(39～71aa)、第2个ankyrin(72～104aa)、第3个ankyrin(105～137aa)、第4个ankyrin(138～170aa)和第5个ankyrin(171～203aa)的突变体,琼脂糖凝胶电泳及蛋白免疫印迹法验证正确。野生型p28GANK可促进p53降解,其他突变体对p53的表达无明显影响。结论成功构建了p28GANK的5个突变体,证实p28GANK对p53的调控需要全部的ankyrin序列,为ankyrin的研究和p28GANK对肝癌的调控作用研究奠定了基础。

鼻咽癌中P28^(GANK)基因表达的研究进展

鼻咽癌治疗存在复发率高的难题，近年来以癌基因为靶点的生物学治疗被认为是未来治疗鼻咽癌的有效手段。分子机制研究表明，在细胞增殖和肿瘤发生发展中具有极为重要的作用。

山羊关节炎-脑炎病毒P28蛋白的表达与间接ELISA方法的建立

为建立检测山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)血清抗体的间接ELISA方法,本研究将原核表达并纯化的CAEV P28蛋白作为检测抗原,采用方阵法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,经过对反应条件的优化建立了CAEV间接ELISA抗体检测方法。该方法仅对CAEV血清检测为阳性,对口蹄疫、山羊痘和蓝舌病病毒的阳性血清检测结果均为阴性;敏感性试验表明标准阳性血清1∶3 200倍稀释时,检测结果仍为阳性。该方法的批内和批间重复试验的变异系数分别小于7%和10%。对人工感染山羊血清进行检测,该ELISA方法最早可以在第2周检出抗体,琼脂凝集免疫扩散试验(AGID)最早可以在第4周检出抗体;与AGID试验方法相比,ELISA检出率提高27.2%。结果表明,本研究所建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和可重复性,为该病的诊断和监测提供了有效的技术手段。

p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨p28GANK蛋白在肝细胞性肝癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法 收集HCC组织及其相应癌旁组织60例（其中32例伴有肝硬化组织）、正常肝组织30例,采用免疫组化法检测HCC、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织组织中p28GANK蛋白的表达,分析p28GANK蛋白表达水平与HCC患者临床病理特征关系。结果 p28GANK蛋白在HCC、癌旁肝组织、肝硬化组织性、正常肝组织阳性表达率分别为71.7%、10.0%、12.5%、6.7%,HCC中p28GANK蛋白的阳性表达率高于其他组织（P〈0.05）。HCC患者中,低分化（Ⅲ-Ⅳ级）、淋巴结和（或）远处转移及TNM分期Ⅲ＋Ⅳ者p28GANK蛋白表达阳性率分别高于高分化（Ⅰ-Ⅱ级）、无淋巴结和（或）远处转移、TNM分期Ⅰ＋Ⅱ者（P〈0.05）。结论p28GANK蛋白表达可能与HCC的发生发展有关,p28GANK可作为HCC诊断的分子标志物。

p28GANK蛋白表达与肝癌发病的相关性分析

目的分析p28GANK蛋白表达情况与原发性肝癌(PLC)发病的相关性。方法收集2015年3月—2018年3月河南省传染病医院肿瘤科行手术切除治疗并经病理证实的48例PLC患者的蜡块组织标本,其中有28例患者术中取得癌旁组织,均经10%甲醛溶液固定、石蜡包埋、切片,采用免疫组织化学S-P法染色法分析p28GANK蛋白表达水平,以同样方法评估组织标本中凋亡相关基因Bcl-2、Bax的蛋白质表达水平,并进行统计学分析。结果 p28GANK蛋白阳性表达多表现为棕黄色细小颗粒,定位于细胞核和细胞质。PLC组织中p28GANK蛋白及Bcl-2、Bax蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示,PLC组织中p28GANK蛋白与Bcl-2蛋白阳性表达存在明显相关性(P<0.05),而与Bax蛋白阳性表达不相关(P>0.05)。不同性别、年龄、最大肿瘤直径、肝功能分级的PLC患者组织中p28GANK蛋白阳性表达率无明显差异(P>0.05),但Ⅲ～Ⅳ期患者组织p28GANK蛋白阳性表达率明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者,有淋巴结或远处转移的患者组织p28GANK蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结或远处转移的患者(P<0.05)。结论 p28GANK蛋白表达与PLC的发生发展有关,高p28GANK蛋白表达可能通过上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达而影响肿瘤侵袭与转移。